Lacticaseibacillus paracasei CD12-1 штамми бактериявиест, ки қаблан аз шири анъанавии ферментшудаи қутос ҷудо карда шуда, хусусиятҳои номзадии пробиотикии он омӯхта шудаанд. Ин таҳқиқот на табобати колити захмдорро дар одамон бо CD12-1, балки танҳо таъсири пешгирикунандаи онро бар зидди колити шадиди таҷрибавие, ки дар мушҳои модинаи C57BL/6 бо декстрансулфати натрий (DSS) ба вуҷуд оварда шудааст, арзёбӣ кардааст. Мушҳо ба гурӯҳи назорати муқаррарӣ, назорати модели DSS ва се гурӯҳи вояи гуногуни CD12-1 ҷудо шуданд; дахолати бактериявӣ пеш аз таъсири DSS оғоз гардида, дар давоми ҳафтаи охирини додани DSS идома ёфт.

Модели DSS дар мушҳо коҳиши вазни бадан, болоравии индекси фаъолияти беморӣ (Disease Activity Index, DAI), кӯтоҳшавии рӯдаи ғафс, осеби луобпарда ва криптаҳо, талафоти ҳуҷайраҳои бокалшакл, камшавии сафедаҳои марбут ба монеаи рӯда ва афзоиши ситокинҳои проилтиҳобиро ба вуҷуд овард. Дар се гурӯҳи вояи CD12-1 қисми ин тағйирёбандаҳо бо дараҷаҳои гуногун сабуктар шуданд. Аммо ҷавоб муносибати хаттии «воя ҳар қадар зиёд шавад, фоида ҳамон қадар бештар мешавад»-ро нишон надод.

Гурӯҳи вояи паст ҳар рӯз 2 × 10⁷ CFU/муш, гурӯҳи вояи миёна 2 × 10⁸ CFU/муш ва гурӯҳи вояи баланд 2 × 10⁹ CFU/муш CD12-1 гирифтанд. Вояи паст аз ҷиҳати осеби гистопатологӣ, ҳуҷайраҳои бокалшакл, сафедаҳои монеаи эпителӣ ба монанди ZO-1 ва Occludin, қисми ситокинҳои илтиҳобӣ ва сатҳи ацетат/бутират профили мусбати фарогиртаринро нишон дод. Баръакс, вояи баланд дар маҳдуд кардани талафоти вазни бадан таъсири равшантар нишон дод. Аз ин рӯ, таҳқиқот хулосаи «вояи баландтарин беҳтарин аст»-ро танҳо бар асоси як меъёр дастгирӣ намекунад.

Дарозии рӯдаи ғафс дар гурӯҳи назорати муқаррарӣ 8,83 ± 0,32 cm ва дар гурӯҳи модели DSS 6,13 ± 0,12 cm чен карда шуд. Пас аз CD12-1 арзишҳо дар гурӯҳҳои вояи паст, миёна ва баланд мутаносибан 7,02 ± 0,21 cm, 7,07 ± 0,26 cm ва 7,02 ± 0,25 cm буданд. Дар ҳар се гурӯҳи дахолат дарозии рӯдаи ғафс нисбат ба гурӯҳи модели DSS ба таври оморӣ маънонок бештар буд (p < 0,05), аммо байни се воя фарқи маънонок дида нашуд (p > 0,05).

Ҳангоми арзёбии монеаи эпителии рӯда, вояи пасти CD12-1 сигнали иммуногистохимиявии ZO-1 ва Occludin-ро нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок зиёд кард; байни вояи паст ва назорати муқаррарӣ барои ин ду нишондиҳанда фарқи маънонок ёфт нашуд. Claudin-1 дар гурӯҳҳои CD12-1 тамоюли афзоиш нишон дод, вале фарқ нисбат ба гурӯҳи DSS ба аҳамияти оморӣ нарасид. Ин тафовут муҳим аст: таҳқиқот нишон намедиҳад, ки ҳамаи сафедаҳои пайвастшавии зич ба як дараҷа барқарор шудаанд.

Дар бофтаи рӯдаи ғафс TNF-α, IL-6 ва IL-1β бо DSS зиёд шуданд. Дар вояҳои паст ва миёна TNF-α ва IL-1β нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок пасттар буданд; коҳиши маъноноки IL-6 дар вояи паст мушоҳида шуд. Гарчанде IL-10 дар вояҳои паст ва миёна аз ҷиҳати ададӣ боло рафт, дар муқоисаи омории қисми натиҷаҳо ин афзоиш нисбат ба гурӯҳи DSS маънонок нест (p > 0,05). Аз ин рӯ, барои IL-10 гуфтан мумкин нест, ки «афзоиши маънонок исбот шудааст».

Секвениронии гени 16S rRNA нишон дод, ки дахолати CD12-1 бо тағйирот дар сохтори микробиотаи рӯда ҳамроҳ буд. Дар Lactobacillus, Bifidobacterium, Allobaculum, Akkermansia, Bacteroides, Sutterella, Desulfovibrio ва дигар таксонҳо вобаста ба воя робитаҳои гуногун дида шуданд. Дар таҳлили коррелятсионӣ баъзе бактерияҳо бо фаъолияти пасттари беморӣ ва нишондиҳандаҳои беҳтари монеа алоқаманд буданд, дар ҳоле ки дигарон бо нишондиҳандаҳои баланди илтиҳоб робита доштанд. Аммо ин робитаҳо далели сабабият нестанд; таҳлили 16S-и таҳқиқот фаъолияти воқеии метаболикии микроорганизмҳо ё муддати боқимондани CD12-1-ро дар рӯда мустақиман чен накардааст.

Дар кислотаҳои равғании занҷири кӯтоҳ (Short-Chain Fatty Acids, SCFAs) дар гурӯҳи модели DSS ацетат, пропионат ва бутират нисбат ба назорати муқаррарӣ ба таври маънонок кам шуданд. Вояи пасти CD12-1 ацетат ва бутиратро нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок зиёд кард ва ин ду нишондиҳанда аз гурӯҳи назорати муқаррарӣ ба таври маънонок фарқ надоштанд. Вояи миёна ацетатро зиёд кард; вояи баланд бошад, чунин профили васеи беҳбудии SCFA-ро нишон надод.

Муҳимтарин ҳадди тафсири таҳқиқот ин аст, ки натиҷаҳо далели табобати колити захмдор дар одамон нестанд. Тадқиқот танҳо дар мушҳои модина бо модели шадиди DSS гузаронида шуда, CD12-1 пеш аз ба вуҷуд овардани беморӣ дода шуд. Хусусияти музмин ва такроршавандаи колити захмдори инсон, фарқиятҳои ҷинсӣ, бехатарии дарозмуддат, вояи оптималӣ барои инсон ва самаранокии клиникӣ бо ин таҷриба муайян нашудаанд.

Саволи асосии таҳқиқот чӣ буд?

