Shankhapushpi экстракты менен синтезделген цинк оксиди нано гүлдөрү (ZnO-NFs-Skp), Convolvulus pluricaulis деп аныкталган Shankhapushpi өсүмдүгүнүн суулуу экстракты колдонулуп, чөктүрүү ыкмасы менен синтезделген цинк оксиди нанотүзүлүштөрү. Бул изилдөөдө ZnO-NFs-Skpнин физика-химиялык касиеттери мүнөздөлүп, PC12 клеткаларында жана зебра балыгынын эмбриондорунда биошайкештиги бааланып, алдын ала түзүлгөн insulin amyloid (IA) фибриллаларына бузуу таасири Thioflavin T (ThT) флуоресценция өлчөөсү жана сканерлөөчү электрондук микроскопия аркылуу изилденген.

Алынган нано гүлдөрдүн динамикалык жарык чачыроосу менен өлчөнгөн гидродинамикалык диаметри 181 ± 22 nm, полидисперстүүлүк индекси 0,2288 ± 0,11 жана зета-потенциалы −17,7 ± 1,3 mV деп билдирилген. SEM сүрөттөрүндө түзүлүштөр гвоздика гүлүнө окшош экени жана жалбырак сымал нано гүл бөлүктөрүнүн орточо калыңдыгы 30 ± 5 nm экени көрсөтүлгөн. Рентген нурларынын дифракциялык анализи түзүлүш вюрциттик гексагоналдык ZnO менен шайкеш экенин; булактын чийки XRD маалыматтары болсо %68,7 кристаллдык жана %31,3 аморфтук түзүлүштү көрсөткөнүн билдирет.

PC12 клеткаларында ZnO-NFs-Skp колдонулгандан 24 саат өткөндөн кийин ар кандай дозаларда болжол менен %80–100 клетка жашоого жөндөмдүүлүгү билдирилген. Сыналган эң жогорку 160 µg/mL дозада жашоого жөндөмдүүлүк %80 ± 3,1, иштетилбеген контролдо болсо %100 ± 2,2 деп берилген жана бул айырма булакта маанилүү деп аныкталган. Ошого карабастан, изилдөөчүлөр кийинки эксперименттерде ZnO-NFs-Skp дозасын 80 µg/mL менен чектешкен. Зебра балыгынын эмбриондорундагы кеңири натыйжалар 20, 40 жана 80 µg/mL топторун көрсөтүп, 80 µg/mLге чейин айкын өнүгүү кемтиги билдирилген эмес.

Амилоид экспериментинде адам бейтаптарынан түз алынган Альцгеймер бляшкасы эмес, лабораторияда Huminsulin колдонулуп түзүлгөн insulin amyloid модели бар. Иштетилбеген IAнын ThT флуоресценция интенсивдүүлүгү 4 саатта 394, 8 саатта 507, 12 саатта 653 жана 24 саатта 810 деп билдирилген. 24 сааттын аягында 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp менен инкубацияланган IA үчүн флуоресценция интенсивдүүлүгү 504 деңгээлине чейин төмөндөп, изилдөөчүлөр муну болжол менен %38 азайуу деп билдиришкен.

12 сааттык салыштырууда 80 µg/mL химиялык жол менен синтезделген ZnO нанобөлүкчөлөрү үчүн IA флуоресценциясынын азайышы %18, ошол эле концентрациядагы Shankhapushpi аркылуу алынган ZnO нано гүлдөрү үчүн болсо %35 деп билдирилген. Бул натыйжа изилдөөнүн эксперимент шарттарында нано гүл түзүлүшү стандарттык ZnO нанобөлүкчөлөрүнө караганда ThT флуоресценциясынын көбүрөөк азайышы менен байланыштуу экенин көрсөтөт. Бирок бул табылга клиникалык дарылоонун ийгилиги эмес; адамдагы Альцгеймер амилоиддери түз тазаланганын же нейродегенеративдик оорулар дарыланганын көрсөтпөйт.

Амилоид деген эмне жана изилдөөдө эмне үчүн insulin amyloid колдонулган?

Амилоид — айрым белоктор кадимки эригич абалынан чыгып, туура эмес бүктөлүп, β-катмарга бай, начар эриген фибриллаларды же агрегаттарды түзгөндө пайда болгон белок түзүлүштөрү үчүн колдонулган жалпы термин. Булак изилдөө Альцгеймер оорусундагы Aβ1-42, Паркинсон оорусундагы α-синуклеин, Creutzfeldt–Jakob оорусундагы прион белоктору жана 2-тип диабет менен байланышкан insulin amyloidдерди ар башка амилоид мисалдары катары карайт.

