Наногулҳои оксиди руҳ, ки бо экстракти Shankhapushpi синтез шудаанд (ZnO-NFs-Skp), Convolvulus pluricaulis наноструктураҳои оксиди руҳ мебошанд, ки бо усули таҳшинсозӣ бо истифода аз экстракти обии гиёҳи Shankhapushpi, ки ҳамчун Convolvulus pluricaulis муайян шудааст, синтез шудаанд. Дар ин таҳқиқот хусусиятҳои физикӣ-химиявии ZnO-NFs-Skp тавсиф шуда, мутобиқати биологии онҳо дар ҳуҷайраҳои PC12 ва ҷанинҳои моҳии зебра арзёбӣ гардида, таъсири вайронкунандаи онҳо ба фибриллаҳои пешакӣ ҳосилшудаи insulin amyloid (IA) тавассути ченкунии флуорессенсияи Thioflavin T (ThT) ва микроскопияи электронии сканерӣ омӯхта шудааст.

Диаметри гидродинамикии наногулҳои ҳосилшуда, ки бо парокандашавии динамикии нур чен карда шуд, 181 ± 22 nm, индекси полидисперсӣ 0,2288 ± 0,11 ва потенсиали зета −17,7 ± 1,3 mV гузориш шудааст. Дар тасвирҳои SEM сохторҳо ба гули мехчагул монанд буда, ғафсии миёнаи қисмҳои баргмонанди наногул 30 ± 5 nm гузориш шудааст. Таҳлили дифраксияи рентгенӣ нишон медиҳад, ки сохтор бо ZnO-и гексагоналии вюрцит мувофиқ аст; маълумоти хоми XRD-и манбаъ бошад %68,7 сохтори кристаллӣ ва %31,3 сохтори аморфиро нишон медиҳад.

Дар ҳуҷайраҳои PC12 баъд аз 24 соати истифодаи ZnO-NFs-Skp дар вояҳои гуногун тақрибан %80–100 зиндамонии ҳуҷайраҳо гузориш шудааст. Дар вояи баландтарини санҷидашудаи 160 µg/mL зиндамонӣ %80 ± 3,1, дар назорати коркарднашуда бошад %100 ± 2,2 дода шудааст ва ин фарқ дар манбаъ ҳамчун аҳамиятнок тавсиф шудааст. Бо вуҷуди ин, муҳаққиқон дар таҷрибаҳои баъдӣ вояи ZnO-NFs-Skp-ро бо 80 µg/mL маҳдуд кардаанд. Дар ҷанинҳои моҳии зебра натиҷаҳои муфассал гурӯҳҳои 20, 40 ва 80 µg/mL-ро нишон медиҳанд ва то 80 µg/mL нуқсони равшани инкишоф гузориш нашудааст.

Дар маркази таҷрибаи амилоидӣ на плакаи Алтсгеймере, ки мустақиман аз беморони инсон гирифта шудааст, балки insulin amyloid модели лабораторӣ мебошад, ки бо истифода аз Huminsulin ҳосил шудааст. Шиддати флуорессенсияи ThT-и IA-и коркарднашуда дар 4 соат 394, дар 8 соат 507, дар 12 соат 653 ва дар 24 соат 810 гузориш шудааст. Дар анҷоми 24 соат барои IA, ки бо 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp инкубатсия шудааст, шиддати флуорессенсия то 504 коҳиш ёфта, муҳаққиқон онро тақрибан %38 коҳиш гузориш кардаанд.

Дар муқоисаи 12-соата барои нанозарраҳои ZnO-и бо усули химиявӣ синтезшуда дар консентратсияи 80 µg/mL коҳиши флуорессенсияи IA %18, барои наногулҳои ZnO-и тавассути Shankhapushpi ҳосилшуда дар ҳамон консентратсия бошад %35 гузориш шудааст. Ин натиҷа нишон медиҳад, ки дар шароити таҷрибавии таҳқиқот сохтори наногул бо коҳиши бештари флуорессенсияи ThT нисбат ба нанозарраҳои стандартии ZnO алоқаманд аст. Аммо ин бозёфт муваффақияти клиникии табобат нест; он нишон намедиҳад, ки амилоидҳои Алтсгеймер дар инсон мустақиман пок шудаанд ё бемориҳои нейродегенеративӣ табобат шудаанд.