Саволи асосии таҳқиқот ин буд, ки оё штамми Lacticaseibacillus paracasei CD12-1, ки қаблан аз шири ферментшудаи қутос ҷудо карда шуда буд, агар пеш аз ба вуҷуд овардани илтиҳоби таҷрибавӣ дар рӯда ва ҳангоми ба вуҷуд овардани он дода шавад, метавонад осеби рӯдаи ғафсро, ки аз DSS ба вуҷуд меояд, кам кунад. Муаллифон на танҳо нишонаҳои беморӣ, балки бисёр нуқтаҳои ниҳоии якдигарро пуркунанда, аз ҷумла сохтори луобпарда, ҳуҷайраҳои бокалшакл, пайвастҳои зичи эпителӣ, ситокинҳо, микробиотаи рӯда ва метаболитҳои микробиро якҷоя арзёбӣ карданд.

Оё Ба Мушҳо Шири Ферментшудаи Қутос Дода Шуд?

Не. Шири ферментшудаи қутос ба мушҳо мустақиман дода нашуд; штамми бактериявии CD12-1, ки дар таҳқиқот истифода шуд, қаблан аз шири анъанавии ферментшудаи қутос ҷудо карда шуда буд ва дар ин таҳқиқот ба мушҳо суспензияҳои тару тозаи бактериявии CD12-1, ки дар PBS омода шудаанд, бо гаважи даҳонӣ дода шуданд.

Чаро CD12-1 омӯхта шуд?

Дар таҳқиқоти қаблии муаллифон гузориш шуда буд, ки CD12-1 ба шароити турш, намакҳои талха ва шароити тақлидшудаи меъдаю рӯда тобоварӣ нишон дода, фаъолияти антиоксидантӣ ва профили мувофиқи бехатариро намоиш додааст. Дар арзёбии геномӣ инчунин генҳои номзаде муайян шуданд, ки метавонанд бо мутобиқшавӣ ба муҳит ва вазифаҳои пробиотикӣ алоқаманд бошанд. Ин натиҷаҳои қаблӣ ҳамчун асос барои эҳтимоли зинда мондани штамм ҳангоми гузариши меъдаю рӯда ва фаъолияти он дар муҳити рӯда истифода шуданд. Аммо азбаски хусусиятҳои қаблии in vitro/геномӣ худ аз худ далели таъсири in vivo ба колит набуданд, таҷрибаи ҷории муш гузаронида шуд.

Модели колити бо DSS индуксияшуда чист?

Декстрансулфати натрий (DSS) агенти таҷрибавиест, ки бо консентратсияи муайян ба оби нӯшокии ҳайвоноти озмоишӣ илова карда мешавад, то дар луобпардаи рӯдаи ғафс осеб ва илтиҳоб ба вуҷуд орад. Дар ин таҳқиқот DSS бо вазни молекулавии 36.000–50.000 Da дар давоми ҳафтаи охир бо консентратсияи %2,5 (w/v) дода шуд. Дар модел нишонаҳои колити таҷрибавӣ, аз ҷумла талафоти вазни бадан, дарунравӣ, хун дар наҷосат, кӯтоҳшавии рӯдаи ғафс, осеби криптаҳо ва инфилтратсияи ҳуҷайраҳои илтиҳобӣ инкишоф ёфтанд.

Модели DSS метавонад баъзе хусусиятҳои клиникӣ ва гистопатологии колити захмдори инсонро тақлид кунад, аммо ҳамаи хусусиятҳои иммунологӣ, генетикӣ, муҳитӣ ва музмину такроршавандаи бемории инсонро бозсозӣ намекунад. Аз ин рӯ, наметавон фарз кард, ки дахолате, ки дар модели DSS самаранок аст, дар колити захмдори инсон ҳамон натиҷаро медиҳад.

Оё CD12-1 Дар Ин Таҳқиқот Колитро Табобат Кард?

Ин таҳқиқот табобати колити аллакай ташаккулёфтаро исбот намекунад. CD12-1 тақрибан ду ҳафта пеш аз таъсири DSS оғоз шуда, дар давоми ҳафтаи додани DSS идома ёфт; бинобар ин тарҳи таҷриба асосан таъсири пешгирикунанда/муҳофизатиро арзёбӣ мекунад ва дар бораи самаранокии терапевтӣ бар зидди колити захмдори аллакай ташаккулёфтаи инсон хулоса баровардан мумкин нест.

Гурӯҳҳои таҷрибавӣ чӣ гуна ташкил шуданд?

Дар маҷмӯъ 60 муши модинаи C57BL/6, 6-ҳафтаина ва озод аз патогени махсус (SPF) истифода шуданд. Вазни ибтидоии бадан 18 ± 2 g буд. Ҳайвонот дар ҳарорати 23 ± 2 °C, намии нисбии %50 ± 5 ва давраи 12 соат рӯшноӣ/12 соат торикӣ нигоҳ дошта шуданд; бистар ҳар ду рӯз иваз шуда, дастрасии озод ба ғизо ва об таъмин гардид. Пеш аз таҷриба давраи якҳафтаинаи мутобиқшавӣ гузаронида шуд.

Пас аз мутобиқшавӣ мушҳо ба таври тасодуфӣ ба панҷ гурӯҳ, ҳар кадом аз 12 ҳайвон, тақсим шуданд. Бо вуҷуди ин, манбаъ хабар медиҳад, ки аз ҳар гурӯҳ шаш муш бо истифода аз идентификаторҳои ҳайвонот ба таври тасодуфӣ ҳамчун когорти таҳлили биологӣ интихоб шуданд ва ҳамон шаш муш дар таҳлилҳои фенотипӣ, гистологӣ, биохимиявӣ, SCFA ва микробиотаи рӯда пайваста пайгирӣ шуданд. Ҳамин тавр нуқтаҳои ниҳоӣ дар сатҳи ҳамон фардҳо мутобиқ карда шуданд. Ҳаҷми асосии намунаи биологӣ барои расмҳо ва натиҷаҳои оморӣ дар ҳар гурӯҳ n = 6 буд.

CFU чӣ маъно дорад?

CFU (colony-forming unit; воҳиди колонияҳосилкунанда) воҳиди ҳисобкунии таҷрибавиест, ки миқдори микроорганизмҳои зиндаро ифода мекунад, ки метавонанд дар шароити парвариш афзоиш ёфта, колония ташкил кунанд. Дар таҳқиқот консентратсияи суспензияҳои бактериявӣ ба 1 × 10⁸, 1 × 10⁹ ва 1 × 10¹⁰ CFU/mL танзим карда шуд. Азбаски ба ҳар ҳайвон 0,2 mL дода шуд, вояҳои мувофиқи ҳаррӯза 2 × 10⁷, 2 × 10⁸ ва 2 × 10⁹ CFU/муш буданд.

DAI чиро чен мекунад?

Индекси Фаъолияти Беморӣ (Disease Activity Index, DAI) нишондиҳандаи шиддати колит дар ин таҷриба аст, ки ба пайгирии якҷояи талафоти вазни бадан, консистенсияи наҷосат ва нишонаҳои хун дар наҷосат асос меёбад. Вазни бадан, консистенсияи наҷосат ва ҳолати хуни наҷосатии мушҳо ҳар рӯз арзёбӣ шуданд. Баҳои баланд нишонаҳои вазнинтари бемории таҷрибавиро ифода мекунад.