Изилдөөчүлөр бул иште түздөн-түз Aβ1-42 колдонушкан эмес. Анын ордуна insulin amyloid (IA) эксперименттик модель катары тандалган. Булак insulin amyloidдер башка амилоид түзүлүштөрү менен жогорку β-катмар мазмунун, эрибестикти жана агрегация касиеттерин бөлүшкөндүктөн амилоидоз изилдөөлөрүндө модель амилоидогендик белок катары колдонулушу мүмкүн экенин белгилейт.

Бул айырма натыйжаларды чечмелөө үчүн абдан маанилүү. Материалдын лабораторияда даярдалган insulin amyloidдерди бузушу ошол эле материал Альцгеймер бейтаптарындагы Aβ1-42 бляшкаларын, Паркинсон оорусундагы α-синуклеин агрегаттарын же прион белокторун дал ушундай бузат дегенди билдирбейт. Изилдөөчүлөр да Aβ1-42 жана прион белокторуна таасир келечекте өзүнчө изилдениши керектигин ачык белгилешет.

Shankhapushpi деген эмне?

Изилдөөдө Shankhapushpi деп колдонулган өсүмдүк Convolvulus pluricaulis болуп саналат. Изилдөөчүлөр өсүмдүктүн суулуу экстрактын биологиялык тесттик зат катары гана эмес, ZnO нанотүзүлүштөрүн синтездөөдө өсүмдүк аркылуу жүргүзүлгөн же “жашыл синтез” ыкмасынын компоненти катары да колдонушкан.

Фитохимиялык скринингде Shankhapushpi суулуу экстрактында алкалоиддер, кумариндер жана гликозиддер табылганы билдирилген. GC-MS анализинде булак Dodecanoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester кошулмасын %93,52 жана Octadecanoic acid, 2,3-bis[(1-oxotetradecyl)oxy]propyl ester кошулмасын %6,48 өлчөмүндө билдирет. Бул маанилер булак изилдөөнүн GC-MS натыйжалары; байкалган амилоид таасиринин себеби ушул кошулмалардын өздөрү экени бул эксперимент менен далилденген эмес.

Өсүмдүк экстракты кантип даярдалган?

1. 0,3 г кургатылган Shankhapushpi гүлү 100 mL дистилденген сууга кошулган.
2. Аралашма 70 °Cде магниттик аралаштыргыч менен 2 саат аралаштырылган.
3. Андан кийин жалпысынан 1 саат ультраүндүк ваннада кармалган; булак муну 15 мүнөттүк төрт колдонуу катары көрсөтөт.
4. Экстракт Whatman фильтринен өткөрүлгөн.
5. Кийинки колдонууга чейин 4 °Cде сакталган.
6. Булакта экстракттын чыгымы %25 деп билдирилген.

ZnO нано гүлдөрү кантип синтезделген?

ZnO-NFs-Skp даярдоодо чөктүрүү ыкмасы колдонулган. Цинк ацетаты дигидраты прекурсору үчүн булак 0,4 M концентрациясын берет. Бул прекурсор 100 mL Shankhapushpi экстрактында 3 M NaOH менен бириктирилип, бөлмө температурасында интенсивдүү түрдө 2 саат аралаштырылган.

Андан кийин pH 1 M NaOH колдонуу менен 12,5ге жөнгө салынып, аралашма 100 °Cде дагы 2 саат аралаштырылган. Стакан алюминий фольга менен жабылып, эритме бөлмө температурасында түн бою чөгүүгө калтырылган.

Пайда болгон чөкмө реакцияга кирбеген компоненттерди кетирүү үчүн үч жолу дистилденген суу менен жуулган. Центрифугалоо шарты 5000 rpm, 10 мүнөт деп берилген. Чөкмө кургатылып, 300 °Cде кальцинацияланып, андан соң үкөктө майдаланып ZnO-NFs-Skp порошогу алынган.

Салыштыруу үчүн стандарттык ZnO нанобөлүкчөлөрү кантип даярдалган?

Изилдөөчүлөр нано гүлдөрдүн амилоидди бузуу жөндөмүн өзүнчө гана баалабастан, химиялык жол менен синтезделген ZnO нанобөлүкчөлөрү менен да салыштырышкан. Бул үчүн 50 mL этанолдо 20 mM цинк ацетаты дигидратынын эритмеси даярдалып, 15 мүнөт аралаштырылып, андан кийин 0,5 г NaOH акырындык менен кошулган.