Амилоид чист ва чаро дар таҳқиқот insulin amyloid истифода шуд?

Амилоид истилоҳи умумӣ барои сохторҳои сафедаест, ки ҳангоми аз ҳолати муқаррарии ҳалшаванда баромада, нодуруст печида шудани баъзе сафедаҳо ва ташаккули фибриллаҳо ё агрегатҳои дорои миқдори зиёди β-қабат ва ҳалшавандагии паст ба вуҷуд меоянд. Таҳқиқоти манбаъ Aβ1-42 дар бемории Алтсгеймер, α-синуклеин дар бемории Паркинсон, сафедаҳои прион дар бемории Creutzfeldt–Jakob ва insulin amyloid-ҳои бо диабети навъи 2 алоқамандро ҳамчун намунаҳои гуногуни амилоид баррасӣ мекунад.

Муҳаққиқон дар ин кор Aβ1-42-ро мустақиман истифода накардаанд. Ба ҷои он insulin amyloid (IA) ҳамчун модели таҷрибавӣ интихоб шудааст. Манбаъ мегӯяд, ки insulin amyloid бо дигар сохторҳои амилоидӣ миқдори зиёди β-қабат, ҳалнашавандагӣ ва хусусиятҳои агрегатсияро муштарак дорад ва аз ин рӯ метавонад дар таҳқиқоти амилоидоз ҳамчун сафедаи модели амилоидогенӣ истифода шавад.

Ин фарқ барои тафсири натиҷаҳо муҳим аст. Вайрон кардани insulin amyloid-и дар лаборатория тайёршуда аз ҷониби мавод маънои онро надорад, ки ҳамон мавод плакаҳои Aβ1-42 дар бемори Алтсгеймер, агрегатҳои α-синуклеин дар бемории Паркинсон ё сафедаҳои прионро ба ҳамин тарз вайрон мекунад. Муҳаққиқон низ равшан қайд мекунанд, ки самаранокӣ нисбат ба Aβ1-42 ва сафедаҳои прион бояд дар оянда алоҳида омӯхта шавад.

Shankhapushpi чист?

Гиёҳе, ки дар таҳқиқот бо номи Shankhapushpi истифода шудааст, Convolvulus pluricaulis мебошад. Муҳаққиқон экстракти обии гиёҳро танҳо ҳамчун моддаи озмоишии биологӣ истифода накарда, балки онро ҳамчун ҷузъи равиши синтези тавассути гиёҳ ё “синтези сабз” ҳангоми синтези наноструктураҳои ZnO низ истифода кардаанд.

Дар скрининги фитохимиявӣ дар экстракти обии Shankhapushpi алкалоидҳо, кумаринҳо ва гликозидҳо ошкор шудаанд. Дар таҳлили GC-MS манбаъ Dodecanoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester -ро ба миқдори %93,52 ва Octadecanoic acid, 2,3-bis[(1-oxotetradecyl)oxy]propyl ester -ро ба миқдори %6,48 гузориш мекунад. Ин арзишҳо натиҷаҳои GC-MS-и таҳқиқоти манбаъ мебошанд; ин таҷриба исбот намекунад, ки маҳз ин пайвастҳо ба танҳоӣ сабаби таъсири мушоҳидашудаи амилоидӣ мебошанд.

Экстракти гиёҳ чӣ гуна омода шуд?

1. 0,3 g гули хушкшудаи Shankhapushpi ба 100 mL оби дистиллшуда илова карда шуд.
2. Омехта дар 70 °C бо омехтакунаки магнитӣ 2 соат омехта карда шуд.
3. Сипас дар маҷмӯъ 1 соат дар ваннаи ултрасадоӣ нигоҳ дошта шуд; манбаъ инро ҳамчун чор маротиба истифодаи 15-дақиқагӣ нишон медиҳад.
4. Экстракт аз филтри Whatman гузаронда шуд.
5. То истифодаи минбаъда дар 4 °C нигоҳ дошта шуд.
6. Дар манбаъ ҳосилнокии экстракт %25 гузориш шудааст.

Наногулҳои ZnO чӣ гуна синтез шуданд?