Ҳадди формула: Мақола мегӯяд, ки DAI аз рӯйи ин меъёрҳо ҳисоб шудааст, аммо муодилаи возеҳи математикӣ барои он ки чӣ гуна баҳои се ҷузъ ба як арзиши DAI муттаҳид мешаванд, намедиҳад. Аз ин рӯ, дар ин ҷо формулаи эҳтимолии DAI, ки дар адабиёт истифода шуда метавонад, гӯё ба таҳқиқоти манбаъ тааллуқ дошта бошад, илова нашудааст.

Чаро дарозии рӯдаи ғафс арзёбӣ шуд?

Илтиҳоби шадиди рӯдаи ғафс, ки бо DSS ба вуҷуд оварда мешавад, метавонад бо кӯтоҳшавии рӯдаи ғафс ҳамроҳ бошад. Аз ин рӯ, дар анҷоми таҷриба рӯдаи ғафс бе кашидан хориҷ ва дарозии он чен карда шуд. Дар гурӯҳи назорати муқаррарӣ дарозии миёна 8,83 cm буд, ки дар гурӯҳи DSS ба 6,13 cm коҳиш ёфт ва дар се гурӯҳи CD12-1 ба тақрибан 7 cm боло рафт. Ҳар се воя аз гурӯҳи DSS ба таври маънонок фарқ доштанд, аммо гурӯҳҳои воя байни ҳам ба таври маънонок фарқ накарданд.

Байни се гурӯҳи вояи CD12-1 аз рӯйи дарозии рӯдаи ғафс фарқи маънонок муайян нашуд (p > 0,05). Аз ин рӯ, нишондиҳандаи дарозии рӯдаи ғафс худ аз худ вояи паст, миёна ё баландро нисбат ба дигарон бартарӣ намедиҳад.

Гистологияи H&E чиро нишон дод?

Аз қисми дисталии рӯдаи ғафс, тақрибан 1 cm дуртар аз мақъад, сегмент гирифта шуд; дар %4 параформальдегид мустаҳкам, ба парафин ҷойгир, бурида ва бо гематоксилин-эозин (H&E) ранг карда шуд. H&E барои арзёбии меъмории бофта ва осеби ҳуҷайравӣ истифода шуд. Дар гурӯҳи модели DSS рехтани эпителии луобпарда, ошкоршавии lamina propria, некрози ҳуҷайравӣ бо пикнози ядро ва пора-порашавӣ, атрофия/талафоти криптаҳо ва инфилтратсияи равшани ҳуҷайраҳои илтиҳобӣ мушоҳида шуд.

Дар гурӯҳҳои вояи миёна ва баланд, ҳарчанд сохтори луобпарда ва шумораи криптаҳо қисман беҳтар шуданд, ташкили номуназзами криптаҳо, инфилтратсияи ҳуҷайраҳои илтиҳобӣ ва варами фокалӣ идома дошт. Дар гурӯҳи вояи паст гузориш шуд, ки сохтори эпителӣ беҳтар ҳифз шудааст, криптаҳо бештар ва равшантар буда, инфилтратсияи ҳуҷайраҳои илтиҳобӣ маҳдудтар мондааст. Баҳои гистопатологӣ дар гурӯҳи вояи паст аз гурӯҳи назорати муқаррарӣ ба таври маънонок фарқ накард (p > 0,05).

Ҳадди такрорпазирӣ: Таҳқиқот мегӯяд, ки осеби гистопатологӣ аз рӯйи меъёрҳои Cooper ва ҳамкорон баҳогузорӣ шудааст, аммо ҳамаи бандҳои ин шкалаи баҳогузориро дар қисми усули худ такрор намекунад. Аз ин рӯ, ҷадвали баҳогузории гистопатологие, ки дар манбаъ дида намешавад, дар ин ҷо сохта нашудааст.

Ҳуҷайраҳои бокалшакл ва рангкунии PAS чиро нишон медиҳанд?

Ҳуҷайраҳои бокалшакл ҳуҷайраҳои махсуси эпителӣ дар луобпардаи рӯда мебошанд, ки луоб истеҳсол мекунанд. Қабати луоб байни микроорганизмҳо ва дигар мундариҷаи люмени рӯда ва эпителий монеаи физикӣ-химиявӣ месозад. Дар таҳқиқот буришҳои рӯдаи ғафс бо ғафсии 5 µm бо усули периодик кислота-Schiff (PAS) ранг карда шуда, ҳуҷайраҳои бокалшакл арзёбӣ шуданд.

Дар гурӯҳи DSS шумораи ҳуҷайраҳои бокалшакл нисбат ба назорати муқаррарӣ ба таври маънонок кам шуд; сохтори криптаҳо вайрон, эпителий тунук, ҳуҷайраҳои бокалшакл хурд ва рангкунии PAS суст гардид. Дар ҳамаи се гурӯҳи CD12-1 талафоти ҳуҷайраҳои бокалшакл нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок камтар буд (p < 0,05). Байни гурӯҳи вояи паст ва назорати муқаррарӣ аз рӯйи шумораи ҳуҷайраҳои бокалшакл фарқи маънонок ёфт нашуд (p > 0,05).

Чаро ZO-1, Occludin ва Claudin-1 чен карда шуданд?

ZO-1, Occludin ва Claudin-1 ҷузъҳои гуногуни комплекси пайвастшавии зич (tight junction) байни ҳуҷайраҳои эпителии рӯда мебошанд. Ин сафедаҳо ба танзими марзи байни ҳуҷайраҳои эпителӣ ва нигоҳ доштани тамомияти монеаи рӯда мусоидат мекунанд. Таҳқиқот ин сафедаҳоро бо усули иммуногистохимия (IHC) ранг карда, зичии миёнаи оптикии (Average Optical Density, AOD) минтақаҳои мусбатрангшударо бо ImageJ ҳисоб кардааст.

AOD нишондиҳандаи тасвирӣ барои муқоисаи миқдории шиддати сигнали оптикии тасвири рангшуда мебошад. AOD дар ин ҷо консентратсияи мутлақи сафеда нест; он барои муқоисаи шиддати сигнали иммуногистохимиявӣ байни гурӯҳҳо дар шароити муайяни рангкунӣ ва тасвиргирӣ истифода шудааст.

Ситокинҳои илтиҳобӣ чиро нишон медиҳанд?

Консентратсияи TNF-α, IL-6, IL-1β ва IL-10 дар бофтаи рӯдаи ғафс бо ELISA чен карда шуд. Дар Расми 4-и манбаъ ин арзишҳо бо воҳиди pg/mL нишон дода шудаанд. TNF-α, IL-6 ва IL-1β дар контексти таҷриба ҳамчун нишондиҳандаҳои ҷавоби проилтиҳобӣ ва IL-10 ҳамчун ситокини марбут ба ҷавоби танзимкунандаи зиддиилтиҳобӣ арзёбӣ шуданд.