Аралашма 2 саат аралаштырылып, бөлмө температурасында түн бою кармалган. Пайда болгон ак ZnO чөкмөсү 5000 rpmде 10 мүнөт центрифугаланып жыйналып, эки жолу дистилденген суу менен жуулуп, 300 °Cде 1 саат кальцинацияланып, майдаланган.

Бир “нано гүлдүн” өлчөмү эмне үчүн бир эле сан эмес?

Изилдөөдө эки башка өлчөм түшүнүгү бар жана аларды бири-бири менен чаташтырбоо керек. DLS менен өлчөнгөн 181 ± 22 nm маани гидродинамикалык диаметр. Бул маани суюктуктагы бөлүкчөнүн же агрегаттын кыймылына байланышкан эффективдүү өлчөмдү билдирет. Ал эми SEMде билдирилген 30 ± 5 nm маани бүт нано гүлдүн диаметри эмес, гүл сымал түзүлүштү түзгөн жалбырак сымал бөлүктөрдүн калыңдыгы.

Зета-потенциал эмнени көрсөтөт?

Зета-потенциал суюктуктагы бөлүкчөлөрдүн электрокинетикалык беттик жүрүм-туруму менен байланышкан өлчөө болуп, нанобөлүкчө дисперсияларынын бири-бирин түртүшүн же топтолууга жакындыгын баалоодо колдонулат. Изилдөөдө ZnO-NFs-Skp үчүн −17,7 ± 1,3 mV табылган.

Терс белги өлчөө шарттарында бөлүкчөлөрдүн электрокинетикалык беттик потенциалы терс багытта экенин көрсөтөт. Булак авторлору бул чоңдукту мурунку адабиятка таянып орточо деңгээлдеги туруктуулук деп чечмелешет. Бул маани “бөлүкчөлөр эч качан топтолбойт” дегенди билдирбейт; авторлор нано гүл түзүлүшү топтор түрүндө кала алышын да талкуулашат.

XRD анализи түзүлүштүн эмне экенин кантип колдойт?

Рентген нурларынын дифракциясы (XRD) кристалл түзүлүштөрдөгү атомдук тегиздиктердин тартибине жараша дифракциялык үлгүлөрдү өлчөйт. ZnO-NFs-Skp үчүн булакта берилген 2θ чокулары төмөнкүдөй:

Авторлор бул чокулар JCPDS 36-1451 стандарттык маалыматына окшош экенин жана натыйжалар вюрциттик гексагоналдык ZnO түзүлүшүн колдой турганын билдиришет. Курч чокулар кристаллдык түзүлүштүн белгиси катары чечмеленген жана булакта чийки маалыматтан %68,7 кристаллдык, %31,3 аморфтук түзүлүш үлүшү берилген.

FTIR эмне үчүн колдонулган?

Фурье өзгөртүүсү менен инфракызыл спектроскопия (FTIR) молекулалык байланыштардын белгилүү инфракызыл жыштык аймактарындагы термелүүлөрүн пайдаланат. Ошондуктан ал молекуланын толук түзүлүшүн жалгыз аныктоого караганда белгилүү функциялык топтор же байланыш термелүүлөрү жөнүндө маалымат берет.

EDAX эмнени көрсөттү?

Энергия-дисперсиялык рентген спектроскопиясы (EDAX/EDX) электрондук микроскопто козголгон үлгүдөн чыккан мүнөздүү рентген нурларын колдонуп элементтик курамды изилдейт. Булактагы 2-сүрөттө ZnO-NFs-Skp үлгүсүндө негизинен Zn жана O элементтери, ошондой эле азыраак деңгээлде көмүртек жана натрий издери көрсөтүлгөн. Авторлор көмүртек жана натрий издери Shankhapushpi экстракты менен байланыштуу болушу мүмкүн экенин белгилешет; бул түшүндүрмө ыктымалдык деңгээлинде.

Thioflavin T Тести Амилоид Бузулушун Кантип Көрсөтөт?

Thioflavin T (ThT), β-катмарга бай амилоид фибриллаларына байланышканда флуоресценциясы кыйла күчөгөн боёк. Ошондуктан бирдей эксперимент шартында жогорку ThT флуоресценциясы көбүрөөк ThT байланыша алган амилоид түзүлүшү менен, ал эми флуоресценциянын азайышы бул түзүлүштөрдүн азайышы же өзгөрүшү менен байланыштуу болушу мүмкүн. Бирок ThT сигналы жалгыз өзү бардык молекулалык бузулуу механизмин далилдебейт; ошондуктан изилдөөдө SEM сүрөттөрү да кошумча далил катары колдонулган.