Дар истеҳсоли ZnO-NFs-Skp усули таҳшинсозӣ истифода шуд. Барои прекурсори дигидрати ацетати руҳ манбаъ консентратсияи 0,4 M медиҳад. Ин прекурсор дар 100 mL экстракти Shankhapushpi бо 3 M NaOH якҷо шуда, дар ҳарорати хонагӣ бо шиддат 2 соат омехта карда шудааст.

Сипас pH бо истифода аз 1 M NaOH ба 12,5 танзим карда шуда, омехта дар 100 °C боз 2 соат омехта карда шудааст. Бикер бо фолгаи алюминӣ пӯшида шуда, маҳлул дар ҳарорати хонагӣ барои таҳшиншавӣ дар тӯли шаб гузошта шудааст.

Таҳшини ҳосилшуда барои дур кардани ҷузъҳои реаксиянакарда се маротиба бо оби дистиллшуда шуста шудааст. Шарти сентрифугакунӣ 5000 rpm, 10 дақиқа дода шудааст. Таҳшин хушк, дар 300 °C калсинатсия ва дар ҳован майда карда шуда, хокаи ZnO-NFs-Skp ба даст омадааст.

Барои муқоиса нанозарраҳои стандартии ZnO чӣ гуна омода шуданд?

Муҳаққиқон қобилияти вайрон кардани амилоиди наногулҳоро танҳо дар дохили худ арзёбӣ накарда, онҳоро бо нанозарраҳои ZnO-и бо усули химиявӣ синтезшуда низ муқоиса кардаанд. Барои ин дар 50 mL этанол маҳлули 20 mM дигидрати ацетати руҳ омода шуда, 15 дақиқа омехта ва сипас 0,5 g NaOH тадриҷан илова карда шудааст.

Омехта 2 соат омехта шуда, дар ҳарорати хонагӣ дар тӯли шаб нигоҳ дошта шудааст. Таҳшини сафеди ZnO дар 5000 rpm 10 дақиқа сентрифуга шуда ҷамъоварӣ, ду маротиба бо оби дистиллшуда шуста, дар 300 °C 1 соат калсинатсия ва майда карда шудааст.

Чаро андозаи як “наногул” танҳо як адад нест?

Дар таҳқиқот ду мафҳуми гуногуни андоза вуҷуд дорад ва онҳоро набояд бо ҳам омехта кард. Арзиши 181 ± 22 nm, ки бо DLS чен шудааст, диаметри гидродинамикӣ мебошад. Ин арзиш андозаи самаранокеро ифода мекунад, ки ба ҳаракати зарра ё агрегат дар моеъ вобаста аст. Баръакс, арзиши дар SEM гузоришшудаи 30 ± 5 nm диаметри тамоми наногул нест, балки ғафсии қисмҳои баргмонандест, ки сохтори гулмонандро ташкил медиҳанд.

Потенсиали зета чиро нишон медиҳад?

Потенсиали зета ченаки вобаста ба рафтори электрокинетикии сатҳи зарраҳо дар моеъ буда, барои арзёбии майли дисперсияҳои нанозарраҳо ба тела додани ҳамдигар ё ҷамъшавӣ истифода мешавад. Дар таҳқиқот барои ZnO-NFs-Skp −17,7 ± 1,3 mV ёфт шудааст.

Аломати манфӣ нишон медиҳад, ки потенсиали электрокинетикии сатҳи зарраҳо дар шароити ченкунӣ самти манфӣ дорад. Муаллифони манбаъ ин бузургиро бо такя ба адабиёти пешина ҳамчун устувории сатҳи миёна тафсир мекунанд. Ин арзиш маънои “зарраҳо ҳеҷ гоҳ ҷамъ намешаванд”-ро надорад; муаллифон инчунин имкони дар гурӯҳҳо мондани сохтори наногулро баррасӣ мекунанд.

Таҳлили XRD чӣ гуна табиати сохторро дастгирӣ мекунад?