Ин ҷадвал махсусан барои тафсири IL-10 муҳим аст. Гарчанде дар қисми муҳокимаи манбаъ беҳбудии тавозуни илтиҳобӣ бо вояи паст бо забони умумитар баён шудааст, маълумоти омории қисми натиҷаҳо нишон медиҳад, ки афзоиши IL-10 маънонок нест. Дар матни Verianla ҳадди натиҷаи оморӣ нигоҳ дошта шудааст.

Секвениронии 16S rRNA чиро чен мекунад?

Секвениронии гени 16S рибосомалии RNA усулест барои таҳқиқи сохтори таксономии ҷомеаҳои бактериявӣ дар намуна. Дар ин таҳқиқот аз мундариҷаи кӯррӯдаи ҳамон шаш муш ДНК-и микробӣ ҷудо карда шуда, минтақаи V3–V4-и гени бактериявии 16S rRNA зиёд ва дар платформаи Illumina NovaSeq 6000 секвениронӣ шуд.

Таҳлили 16S барои нишон додани сохтори нисбии ҷомеаи бактерияҳо кӯмак мекунад, аммо худ аз худ мустақиман муайян намекунад, ки микроорганизмҳо кадом генҳоро фаъол ифода мекунанд, кадом метаболитҳоро бо чӣ суръат тавлид мекунанд ё штамми CD12-1 дар рӯда чӣ қадар зинда мемонад. Худи таҳқиқот низ таъкид мекунад, ки ҳамзамон будани тағйироти таркиби микробиота ва SCFA занҷири мустақими сабабии микробиота → SCFA → монеаро исбот намекунад.

Фарқи индексҳои Chao1 ва Shannon дар чист?

Chao1 нишондиҳандаи гуногунрангии алфа аст, ки кӯшиш мекунад бойии таксонҳоро дар дохили намуна, махсусан таксонҳои мушоҳиданашуда ё нодирро ба назар гирад. Индекси Shannon бошад, на танҳо ба шумораи таксонҳо, балки ба тақсимоти нисбии онҳо низ ҳассос аст. Дар таҳқиқот индекси Chao1 дар гурӯҳи вояи паст нисбат ба дигар гурӯҳҳо ба таври маънонок баланд ва индекси Shannon дар гурӯҳи вояи баланд ба таври маънонок паст буд.

Баланд ё паст шудани як индекси гуногунрангӣ худ аз худ маънои «солимтар» ё «зараровартар»-ро надорад. Ин нишондиҳандаҳо сохтори математикии ҷомеаро тавсиф мекунанд ва тафсири биологӣ бояд бо таркиби таксонҳо ва дигар нишондиҳандаҳои беморӣ якҷоя анҷом дода шавад.

Bray–Curtis PCoA чиро нишон дод?

Масофаи Bray–Curtis ченаки гуногунрангии бета мебошад, ки то чӣ андоза монанд ё фарқ доштани таркиби микробии намунаҳоро ба таври миқдорӣ нишон медиҳад. Principal Coordinates Analysis (PCoA) ин масофаҳои бисёрченакаҳоро дар ду ё чанд меҳвар намоиш медиҳад. Дар графики PCoA-и манбаъ гурӯҳи назорати муқаррарӣ аз гурӯҳҳои гирифтори DSS равшан ҷудо буд. Гурӯҳҳои D, L ва M асосан рӯйи ҳам меомаданд, дар ҳоле ки тақсимоти гурӯҳи H ҷудотар менамуд.

Ҷудошавӣ дар PCoA нишон медиҳад, ки таркиби микробии гурӯҳҳо метавонад фарқ кунад; он худ аз худ исбот намекунад, ки кадом бактерия сабаби тағйирот аст ё ин фарқ сабаби беҳбудии беморӣ шудааст.

Оё Тағйироти Микробиота Механизми Муҳофизатии CD12-1-ро Исбот Мекунанд?

Не. Таҳқиқот байни баъзе авлодҳои бактериявӣ, нишондиҳандаҳои беморӣ ва кислотаҳои равғании занҷири кӯтоҳ робитаҳои оморӣ нишон дод; аммо таҳлили 16S rRNA фаъолияти метаболикиро мустақиман чен накард, пойдорӣ ва фаъолияти CD12-1 дар рӯда пайгирӣ нашуд ва таҳлили коррелятсионӣ сабабиятро муқаррар накард. Аз ин рӯ, натиҷаҳои микробиота ва SCFA бояд ҳамчун ҷавобҳои марбуте, ки бо дахолати CD12-1 ҳамроҳ буданд, тафсир шаванд.

Дар кадом гурӯҳҳои бактериявӣ тағйирот дида шуд?

Дар сатҳи филум Bacteroidetes, Firmicutes, Actinobacteria ва Proteobacteria дар ҳамаи гурӯҳҳо аз гурӯҳҳои бартаридошта буданд. Дар модели DSS нисбат ба назорати муқаррарӣ фаровонии нисбии Firmicutes ва Actinobacteria ба таври маънонок паст, Bacteroidetes ва Proteobacteria бошад ба таври маънонок баланд буданд.

Пас аз CD12-1, Actinobacteria дар гурӯҳи вояи баланд нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок бештар буд. Баръакс, Bacteroidetes дар ҳамаи гурӯҳҳои дахолат аз назорати муқаррарӣ баланд боқӣ монд ва аз гурӯҳи DSS ба таври маънонок фарқ накард. Фаровонии Firmicutes байни гурӯҳҳои D, L, M ва H қобили муқоиса буд.

Дар таҳлили умумии фаровонии нисбӣ дар сатҳи авлод, гурӯҳи DSS нисбат ба назорати муқаррарӣ Allobaculum, Lactobacillus, Bifidobacterium ва Ruminococcus-и камтар ва Bacteroides ва Oscillibacter-и бештар нишон дод. Дар гурӯҳи вояи баланд Allobaculum нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок баланд ва Oscillibacter ба таври маънонок паст буд. Дар ин таҳлили умумӣ барои Lactobacillus ва Ruminococcus пас аз CD12-1 фарқи маънонок дида нашуд; Bacteroides тамоюли ададии пасттар ва Bifidobacterium тамоюли ададии баландтар нишон дод, аммо фарқҳо маънонок набуданд.

Дар таҳлили иловагии фаровонии дифференсиалии манбаъ сохтори дигари муқоиса истифода шуд: дар гурӯҳи вояи паст Turicibacter ва Lactobacillus; дар гурӯҳи вояи миёна Parabacteroides ва Prevotella; дар гурӯҳи вояи баланд Akkermansia, Parabacteroides, Turicibacter, Bifidobacterium ва Allobaculum ҳамчун бойшуда гузориш шуданд. Дар вояи баланд Oscillospira ва Desulfovibrio пасттар буданд. Ин натиҷаҳои гуногуни таҳлил набояд ба як ҷумлаи «бактерияҳои хуб зиёд шуданд» кам карда шаванд.