Insulin amyloid кантип түзүлгөн?

Huminsulin 65 °Cде 24 саат инкубацияланып insulin amyloid даярдалган. Андан кийин алдын ала түзүлгөн IA ZnO-NFs-Skp менен 37 °Cде ар кандай убакыттарда инкубацияланган.

Булактын метод бөлүмүндө ZnO-NFs-Skp концентрациялары 40, 60 жана 80 µg/mL деп берилген. Ал эми натыйжа бөлүмүндө жана тиешелүү график түшүндүрмөлөрүндө катар 20, 40 жана 80 µg/mL деп берилет. Булактын ичинде бул эки катар дал келбегендиктен, бул жерде алардын бири экинчисинин ордуна “оңдолгон” эмес.

Флуоресценция кантип өлчөнгөн?

1. IA менен ZnO-NFs-Skp 37 °Cде инкубацияланган.
2. Үлгүлөр 4, 8, 12 жана 24 саат чекиттеринде алынган.
3. 10 µL IA үлгүсү 190 µL 20 µM ThT эритмеси менен аралаштырылган.
4. ThT эритмесинин pH мааниси 7,2 деп берилген.
5. Бул аралашмадан 100 µL 3 mL дистилденген сууга кошулган.
6. Козгоо толкун узундугу 412 nm болуп колдонулган.
7. Флуоресценция эмиссиясы 420–560 nm диапазонунда өлчөнгөн.

ThT натыйжаларын сандык окуу

%38 азайууну кантип түшүнүү керек?

Булакта иштетилбеген IA үчүн 24 саатта флуоресценция интенсивдүүлүгү 810, ал эми 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp менен иштетилген IA үчүн 504 деп билдирилген. Бул эки маанинин айырмасы 306 бирдик. Баштапкы салыштыруу мааниси болгон 810 менен салыштырганда бул айырма болжол менен %37,8 болуп, макала муну тегеректеп %38 азайуу деп билдирет.

Бул эсеп изилдөө берген эки сандын арифметикалык түшүндүрмөсү; жаңы эксперименттик натыйжа эмес:

\[ \text{Göreli floresans azalması} = \frac{I_{\mathrm{kontrol}}-I_{\mathrm{işlem}}}{I_{\mathrm{kontrol}}}\times 100 \]

Бул жерде \(I_{\mathrm{kontrol}}\) ошол эле салыштыруу контекстиндеги иштетилбеген IA флуоресценциясын; \(I_{\mathrm{işlem}}\) болсо ZnO-NFs-Skp менен иштетилген IA флуоресценциясын билдирет. Билдирилген 24 сааттык маанилерге колдонгондо:

\[ \frac{810-504}{810}\times100 \approx 37{,}8\% \]

Бул пайыз ThT флуоресценциясындагы салыштырмалуу азайууну билдирет. Муну “амилоид молекулаларынын так %38 бөлүгү химиялык жактан жок кылынды” деген күчтүүрөөк молекулалык дооматка айландыруу туура эмес. Макала бул флуоресценция өзгөрүшүн амилоид бузулушунун көрсөткүчү катары түшүндүрүп, SEMдеги фибрилла фрагментациясы байкоолору менен колдогон.

ZnO Нано Гүлдөрү Стандарттык ZnO Нанобөлүкчөлөрүнө Караганда Натыйжалуураак беле?

Булак изилдөөнүн өзүнүн 12 сааттык салыштыруусунда ооба. 80 µg/mL концентрацияда химиялык ZnO нанобөлүкчөлөрү үчүн болжол менен %18, ZnO-NFs-Skp үчүн болсо болжол менен %35 IA бузулушу билдирилген. Эки салыштырууда тең концентрация жана инкубация убактысы бирдей сакталгандыгы көрсөтүлгөн.

Авторлор бул айырманы нано гүл морфологиясынын жогорку беттик аянты жана чыгып турган жалбырак сымал беттери менен байланыштырышат. Бирок бул изилдөөдө беттик аянттын өз алдынча сандык өлчөөсү менен амилоид бузулушунун ортосунда себептик анализ берилген эмес. Ошондуктан “нано гүл геометриясы так эки эсе жогорку натыйжалуулуктун себеби” деген билдирүү булак маалыматы уруксат бергенден күчтүүрөөк болот.

SEM сүрөттөрү эмнени кошот?