Дифраксияи рентгенӣ (XRD) нақшҳои дифраксияро, ки аз тартиби ҳамворҳои атомӣ дар сохторҳои кристаллӣ вобастаанд, чен мекунад. Қуллаҳои 2θ-и дар манбаъ барои ZnO-NFs-Skp гузоришшуда чунинанд:

Муаллифон мегӯянд, ки ин қуллаҳо ба маълумоти стандартии JCPDS 36-1451 монанданд ва натиҷаҳо ZnO-и гексагоналии вюрцит -ро дастгирӣ мекунанд. Қуллаҳои тез ҳамчун нишондиҳандаи сохтори кристаллӣ тафсир шуда, дар манбаъ аз маълумоти хом %68,7 кристаллӣ ва %31,3 аморфӣ дода шудааст.

Чаро FTIR истифода шуд?

Спектроскопияи инфрасурхи табдили Фурье (FTIR) аз ларзишҳои пайвандҳои молекулавӣ дар минтақаҳои муайяни басомади инфрасурх истифода мекунад. Аз ин рӯ, он бештар дар бораи гурӯҳҳои функсионалӣ ё ларзишҳои пайвандҳо маълумот медиҳад, на ин ки тамоми сохтори молекуларо мустақилона муайян кунад.

EDAX чиро нишон дод?

Спектроскопияи рентгении дисперсионии энергетикӣ (EDAX/EDX) таркиби элементиро бо истифода аз рентгенҳои хосе, ки аз намунаи ангезонидашуда дар микроскопи электронӣ мебароянд, меомӯзад. Дар Шакли 2-и манбаъ дар намунаи ZnO-NFs-Skp асосан Zn ва O ва инчунин изҳои камтарини карбон ва натрий нишон дода шудаанд. Муаллифон қайд мекунанд, ки изҳои карбон ва натрий метавонанд бо экстракти Shankhapushpi алоқаманд бошанд; ин тафсир дар сатҳи эҳтимол аст.

Санҷиши Thioflavin T Вайроншавии Амилоидро Чӣ Гуна Нишон Медиҳад?

Thioflavin T (ThT), рангест, ки ҳангоми пайваст шудан ба фибриллаҳои амилоидии бой аз β-қабат флуорессенсияаш ба таври назаррас зиёд мешавад. Аз ин рӯ, дар шароити якхелаи таҷрибавӣ флуорессенсияи баланди ThT метавонад бо миқдори бештари сохторҳои амилоидии қобили пайвастшавӣ ба ThT ва коҳиши флуорессенсия бо камшавӣ ё тағйири ин сохторҳо алоқаманд бошад. Бо вуҷуди ин, сигнали ThT худ аз худ тамоми механизми молекулавии вайроншавиро исбот намекунад; аз ин рӯ дар таҳқиқот тасвирҳои SEM низ ҳамчун далели иловагӣ истифода шудаанд.

Insulin amyloid чӣ гуна ҳосил шуд?

Huminsulin дар 65 °C барои 24 соат инкубатсия шуда, insulin amyloid омода карда шуд. Сипас IA-и пешакӣ ҳосилшуда бо ZnO-NFs-Skp дар 37 °C барои вақтҳои гуногун инкубатсия шуд.

Дар бахши усули манбаъ консентратсияҳои ZnO-NFs-Skp 40, 60 ва 80 µg/mL дода шудаанд. Аммо дар бахши натиҷаҳо ва шарҳҳои марбут ба график силсила ҳамчун 20, 40 ва 80 µg/mL оварда мешавад. Азбаски ин ду силсила дар манбаъ мувофиқ нестанд, дар ин ҷо яке ба ҷои дигаре “ислоҳ” нашудааст.

Флуорессенсия чӣ гуна чен карда шуд?

1. IA бо ZnO-NFs-Skp дар 37 °C инкубатсия карда шуд.
2. Намунаҳо дар нуқтаҳои 4, 8, 12 ва 24 соат гирифта шуданд.
3. 10 µL намунаи IA бо 190 µL маҳлули 20 µM ThT омехта карда шуд.
4. pH-и маҳлули ThT 7,2 дода шудааст.
5. Аз ин омехта 100 µL ба 3 mL оби дистиллшуда илова карда шуд.
6. Дарозии мавҷи ангезиш 412 nm истифода шуд.
7. Эмиссияи флуорессенсия дар диапазони 420–560 nm чен карда шуд.