Матритсаи коррелятсияро чӣ гуна бояд хонд?

Дар Расми 6-и манбаъ коррелятсияҳои байни авлодҳои бактериявӣ ва дарозии рӯдаи ғафс, DAI, баҳои гистопатологӣ, ҳуҷайраҳои бокалшакл, ZO-1, Occludin, Claudin-1 ва чор ситокин нишон дода шудаанд. Самти сурх коррелятсияи мусбат, самти кабуд коррелятсияи манфӣ ва ситорачаҳо аҳамияти омориро нишон медиҳанд. Робитаҳои маъноноке, ки дар матни таҳқиқот равшан зикр шудаанд, дар ҷадвали мустақили зер ҷамъбаст шудаанд.

Барои Prevotella, Turicibacter ва Akkermansia бо нишондиҳандаҳои омӯхташуда коррелятсияи маънонок гузориш нашудааст. Ғайр аз ин, ҳеҷ яке аз авлодҳои бактериявии омӯхташуда бо TNF-α ё IL-10 коррелятсияи маънонок нишон надод.

Норасоии усулӣ: Манбаъ расми коррелятсия ва арзишҳои p-ро медиҳад, аммо дар қисми усул равшан намегӯяд, ки коэффисиенти коррелятсия бо Pearson, Spearman ё усули дигар ҳисоб шудааст. Аз ин рӯ, матни Verianla усули коррелятсияро тахмин накардааст.

Чаро кислотаҳои равғании занҷири кӯтоҳ муҳиманд?

Кислотаҳои равғании занҷири кӯтоҳ (SCFAs) кислотаҳои хурди органикие мебошанд, ки бо метаболизми микробии рӯда алоқаманданд. Дар таҳқиқот ацетат, пропионат, бутират, изобутират, валерат ва изовалерат чен карда шуданд. Дар Расми 7-и манбаъ консентратсияҳо бо воҳиди µg/g нишон дода шудаанд.

Оё Вояи Баландтари CD12-1 Муҳофизати Қавитар Фароҳам Овард?

Не. Ҷавоби CD12-1 муносибати монотонии воя-ҷавобро нишон надод: дар ҳоле ки вояи баланд талафоти вазни баданро беҳтар маҳдуд кард, вояи паст дар гурӯҳи васеътари нуқтаҳои ниҳоӣ, аз ҷумла гистология, ҳуҷайраҳои бокалшакл, ZO-1/Occludin, нишондиҳандаҳои илтиҳобӣ ва ацетат/бутират профили беҳбудии фарогиртаринро нишон дод. Таҳқиқот вояи оптималиро муайян накард ва таъкид намуд, ки вояи баландтарро ба таври худкор фоиданоктар ҳисобидан мумкин нест.

Натиҷаҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ мекунад

• Ҳар се вояи CD12-1 баъзе нишондиҳандаҳои фаъолияти бемории бо DSS индуксияшударо нисбат ба гурӯҳи моделӣ сабуктар карданд.
• Ҳар се воя кӯтоҳшавии рӯдаи ғафсро, ки аз DSS ба вуҷуд омадааст, қисман кам карданд.
• Вояи паст дар сохтори гистологӣ ва ҳуҷайраҳои бокалшакл профили муҳофизатии фарогиртаринро нишон дод.
• Дар вояи паст арзишҳои AOD-и ZO-1 ва Occludin нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок зиёд шуданд.
• Вояҳои паст ва миёна сатҳи TNF-α ва IL-1β-ро нисбат ба гурӯҳи DSS ба таври маънонок кам карданд.
• Вояи паст IL-6-ро ба таври маънонок кам кард.
• Вояи паст ацетат ва бутиратро; вояи миёна ацетатро ба таври маънонок зиёд кард.
• Истифодаи CD12-1 бо тағйироти вобастанабуда аз воя дар таркиби микробиотаи рӯда ҳамроҳ буд.

Умумисозиҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ намекунад

• Наметавон хулоса кард, ки CD12-1 колити захмдорро дар одамон табобат мекунад.
• Таҳқиқот табобати колити аллакай ташаккулёфтаро насанҷид; дахолат пеш аз DSS оғоз шуд.
• Наметавон гуфт, ки вояи баландтарин беҳтарин воя аст.
• Наметавон гуфт, ки Claudin-1 ба таври маънонок ба ҳолати муқаррарӣ баргашт.
• Наметавон гуфт, ки IL-10 дар вояи паст аз ҷиҳати оморӣ ба таври маънонок зиёд шуд.
• Исбот нашудааст, ки тағйироти микробиота сабаби мустақими таъсири муҳофизатӣ мебошанд.
• Исбот нашудааст, ки афзоиши бутират мустақиман аз афзоиши гурӯҳи муайяни бактерияҳо ба вуҷуд омадааст.
• Колонизатсия шудани CD12-1 дар рӯда, муддати мондани он ё фаъолияти метаболикии он мустақиман чен карда нашудааст.
• Барои мушҳои нар, моделҳои колити музмин ё популятсияҳои инсонӣ ҳамон натиҷаҳоро фарз кардан мумкин нест.

Усул ва Натиҷаҳои Таҳқиқот

1. Омода кардани суспензияи бактериявии CD12-1

CD12-1 фаъол ва субкултура карда шуд. Бактерияҳо бо центрифуга дар 4500 rpm барои 10 дақиқа ҷамъоварӣ ва бо маҳлули намакии буферии фосфатии стерилӣ (PBS) се маротиба шуста шуданд. Суспензияҳо ба сатҳҳои 1 × 10⁸, 1 × 10⁹ ва 1 × 10¹⁰ CFU/mL танзим шуданд. Дар давоми таҷриба суспензияи тоза ҳар рӯз омода ва бо шприцҳои стерилии яккарата фавран тавассути гаважи даҳонӣ дода шуд.

2. Намунаи ҳайвонот ва когорти таҳлили биологӣ

Шаст муши модинаи C57BL/6-и SPF, 6-ҳафтаина истифода шуданд. Ҳар гурӯҳ дар оғоз n = 12 ҳайвон дошт. Манбаъ мегӯяд, ки аз ҳар гурӯҳ шаш ҳайвон аз рӯйи идентификаторҳои инфиродӣ ва бе назардошти вазни бадан, DAI ё натиҷаи дигари таҷриба ба таври тасодуфӣ ба когорти таҳлили биологӣ интихоб шуданд. Ҳамон шаш ҳайвон дар ҳамаи таҳлилҳои фенотипӣ, гистологӣ, биохимиявӣ, SCFA ва микробиота истифода шуданд.

Холигии гузоришдиҳӣ: Мақола истифодаи таҳлилии минбаъдаи шаш муши дигари дар аввал дар ҳар гурӯҳ мавҷудбударо муфассал шарҳ намедиҳад. Расмҳои натиҷа ва таҳлилҳои оморӣ дар асоси шаш муши биологии мустақил дар ҳар гурӯҳ гузориш шудаанд.