ThT тести флуоресценцияга негизделген кыйыр өлчөө болгондуктан, изилдөөчүлөр амилоид морфологиясын SEM менен да изилдешкен. Алдын ала түзүлгөн IA үлгүсүндө узунураак фибриллярдык түзүлүштөр көрүнсө, ZnO-NFs-Skp менен 24 саат иштетүүдөн кийин майда бөлүктөр байкалганы билдирилген. Авторлор бул морфологиялык өзгөрүүнү чоң фибриллалардын майда түзүлүштөргө бөлүнүшүн колдогон визуалдык далил катары чечмелешкен.

SEM сүрөтүнүн өзү эксперименттик байкоо болгондуктан, бул жерде жасалма “микроскоп сүрөтү” чыгарылган эмес. Булактын чыныгы микроскоп сүрөтүн тууроонун ордуна, байкоонун илимий мааниси текст менен түшүндүрүлгөн.

PC12 Клеткалары Менен Жүргүзүлгөн Биошайкештик Эксперименти Эмнени Көрсөтөт?

PC12 — чычкандын феохромоцитомасынан алынган жана нейробиология изилдөөлөрүндө колдонулган клетка линиясы. Изилдөөдө PC12 клеткаларынын милдети ZnO-NFs-Skp адам мээсиндеги амилоиддерди тазалайбы же жокпу көрсөтүү эмес, нанотүзүлүштөрдүн клеткаларга мүмкүн болгон уулуу таасирин баалоо.

96 уячалуу пластинанын ар бир уячасына 5 × 10³ экспоненциалдык өсүү фазасындагы PC12 клеткасы кошулган. Клеткалар толук DMEM чөйрөсүндө 24 саат жабышкандан кийин 10, 20, 40, 80 жана 160 µg/mL ZnO-NFs-Skp менен иштетилген. Эксперименттер үч кайталанууда жүргүзүлүп, клеткалар дагы 24 саат инкубацияланган.

MTT эритмеси үчүн 5 mg/mL запастан 10 µL кошулуп, клеткалар караңгыда 4 саат инкубацияланган, түзүлгөн формазан кристаллдары DMSOдо эритилип, абсорбанс 570 nmде өлчөнгөн.

Изилдөөнү кылдат окууда маанилүү жагдай: 160 µg/mL дозасында жашоого жөндөмдүүлүк болжол менен %80 деңгээлине чейин төмөндөйт жана булак бул төмөндөөнү контролдук топко салыштырмалуу статистикалык маанилүү деп сүрөттөйт. Изилдөөчүлөр мурунку адабиятта %80 клетка жашап калуу биошайкештик чеги катары колдонулганына таянып бул дозаны баары бир биошайкеш деп классификациялашкан, бирок кийинки эксперименттерин 80 µg/mL менен чектешкен.

Тирүү-өлүк кош боёо эмне кылды?

Акридин кызгылт сарысы (AO) жана этидий бромид (EtBr) бирге колдонулган. Изилдөөнүн түшүндүрмөсүнө ылайык AO тирүү клеткаларды жашыл, EtBr өлгөн клеткаларды кызыл түскө боёйт. Дарылоодон 24 саат өткөндөн кийин клеткалар 3 µM AO жана 1,9 µM EtBr менен боёлуп, флуоресценциялык микроскопто сүрөткө алынган.

Булак insulin amyloid гана колдонулган клеткаларда негизинен кызыл боёо болгонун, ал эми ZnO-NFs-Skp колдонулган топтордо 80 µg/mLге чейин ачык клетка өлтүрүү белгилери болбогонун билдирет.

Зебра Балыгы Эксперименти Дарылоо Натыйжалуулугунбу же Биошайкештиктиби Сынады?

Биошайкештикти сынады. Зебра балыгынын эмбриондорунда амилоид оорусу түзүлүп, ZnO-NFs-Skp аны дарылайбы же жокпу изилденген эмес. Эмбриондор нанотүзүлүш өнүгүү токсиктүүлүгүн жаратабы же жокпу байкоо үчүн колдонулган.

Изилдөөчүлөр уруктангандан 8 саат кийинки (8 hpf) эмбриондорду сатып алып, дени сак эмбриондорду микроскоп алдында тандап, 24 уячалуу пластиналарда ар бир уячага 10 эмбриондон E3 чөйрөсүнө жайгаштырышкан. Эмбриондор 14 сааттык жарык-караңгылык шартында кармалган; өнүгүү этаптары, өлүм жана жумурткадан чыгуу убактысы жарык микроскоп менен көзөмөлдөнгөн.