Хониши рақамии натиҷаҳои ThT

Коҳиши %38-ро чӣ гуна бояд фаҳмид?

Дар манбаъ барои IA-и коркарднашуда дар 24 соат шиддати флуорессенсия 810 ва барои IA-и бо 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp коркардшуда 504 гузориш шудааст. Фарқи байни ин ду арзиш 306 воҳид аст. Нисбат ба арзиши ибтидоии муқоисавии 810 ин фарқ тақрибан %37,8 аст ва мақола онро гирд карда, ҳамчун %38 коҳиш гузориш мекунад.

Ин ҳисоб шарҳи арифметикии ду адади додаи таҳқиқот аст; натиҷаи нави таҷрибавӣ нест:

\[ \text{Göreli floresans azalması} = \frac{I_{\mathrm{kontrol}}-I_{\mathrm{işlem}}}{I_{\mathrm{kontrol}}}\times 100 \]

Дар ин ҷо \(I_{\mathrm{kontrol}}\) флуорессенсияи IA-и коркарднашуда дар ҳамон заминаи муқоисавӣ ва \(I_{\mathrm{işlem}}\) флуорессенсияи IA-и бо ZnO-NFs-Skp коркардшударо ифода мекунад. Агар ба арзишҳои 24-соатаи гузоришшуда татбиқ шавад:

\[ \frac{810-504}{810}\times100 \approx 37{,}8\% \]

Ин фоиз коҳиши нисбии флуорессенсияи ThT-ро ифода мекунад. Табдил додани он ба иддаои қавитаре чун “дақиқ %38 молекулаҳои амилоид аз ҷиҳати химиявӣ нобуд шуданд” дуруст нест. Мақола ин тағйири флуорессенсияро ҳамчун нишондиҳандаи вайроншавии амилоид тафсир карда, онро бо мушоҳидаҳои пора-пора шудани фибриллаҳо дар SEM дастгирӣ кардааст.

Оё Наногулҳои ZnO Аз Нанозарраҳои Стандартии ZnO Самараноктар Буданд?

Дар муқоисаи 12-соатаи худи таҳқиқоти манбаъ — ҳа. Дар консентратсияи 80 µg/mL барои нанозарраҳои химиявии ZnO тақрибан %18, барои ZnO-NFs-Skp бошад тақрибан %35 вайроншавии IA гузориш шудааст. Дар ҳар ду муқоиса консентратсия ва муддати инкубатсия якхел нигоҳ дошта шудаанд.

Муаллифон ин фарқро бо масоҳати баланди сатҳ ва рӯйҳои баргмонанди барҷастаи морфологияи наногул алоқаманд мекунанд. Аммо дар ин таҳқиқот байни ченкунии мустақили миқдории масоҳати сатҳ ва вайроншавии амилоид таҳлили сабабӣ пешниҳод нашудааст. Аз ин рӯ, ибораи “геометрияи наногул дақиқ сабаби ду баробар самаранокӣ аст” аз он чизе ки маълумоти манбаъ иҷозат медиҳад, қавитар мебуд.

Тасвирҳои SEM чӣ илова мекунанд?

Азбаски санҷиши ThT ченкунии ғайримустақими ба флуорессенсия асосёфта аст, муҳаққиқон морфологияи амилоидро бо SEM низ омӯхтанд. Дар намунаи IA-и пешакӣ ҳосилшуда сохторҳои фибриллии дарозтар дида шуданд, дар ҳоле ки баъд аз 24 соат коркард бо ZnO-NFs-Skp қисмҳои хурдтар мушоҳида шуданд. Муаллифон ин тағйири морфологиро ҳамчун далели визуалии дастгирии пора-пора шудани фибриллаҳои калон ба сохторҳои хурдтар тафсир кардаанд.

Азбаски худи тасвири SEM мушоҳидаи таҷрибавӣ аст, дар ин ҷо “тасвири микроскоп”-и сунъӣ истеҳсол нашудааст. Ба ҷои тақлид кардани тасвири воқеии микроскопии манбаъ, паёми илмии мушоҳида бо матн шарҳ дода шудааст.

Таҷрибаи Мутобиқати Биологӣ бо Ҳуҷайраҳои PC12 Чиро Нишон Медиҳад?