3. Ҷамъоварии намунаҳо дар анҷоми таҷриба

Дар анҷоми дахолати сеҳафтаинаи таҷрибавӣ мушҳо 12 соат гурусна нигоҳ дошта шуда, бо дислокатсияи гардан эвтаназия шуданд. Тамоми рӯдаи ғафс хориҷ, бе кашидан дарозии он чен ва бо PBS-и стерилӣ шуста шуд. Як қисми рӯдаи ғафс барои таҳлили гистологӣ дар %4 параформальдегид мустаҳкам карда шуд; бофтаҳои боқимондаи рӯдаи ғафс ва мундариҷаи кӯррӯда бо нитрогени моеъ зуд ях карда, то таҳлилҳои баъдӣ дар −80 °C нигоҳ дошта шуданд.

4. Гистологияи H&E ва PAS

Барои таҳлили H&E сегменти қисми дисталии рӯдаи ғафс, тақрибан 1 cm дуртар аз мақъад, истифода шуд. Бофта дар %4 параформальдегид мустаҳкам, ба парафин ҷойгир ва бо H&E ранг карда шуд. Осеби гистопатологӣ бар асоси меъёрҳои Cooper ва ҳамкорон баҳогузорӣ шуд.

Барои таҳлили PAS бофтаҳои рӯдаи ғафс шабона дар %4 параформальдегид мустаҳкам, ба парафин ҷойгир ва бо ғафсии 5 µm бурида шуданд. Пас аз рангкунии PAS бо микроскопи рӯшноӣ тасвир гирифта, ҳуҷайраҳои бокалшакл арзёбӣ шуданд.

5. Таҳлили иммуногистохимиявии монеа

Буришҳои парафинӣ ду маротиба барои 15 дақиқа дар ксилол депарафинизатсия ва дар силсилаи этаноли дараҷабандишуда регидрататсия шуданд. Барқарорсозии антиген дар буфери цитратии pH 6,0 бо микромавҷ: 8 дақиқа гармкунӣ, 8 дақиқа танаффус ва боз 7 дақиқа гармкунӣ анҷом дода шуд. Буришҳо то ҳарорати хона хунук шуда, бо PBS-и pH 7,4 се маротиба, ҳар дафъа панҷ дақиқа шуста шуданд.

Фаъолияти пероксидазаи эндогенӣ бо %3 H₂O₂ дар торикӣ барои 25 дақиқа баста шуд; пайвастшавии ғайримахсус бо %3 альбумини зардоби гов (BSA) барои 30 дақиқа маҳдуд карда шуд. Инкубатсияи антителаи ибтидоӣ дар муҳити намнок дар 4 °C шабона идома ёфт. Антителаи дуюмдараҷа дар ҳарорати хона дар торикӣ барои 50 дақиқа дода шуд, иммунореактивият бо 3,3′-диаминобензидин (DAB) барои 5 дақиқа намоён ва рангкунии муқобил бо гематоксилин анҷом дода шуд.

Тасвирҳо бо CaseViewer 2.4 сабт шуданд; зичии миёнаи оптикии минтақаҳои мусбатрангшуда бо ImageJ 1.54p ҳисоб карда шуд.

6. Чен кардани ситокинҳо

Консентратсияи IL-1β, IL-6, IL-10 ва TNF-α дар бофтаҳои рӯдаи ғафс бо маҷмӯаҳои ELISA-и пешниҳодкардаи Elabscience Biotechnology ва мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда чен карда шуд. Қисми усули манбаъ рақамҳои каталоги ин маҷмӯаҳо ё каҷҳои муфассали калибрченкуниро гузориш намекунад.

7. Таҳлили микробиота бо 16S rRNA

Мундариҷаи кӯррӯдаи ҳамон шаш муш истифода шуд. ДНК-и микробӣ бо MagBeads FastDNA Kit for Soil ҷудо карда шуд; тамомияти ДНК бо электрофорези гели агарозаи %0,8, консентратсия ва тозагӣ бо спектрофотометри NanoDrop арзёбӣ шуданд.

Минтақаи V3–V4-и гени бактериявии 16S rRNA бо праймерҳои зерин зиёд карда шуд:

• 338F: 5′-barcode-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′
• 806R: 5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′

Маҳсулоти PCR мувофиқи консентратсияҳо ба миқдори эквимолярӣ якҷоя ва дар платформаи Illumina NovaSeq 6000 секвениронӣ шуданд. Пайдарпаии хом бо плагини QIIME 2 demux ба намунаҳо ҷудо шуда, праймерҳо бо cutadapt бардошта шуданд. Филтркунии сифат, denoising, якҷоя кардани пайдарпаии paired-end ва хориҷ кардани химераҳо бо DADA2 анҷом дода шуда, аз пайдарпаии denoise-шуда сохтори amplicon sequence variant (ASV) ва ҷадвали хусусият-фаровонӣ сохта шуд.

Таҳлилҳои минбаъдаи микробиом бо версияи QIIME 2 2024.5 анҷом дода шуданд. Манбаъ мегӯяд, ки “dataset-specific parameter settings” истифода шудааст, аммо ҳамаи параметрҳои QIIME 2/DADA2-ро алоҳида нашр намекунад; аз ин рӯ, параметрҳои намерасида аз ҷониби Verianla пур карда нашудаанд.

8. Ченкунии SCFA ва омодагӣ барои LC–MS/MS

Дар ҳар таҳлил 20 mg мундариҷаи рӯда бо ду дона тӯби пӯлоди зангногир ва 800 µL маҳлули экстраксионӣ, ки стандарти дохилӣ дошт, коркард шуд. Намуна 60 сония vortex шуда, дар 55 Hz ду маротиба 60 сония гомогенизатсия ва дар 4000 × g, 10 °C барои 10 дақиқа центрифуга шуд.

Ба 40 µL супернатант 20 µL 200 mM 3-нитрофенилгидразин (3-NPH) ва 20 µL 120 mM 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид гидрохлорид (EDC·HCl), ки %6 пиридин дошт, илова шуд. Дериватизатсия дар 40 °C, 1200 rpm барои 30 дақиқа анҷом дода шуд.

Омехта дар рӯйи ях 3 дақиқа хунук ва дар 12.000 × g, 4 °C барои 10 дақиқа центрифуга шуд. Сипас 50 µL супернатант бо 150 µL оби дорои %0,1 (v/v) кислотаи формикӣ рақиқ, 60 сония vortex ва дар ҳамон шароит боз центрифуга шуд. Супернатанти ниҳоӣ аз филтри мембранавии 0,22 µm гузаронда, ба vial-и автосамплер интиқол ва бо системаи SCIEX LC–MS/MS таҳлил шуд.

Ҳадафи аналитикии марҳилаи дериватизатсияи 3-NPH/EDC·HCl ташкили ҳосилаҳои химиявӣ мебошад, ки ҷудо ва ошкор кардани кислотаҳои карбоксилии хурдро бо LC–MS/MS муносибтар мекунанд. Ин тавзеҳ вазифаи аналитикии усулро шарҳ медиҳад; натиҷаи нави таҳқиқот нест.