Изилденген өнүгүү кемтиктерине перикарддык шишик, ийилген куйрук, ийилген омуртка, сары уут баштыкчасынын шишиги, көз деформациясы жана сүзгүч кемтиктери кирген. Кеңири натыйжаларда 20, 40 жана 80 µg/mL топтору көрсөтүлүп, ачык өнүгүү деформациясы билдирилген эмес.

40 жана 80 µg/mL топторунда жумурткадан чыгуу бир аз кечиккени, бирок айырма иштетилбеген контролго салыштырмалуу статистикалык маанилүү эмес экени билдирилген. Изилдөөчүлөр кеңири натыйжа бөлүмүндө ZnO-NFs-Skp 80 µg/mLге чейин жакшы көтөрүлгөн деген жыйынтыкка келишкен.

Изилдөөнүн Ыкмасы жана Жыйынтыктары

Изилдөө дизайны

Бул эксперименттик наноматериал жана амилоид бузулуу изилдөөсү. Дизайндын негизги этаптары төмөнкүлөр:

1. Shankhapushpi суулуу экстрактын даярдоо жана фитохимиялык/GC-MS анализи.
2. Өсүмдүк экстракты аркылуу ZnO нано гүлдөрүн синтездөө.
3. Салыштыруу үчүн химиялык ZnO нанобөлүкчөлөрүн синтездөө.
4. DLS, зета-потенциал, FTIR, XRD, SEM жана EDAX менен мүнөздөө.
5. PC12 клеткаларында MTT жана AO/EtBr кош боёо менен in vitro биошайкештик.
6. Зебра балыгынын эмбриондорунда өнүгүү биошайкештигин баалоо.
7. Лабораторияда insulin amyloid түзүү.
8. IAны ZnO-NFs-Skp менен ар кандай убакыт жана концентрацияда инкубациялоо.
9. ThT флуоресценциясы менен амилоид сигналындагы өзгөрүүнү өлчөө.
10. SEM менен иштетилбеген жана иштетилген IA морфологиясын салыштыруу.
11. 12 саатта стандарттык ZnO-NP жана ZnO-NFs-Skp амилоид таасирин салыштыруу.

Статистикалык ыкма

Булак эксперименттер үч кайталанууда жасалганын жана маалыматтар орточо ± орточонун стандарттык катасы (SEM) түрүндө берилгенин билдирет. Дарылоо топтору менен иштетилбеген контроль ортосунда статистикалык маанилүүлүк үчүн жупташтырылбаган Student t-тести колдонулган.

Статистикалык ыкма бөлүмүндө p < 0,001 маанилүүлүк чеги жазылган. Ал эми клетка жашоого жөндөмдүүлүгүн көрсөткөн 3-сүрөттүн түшүндүрмөсүндө жылдызча үчүн * p < 0,01 маалыматы берилген. Булак бул эки башка чекти кантип шайкеш келтиргенин түшүндүрбөгөндүктөн, Verianla баяны аларды бир мааниге бириктирбейт.

Негизги мүнөздөө натыйжалары

• Shankhapushpi экстрактында алкалоиддер, кумариндер жана гликозиддер табылган.
• ZnO-NFs-Skp гидродинамикалык диаметри 181 ± 22 nm деп өлчөнгөн.
• PDI 0,2288 ± 0,11 деп билдирилген.
• Зета-потенциал −17,7 ± 1,3 mV болгон.
• SEMде гвоздика гүлүнө окшош нано гүл морфологиясы байкалган.
• Жалбырак сымал түзүлүштөрдүн калыңдыгы 30 ± 5 nm деп өлчөнгөн.
• EDAX негизинен Zn жана O көрсөткөн; C жана Na издери да билдирилген.
• XRD чокулары вюрциттик гексагоналдык ZnO түзүлүшүнө шайкеш деп чечмеленген.
• Химиялык жол менен синтезделген ZnO-NPлер үчүн кошумча материалда болжол менен 40 ± 7 nm бөлүкчө өлчөмү жана негизинен тоголок морфология билдирилген.

Негизги биошайкештик натыйжалары

• PC12 клетка жашоого жөндөмдүүлүгү сыналган дозалар боюнча жалпысынан %80–100 диапазонунда билдирилген.
• 160 µg/mL дозасында жашоого жөндөмдүүлүк %80 ± 3,1 деңгээлине төмөндөгөн; контроль %100 ± 2,2 болгон.
• Изилдөөчүлөр кийинки эксперименттерди эң көп 80 µg/mL менен жүргүзүшкөн.
• AO/EtBr тестинде ZnO-NFs-Skp үчүн 80 µg/mLге чейин айкын клетка өлтүрүү белгиси билдирилген эмес.
• Зебра балыгынын эмбриондорунда кеңири баалоодо 80 µg/mLге чейин айкын морфологиялык өнүгүү кемтиги билдирилген эмес.
• 40 жана 80 µg/mLде жумурткадан чыгуу бир аз кечиккен, бирок булак муну маанилүү деп тапкан эмес.