PC12 хатти ҳуҷайравиест, ки аз феохромоситомаи калламуш ҳосил шуда, дар таҳқиқоти нейробиология истифода мешавад. Вазифаи ҳуҷайраҳои PC12 дар ин таҳқиқот нишон додани он нест, ки ZnO-NFs-Skp амилоидҳоро дар майнаи инсон пок мекунад ё не; балки арзёбии таъсири эҳтимолии заҳрноки наноструктураҳо ба ҳуҷайраҳост.

Ба ҳар чоҳи лавҳаи 96-чоҳагӣ 5 × 10³ ҳуҷайраи PC12 дар марҳилаи афзоиши экспоненсиалӣ илова карда шуд. Пас аз 24 соат часпидани ҳуҷайраҳо дар муҳити пурраи DMEM, онҳо бо 10, 20, 40, 80 ва 160 µg/mL ZnO-NFs-Skp коркард шуданд. Коркардҳо дар се такрор анҷом дода шуда, ҳуҷайраҳо 24 соати дигар инкубатсия шуданд.

Барои маҳлули MTT аз захираи 5 mg/mL 10 µL илова карда шуд, ҳуҷайраҳо дар торикӣ 4 соат инкубатсия шуданд, кристаллҳои формазани ҳосилшуда дар DMSO ҳал карда шуда, абсорбанс дар 570 nm чен карда шуд.

Нуктаи муҳим барои хондани эҳтиёткоронаи таҳқиқот ин аст: дар 160 µg/mL зиндамонӣ тақрибан то %80 коҳиш меёбад ва манбаъ ин коҳишро нисбат ба гурӯҳи назоратӣ аз ҷиҳати оморӣ аҳамиятнок тавсиф мекунад. Муҳаққиқон бо такя ба он ки дар адабиёти пешина %80 зиндамонии ҳуҷайра ҳамчун ҳадди мутобиқати биологӣ истифода шудааст, ин вояро боз ҳам мутобиқи биологӣ тасниф карда, аммо таҷрибаҳои баъдиро бо 80 µg/mL маҳдуд карданд.

Рангкунии дугонаи зинда-мурда чӣ кард?

Акридин норанҷӣ (AO) ва бромиди этидий (EtBr) якҷоя истифода шуданд. Тибқи шарҳи таҳқиқот AO ҳуҷайраҳои зиндаро сабз ва EtBr ҳуҷайраҳои мурдаро сурх нишон медиҳад. Пас аз 24 соати табобат ҳуҷайраҳо бо 3 µM AO ва 1,9 µM EtBr ранг карда шуда, дар микроскопи флуорессентӣ тасвирбардорӣ шуданд.

Манбаъ мегӯяд, ки дар ҳуҷайраҳое, ки танҳо бо insulin amyloid коркард шудаанд, асосан рангшавии сурх дида шудааст, дар ҳоле ки дар гурӯҳҳои бо ZnO-NFs-Skp коркардшуда то 80 µg/mL нишонаи равшани марги ҳуҷайра мушоҳида нашудааст.

Таҷрибаи Моҳии Зебра Самаранокии Табобатро Санҷид ё Мутобиқати Биологиро?

Мутобиқати биологиро санҷид. Дар ҷанинҳои моҳии зебра бемории амилоидӣ ҳосил карда нашуд, то санҷида шавад, ки ZnO-NFs-Skp онро табобат мекунад ё не. Ҷанинҳо барои мушоҳидаи он истифода шуданд, ки наноструктура заҳрнокии инкишофиро ба вуҷуд меорад ё не.

Муҳаққиқон ҷанинҳои 8 соат пас аз бордоршавӣ (8 hpf)-ро харидорӣ карда, ҷанинҳои солимро зери микроскоп интихоб намуда, дар лавҳаҳои 24-чоҳагӣ ба ҳар чоҳ 10 ҷанин дар муҳити E3 ҷойгир карданд. Ҷанинҳо дар шароити 14-соатаи рӯшноӣ-торикӣ нигоҳ дошта шуданд; марҳилаҳои инкишоф, фавт ва вақти баромадан аз тухм бо микроскопи рӯшноӣ пайгирӣ шуданд.