9. Таҳлили оморӣ

Маълумот бо Microsoft Excel 2021 тартиб дода ва бо IBM SPSS Statistics 27.0 таҳлил шуд. Таҳлилҳои оморӣ ба шаш муши биологии мустақил дар ҳар гурӯҳ асос ёфта, натиҷаҳо ҳамчун миёна ± хатои стандартии миёна (SEM) пешниҳод шуданд.

• Тақсимоти нормалӣ: санҷиши Shapiro–Wilk.
• Якхелагии дисперсия: санҷиши Levene.
• Нормалӣ + дисперсияи якхела: ANOVA-и яксамта + санҷиши муқоисаи сершумори Duncan.
• Агар якхелагии дисперсия таъмин нашавад: Welch ANOVA + санҷиши Games–Howell.
• Маълумоти ғайринормалӣ: Kruskal–Wallis + санҷиши сершумори Dunn.
• Қаторҳои вақти вазни бадан ва DAI: ANOVA-и дуҷонибаи ченкуниҳои такрорӣ + муқоисаи сершумори Sidak.
• Ҳадди аҳамияти оморӣ: p < 0,05.

SEM бо инҳирофи стандартӣ, ки ченаки мустақими паҳншавии биологӣ байни намунаҳо мебошад, як чиз нест; дар ин таҳқиқот SEM ҳамчун нишондиҳандаи хато, ки номуайяниро дар арзёбии миёнаи гурӯҳ ифода мекунад, пешниҳод шудааст.

10. Натиҷаҳои вазни бадан ва DAI

Вазни гурӯҳи назорати муқаррарӣ дар давраи DSS тадриҷан зиёд шуд. Дар гурӯҳи модели DSS талафоти вазн аз рӯзи сеюм равшан шуда, коҳиши калонтарин дар рӯзи ҳафтум мушоҳида шуд. Ҳар се гурӯҳи CD12-1 бар зидди талафоти вазни аз DSS ба вуҷудомада бо дараҷаҳои гуногун муҳофизат нишон доданд; муҳокимаи манбаъ мегӯяд, ки гурӯҳи вояи баланд талафоти вазнро самараноктар маҳдуд кардааст.

Дар гурӯҳи модели DSS, DAI бо гузашти рӯзҳо боло рафт ва дар рӯзи ҳафтум аз назорати муқаррарӣ ба таври маънонок баланд буд. Дар ҳамон рӯз арзишҳои DAI-и гурӯҳҳои L, M ва H нисбат ба гурӯҳи D ба таври маънонок паст (p < 0,05), аммо аз назорати муқаррарӣ баланд боқӣ монданд. Ин натиҷа нишон медиҳад, ки дахолат фаъолияти бемориро сабуктар кард, вале таъсири DSS-ро пурра бартараф накард.

11. Натиҷаҳои гистология ва ҳуҷайраҳои бокалшакл

Азбаски худи тасвирҳои H&E ва PAS далели ибтидоии гистологӣ мебошанд, дар Verianla микроскопияи сохта тавлид нашудааст. Натиҷаи илмии тасвирҳои манбаъ тавассути матн ва муқоисаҳо интиқол дода шуд: DSS тамомияти эпителий, криптаҳо ва ҳуҷайраҳои бокалшаклро вайрон кард; вояи пасти CD12-1 дар ин нишондиҳандаҳо профили муҳофизатии фарогиртаринро нишон дод.

12. Хондани дурусти натиҷаҳои микробиота

Натиҷаҳои микробиота аз қабатҳои гуногуни таҳлил иборатанд. Графикҳои асосии фаровонии нисбӣ, таҳлили гуногунрангии алфа/бета ва таҳлилҳои иловагии фаровонии дифференсиалӣ як саволро намесанҷанд. Аз ин рӯ, масалан, дар муқоисаи асосии фаровонии нисбӣ барои Lactobacillus байни гурӯҳҳои дахолат ва D фарқи маънонок набудан ва дар таҳлили иловагии дифференсиалӣ дар гурӯҳи L бойшавии Lactobacillus гузориш шудан набояд ҳамчун як натиҷаи ягонаи оморӣ муттаҳид карда шавад.

13. Ҳадди механизми микробиота–SCFA

Дар гурӯҳҳои гирифтани CD12-1 фаровонии баъзе таксонҳои микробӣ ва сатҳи баъзе SCFA параллел тағйир ёфт. Манбаъ махсусан муҳокима мекунад, ки дар байни аъзои Ruminococcaceae истеҳсолкунандагони маълуми бутират мавҷуданд. Бо вуҷуди ин, азбаски дар ин таҳқиқот фаъолияти метаболикии микробӣ мустақиман чен нашуд, хулосаи сабабии «Ruminococcaceae зиёд шуд ва аз ин сабаб бутират зиёд шуд» баровардан мумкин нест.

14. Ҳадди муносибати воя-ҷавоб

Он ки вояи баланд дар ҳар нуқтаи ниҳоӣ аз вояи паст самараноктар набуд, яке аз натиҷаҳои асосии таҳқиқот мебошад. Азбаски фаровонии воқеӣ, пойдорӣ ва фаъолияти метаболикии CD12-1 дар рӯда бо усулҳои хоси штамм пайгирӣ нашуд, сабаби биологии ин ҷавоби ғайрихаттӣ муайян нашудааст. Муаллифон зарурати доираи васеътари воя, пайгирии хоси штамм ва таҳлилҳои функсионалиро таъкид мекунанд.

15. Маҳдудиятҳои асосӣ

• Танҳо мушҳои модинаи C57BL/6 истифода шуданд.
• Модел колити шадиди DSS аст; он табиати музмин ва такроршавандаи колити захмдори инсонро пурра ифода намекунад.
• CD12-1 пеш аз DSS оғоз шуд; натиҷаҳо таъсири пешгирикунандаро дастгирӣ мекунанд, на табобати бемории аллакай ташаккулёфтаро.
• Дар таҳлили микробиота доштани n = 6 такрори биологӣ дар ҳар гурӯҳ метавонад қудрати омориро барои ошкор кардани фарқиятҳои хурдтари таксонҳо маҳдуд кунад.
• Таҳлили 16S rRNA фаъолияти метаболикии микробҳоро мустақиман чен намекунад.
• Колонизатсия, пойдорӣ ё фаъолияти метаболикии CD12-1 дар рӯда мустақиман пайгирӣ нашудааст.
• Усули коррелятсия дар қисми усули манбаъ бо номи равшани Pearson/Spearman нишон дода нашудааст.
• Барои муттаҳид кардани ҷузъҳои DAI ба як баҳо муодилаи возеҳи математикӣ дода нашудааст.
• Ҳамаи бандҳои шкалаи баҳогузории гистопатологӣ дар мақола гузориш нашуда, ба истиноди беруна пайваст шудаанд.
• Ҳамаи параметрҳои хоси маҷмӯи маълумот барои QIIME 2 алоҳида гузориш нашудаанд.
• Бехатарӣ, вояи оптималӣ, самаранокии клиникӣ ва истифодаи дарозмуддат дар одамон арзёбӣ нашудаанд.