Негизги амилоид натыйжалары

• Иштетилбеген IA ThT флуоресценциясы 4–24 саат аралыгында 394 маанисинен 810 маанисине чейин өскөн.
• 24 саатта 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp тобунда флуоресценция 504 деп өлчөнгөн.
• Булак бул айырманы болжол менен %38 IA бузулушу деп чечмелеген.
• 12 саат жана 80 µg/mL шартында химиялык ZnO-NP болжол менен %18, ZnO-NFs-Skp болжол менен %35 IA бузулушун көрсөткөн.
• SEM байкоолорунда иштетүүдөн мурун узун амилоид фибриллалары, иштетүүдөн кийин майда бөлүктөр көрүнгөнү билдирилген.

Булак ичиндеги маанилүү шайкешсиздиктер

Изилдөө колдогон жыйынтыктар

• Shankhapushpi аркылуу гүл сымал ZnO нанотүзүлүштөрүн синтездөө мүмкүн болгон.
• Алынган материал DLS, зета-потенциал, FTIR, XRD, SEM жана EDAX ыкмалары менен мүнөздөлгөн.
• PC12 жана зебра балыгынын эмбрион эксперименттеринин колдонулган шарттарында ZnO-NFs-Skp үчүн белгилүү биошайкештик терезеси байкалган.
• Алдын ала даярдалган insulin amyloid модели ZnO-NFs-Skp менен инкубациядан кийин төмөнүрөөк ThT флуоресценциясын көрсөткөн.
• 24 саат жана 80 µg/mL шартында булак болжол менен %38 ThT флуоресценция азайышын амилоид бузулушу деп билдирген.
• Ошол эле 12 саат жана 80 µg/mL салыштыруусунда ZnO-NFs-Skp химиялык ZnO-NPге караганда ThT флуоресценциясынын чоңураак азайышын көрсөткөн.
• SEM сүрөттөрү узун IA фибриллаларынан майда бөлүкчөлүү түзүлүштөргө өтүүнү колдогон морфологиялык байкоо берген.

Изилдөө колдобогон жыйынтыктар

• ZnO-NFs-Skp Альцгеймер оорусун дарылай турганы көрсөтүлгөн эмес.
• Адамдар үчүн коопсуз доза аныкталган эмес.
• Кан-мээ тосмосунан өтүшү көрсөтүлгөн эмес.
• Адам мээсиндеги Aβ1-42 бляшкалары бузулганы көрсөтүлгөн эмес.
• Паркинсон оорусундагы α-синуклеин агрегаттарына түз таасир сыналган эмес.
• Бул изилдөөдө прион белокторуна түз бузуу эксперименти жүргүзүлгөн эмес.
• Зебра балыгы экспериментинде амилоид оорусу дарыланганы көрсөтүлгөн эмес; бул бөлүм биошайкештик үчүн.
• %38 ThT азайышы адам организминдеги амилоид жүгү %38 азаят дегенди билдирбейт.
• Нано гүл морфологиясы байкалган артыкчылыктын жалгыз себептик механизми экени эксперимент түрүндө бөлүнүп көрсөтүлгөн эмес.

Изилдөөнүн негизги чектөөлөрү

Авторлор клиникалык колдонуу үчүн толук амилоид бузулушу керек болорун жана өз эксперименттеринде %100 бузулууга жетишилбегенин ачык чектөө катары айтышат. Алар узагыраак инкубация көбүрөөк бузулуу бериши мүмкүн деп сунушташат; бирок бул сунуш учурдагы эксперимент түз далилдеген натыйжа эмес.

Эң маанилүү биологиялык чектөө амилоид бузулуу тесттеринин insulin amyloid модели менен жүргүзүлгөнү. Альцгеймер оорусу менен байланышкан Aβ1-42 же прион пептиддери бул эксперименттин бута белогу эмес. Изилдөөчүлөр бул амилоид түрлөрүн келечекте өзүнчө текшерүүнү сунушташат.