Ёддошт оид ба Манбаъ ва Усул

Таҳқиқоти аслӣ: Preventive Effects of Fermented Yak Milk-Derived Lacticaseibacillus paracasei CD12-1 Against DSS-Induced Colitis in Mice

Муаллифон: Hongqiang Li; Teng Zhen; Junyang Li; Furong Han; Xian Guo; Defu Tang; Cheng Peng.

Тартиби муаллифон: Тартиби PDF-и манбаъ бетағйир нигоҳ дошта шудааст.

Саҳми баробар: Дар мақолаи манбаъ изҳорот дар бораи ҳаммуаллифи аввал/саҳми баробар дида намешавад.

Муаллифони масъул: Defu Tang ва Cheng Peng.

Аффилиатсия 1: College of Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China.

Аффилиатсия 2: Gansu Animal Husbandry Technology Extension Station, Lanzhou 730030, China.

Аффилиатсия 3: Key Laboratory of Animal Genetics and Breeding on Tibetan Plateau, Ministry of Agriculture and Rural Affairs; Key Laboratory of Yak Breeding Engineering of Gansu Province; Lanzhou Institute of Husbandry and Pharmaceutical Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730050, China.

Маҷалла: Foods.

Ношир: MDPI, Basel, Switzerland.

Ҷилд / шумора / рақами мақола: 15 / 17 / 3120.

DOI: 10.3390/foods15173120.

Пайванди расмӣ: https://doi.org/10.3390/foods15173120

Ирсол: 5 Август 2026.

Таҷдид: 25 Август 2026.

Қабул: 31 Август 2026.

Нашр: 2 Сентябр 2026.

Навъи манбаъ: Мақолаи таҳқиқоти таҷрибавии ҳайвонот.

Ҳолати тақриз: version of record, ки дар маҷаллаи илмии тақризшаванда нашр шудааст.

Ҳолати preprint: Файли боршуда preprint нест, балки версияи нашршудаи маҷалла аст. Мақолаи манбаъ рақами алоҳидаи preprint гузориш намекунад.

Иҷозатнома: Creative Commons Attribution 4.0 International (CC BY 4.0).

Модели асосии таҳқиқот: Модели колити шадид бо %2,5 DSS; танҳо мушҳои модинаи C57BL/6.

Кумитаи этика: Gansu Agricultural University, Ethics Committee of Laboratory Animal Management and Animal Welfare; No. GSAU-Eth-VMC-2022-016; санаи тасдиқ 10 Март 2022.

Ризоияти огоҳона: Татбиқ намешавад; таҳқиқот таҷрибаи ҳайвонот аст.

Дастрасии маълумот: Гузориш шудааст, ки саҳмҳои аслии таҳқиқот дар мақола ва Supplementary Materials мавҷуданд ва дархостҳои маълумоти иловагӣ метавонанд ба муаллифони масъул равона шаванд.

Маводҳои иловагӣ: Figure S1 муқоисаҳои фаровонии нисбии филумҳо ва авлодҳои гуногунро; Figure S2 бошад натиҷаҳои фаровонии дифференсиалиро дар сатҳи авлод барои муқоисаҳои C–D, D–L, D–M ва D–H дар бар мегирад.

Маблағгузорӣ: Science and Technology Project of the Department of Agriculture and Rural Affairs of Gansu Province (GNKJ-2026-24); Fostering Foundation for the Excellent Ph.D. Dissertation of Gansu Agricultural University (YB2025002); Gansu Province University Graduate “Innovation Star” Project (2026CXZX-779); Science and Technology Project of Gansu Province (26ZDNA010).

Тазоди манфиатҳо: Муаллифон изҳор кардаанд, ки тазоди манфиатҳо вуҷуд надорад.

Саҳми муаллифон: Консептуализатсия H.L., T.Z. ва F.H.; методология H.L., T.Z., X.G. ва J.L.; нармафзор T.Z. ва X.G.; таҳлили формалӣ H.L. ва T.Z.; идоракунии маълумот H.L., T.Z. ва J.L.; навиштани тарҳи аввал H.L., C.P. ва D.T.; бозбинӣ ва таҳрир аз ҷониби H.L. ва D.T. анҷом дода шудааст.

Ёддошти тафсирии дохили манбаъ: Дар қисми натиҷаҳо гуфта мешавад, ки IL-10 дар гурӯҳҳои L ва M аз ҷиҳати ададӣ зиёд шудааст, аммо аз гурӯҳи D ё C ба таври маънонок фарқ намекунад (p > 0,05). Ифодаи умумитари «афзоиши IL-10» дар муҳокима ин ҳадди омориро аз байн намебарад; дар матни Verianla натиҷаи ғайримаънонок ҳамчун маънонок пешниҳод нашудааст.

Ёддошти коррелятсия: Манбаъ робитаҳои маъноноки микробиота–фенотипро гузориш мекунад, аммо дар қисми усул равшан намегӯяд, ки коэффисиенти коррелятсия Pearson, Spearman ё усули дигар аст. Ин маълумот аз берун аз манбаъ пур карда нашудааст.

Ёддошти формулаи DAI: Равшан нишон дода шудааст, ки DAI ба талафоти вазни бадан, консистенсияи наҷосат ва баҳои хун дар наҷосат асос меёбад; аммо формулаи возеҳи математикӣ барои муттаҳид кардани онҳо ба як арзиши DAI дар мақола навишта нашудааст. Verianla формулаи берун аз манбаъ илова накардааст.

Усули визуалӣ: Азбаски тасвирҳои H&E, PAS ва иммуногистохимия далели ибтидоии таҷрибавии растрӣ мебошанд, онҳо тақлид нашудаанд. Хатти вақти таҷриба аз муносибатҳои усули манбаъ аз сифр ҳамчун SVG сохта шуд; натиҷаҳои коррелятсия ва SCFA бошад, дар асоси робитаҳои маъноноке, ки дар манбаъ равшан баён шудаанд, бо ҷадвалҳои мустақили HTML пешниҳод шуданд. Вақте ки аз графикҳо маълумоти хом мавҷуд набуд, арзишҳои дақиқи ададӣ ҳосил карда нашуданд.

Ҳадди асосии тафсир: Ин таҳқиқот озмоиши клиникии табобатӣ дар одамон нест ва нишон намедиҳад, ки CD12-1 колити захмдори аллакай ташаккулёфтаро табобат мекунад. Натиҷаҳо дар модели шадиди DSS, танҳо дар мушҳои модина ва дар тарҳи дахолати муҳофизатӣ ба даст омадаанд. Барои истифодаи клиникӣ моделҳои иловагии ҳайвонот бо ҳар ду ҷинс, намунаҳои калонтар ва сипас таҳқиқоти клиникии инсон заруранд.