Мындан тышкары, амилоид бузулушунун чыныгы оору организминдеги натыйжалуулугу бааланган эмес. Авторлор ZnO-NFs-Skpнин амилоид бузуу жөндөмү келечекте жаныбар оору моделинде изилдениши керектигин белгилешет.

Булак жана Ыкма Жөнүндө Эскертүү

Түпнуска изилдөө: Spectrofluorimetric Analysis of Amyloid Degradation Using Shankhapushpi Extract/Zinc Oxide Nanoflower—An In Vitro Study

Авторлор: Tharun Asaithambi; Naga Snigdha Syamala Bandhakavi; Pavithra Arikrishnan; Sarvesh Sridharan; Sania Ullas; Saranya Udayakumar; Agnishwar Girigoswami; Koyeli Girigoswami.

Жооптуу авторлор: Булак PDF Agnishwar Girigoswami жана Koyeli Girigoswamiни correspondence белгиси менен көрсөтөт.

Мекеме 1: Medical Bionanotechnology Lab, Department of Obstetrics and Gynaecology, Saveetha Medical College and Hospital, Saveetha Institute of Medical and Technical Sciences, Thandalam, Chennai 602105, Tamilnadu, India.

Мекеме 2: Department of Pharmacology, Saveetha Medical College and Hospital, Saveetha Institute of Medical and Technical Sciences, Thandalam, Chennai 602105, Tamilnadu, India.

Мекеме 3: Faculty of Allied Health Sciences, Chettinad Hospital and Research Institute, Chettinad Academy of Research and Education, Chettinad Health City, Kelambakkam, Chennai 603103, Tamilnadu, India.

Журнал: Chemistry.

Басмакана: MDPI, Basel, Switzerland.

Жыл: 2026.

Том / сан / макала номери: 8(7), 98.

DOI: 10.3390/chemistry8070098.

Жөнөтүлгөн күнү: 9 июнь 2026.

Ревизия күнү: 10 июль 2026.

Кабыл алынган күнү: 14 июль 2026.

Жарыяланган күнү: 15 июль 2026.

Булактын түрү: Түпнуска эксперименттик изилдөө макаласы.

Рецензия абалы: Журналда жарыяланган рецензияланган макала.

Лицензия: Creative Commons Attribution (CC BY).

Каржылоо: Авторлор изилдөө тышкы каржылоо албаганын билдиришкен.

Кызыкчылыктардын кагылышы: Авторлор кызыкчылыктардын кагылышы жок экенин билдиришкен.

Маалыматтардын жеткиликтүүлүгү: Булакка ылайык, маалыматтарды негиздүү суроо-талап менен жооптуу авторлордон алууга болот.

Кошумча материал: Кошумча материалда химиялык жол менен синтезделген ZnO нанобөлүкчөлөрүнүн SEM сүрөтү, 12 сааттык ZnO-NP insulin amyloid бузулуу ThT салыштыруусу жана Shankhapushpi экстрактынын GC-MS компоненттери камтылган S1 таблицасы бар.

Авторлордун салымдары: Концептуалдаштыруу K.G.; методология K.G., T.A., N.S.S.B., S.S. жана A.G.; валидация K.G. жана A.G.; изилдөө жана маалымат чогултуу T.A., N.S.S.B., P.A., S.S., S.U. (Sania Ullas), S.U. (Saranya Udayakumar), A.G. жана K.G.; биринчи долбоор A.G. жана K.G.; карап чыгуу, визуалдаштыруу жана көзөмөл A.G. жана K.G. тарабынан жүргүзүлгөн.

Булак ичиндеги шайкешсиздик жөнүндө эскертүү: ThT концентрация катарлары метод жана натыйжа бөлүмдөрүндө ар башка берилген; BSA контролу метод бөлүгүндө “positive”, натыйжа бөлүгүндө “negative” деп аталган; статистикалык методдо p < 0,001 чеги берилсе, 3-сүрөт түшүндүрмөсүндө *p < 0,01 деп жазылган. Кыскача бөлүмдөгү 160 µg/mLге чейин “in vitro жана in vivo” биошайкештик билдирүүсү менен кеңири зебра балыгы натыйжаларындагы 80 µg/mL чек да бирдей эмес. Бул айырмалар Verianla баянында үнсүз оңдолгон эмес.

Илимий түшүндүрмө чеги: Изилдөөнүн амилоид бузулуу табылгалары лабораторияда даярдалган insulin amyloid модели боюнча. Натыйжаларды Альцгеймер, Паркинсон, прион оорусу же башка адам амилоидоздорунда клиникалык дарылоо натыйжалуулугу катары чечмелөөгө болбойт.