Нуқсонҳои инкишофии омӯхташуда аз варами перикардиалӣ, думи каҷ, сутунмуҳраи каҷ, варами халтаи зардӣ, деформатсияи чашм ва нуқсонҳои болчаҳо иборат буданд. Дар натиҷаҳои муфассал гурӯҳҳои 20, 40 ва 80 µg/mL нишон дода шуда, деформатсияи равшани инкишоф гузориш нашудааст.

Дар гурӯҳҳои 40 ва 80 µg/mL баромадан аз тухм каме дертар буд, аммо фарқ нисбат ба назорати коркарднашуда аз ҷиҳати оморӣ аҳамиятнок набуд. Муҳаққиқон дар бахши натиҷаҳои муфассал ба хулоса омадаанд, ки ZnO-NFs-Skp то 80 µg/mL хуб таҳаммул шудааст .

Усул ва Натиҷаҳои Таҳқиқот

Тарҳи таҳқиқот

Ин таҳқиқоти таҷрибавии наноматериал ва вайроншавии амилоид мебошад. Марҳилаҳои асосии тарҳ чунинанд:

1. Омодасозии экстракти обии Shankhapushpi ва таҳлили фитохимиявӣ/GC-MS.
2. Синтези наногулҳои ZnO тавассути экстракти гиёҳ.
3. Синтези нанозарраҳои химиявии ZnO барои муқоиса.
4. Тавсиф бо DLS, потенсиали зета, FTIR, XRD, SEM ва EDAX.
5. Мутобиқати биологии in vitro дар ҳуҷайраҳои PC12 бо MTT ва рангкунии дугонаи AO/EtBr.
6. Арзёбии мутобиқати биологии инкишофӣ дар ҷанинҳои моҳии зебра.
7. Ҳосил кардани insulin amyloid дар лаборатория.
8. Инкубатсияи IA бо ZnO-NFs-Skp дар вақтҳо ва консентратсияҳои гуногун.
9. Ченкунии тағйири сигнали амилоид бо флуорессенсияи ThT.
10. Муқоисаи морфологияи IA-и коркарднашуда ва коркардшуда бо SEM.
11. Муқоисаи таъсири амилоидии ZnO-NP ва ZnO-NFs-Skp дар 12 соат.

Усули оморӣ

Манбаъ мегӯяд, ки таҷрибаҳо дар се такрор анҷом дода шуда, маълумот ҳамчун миёна ± хатои стандартии миёна (SEM) ифода шудаанд. Барои аҳамияти оморӣ байни гурӯҳҳои табобат ва назорати коркарднашуда t-санҷиши Student-и ҷуфтнашуда истифода шудааст.

Дар бахши усули оморӣ p < 0,001 ҳамчун ҳадди аҳамият навишта шудааст. Аммо дар шарҳи Шакли 3, ки зиндамонии ҳуҷайраро нишон медиҳад, барои аломати ситора * p < 0,01 дода шудааст. Азбаски манбаъ шарҳ намедиҳад, ки ин ду ҳадди гуногун чӣ гуна мувофиқ карда мешаванд, баёни Verianla онҳоро ба як арзиш табдил намедиҳад.

Натиҷаҳои асосии тавсиф

• Дар экстракти Shankhapushpi алкалоидҳо, кумаринҳо ва гликозидҳо ошкор шуданд.
• Диаметри гидродинамикии ZnO-NFs-Skp 181 ± 22 nm чен карда шуд.
• PDI 0,2288 ± 0,11 гузориш шуд.
• Потенсиали зета −17,7 ± 1,3 mV муайян шуд.
• Дар SEM морфологияи наногули монанд ба мехчагул мушоҳида шуд.
• Ғафсии сохторҳои баргмонанд 30 ± 5 nm чен карда шуд.
• EDAX асосан Zn ва O нишон дод; изҳои C ва Na низ гузориш шуданд.
• Қуллаҳои XRD ҳамчун мувофиқ ба сохтори ZnO-и гексагоналии вюрцит тафсир шуданд.
• Барои ZnO-NP-и бо усули химиявӣ синтезшуда дар маводи иловагӣ андозаи зарра тақрибан 40 ± 7 nm ва морфологияи асосан сферӣ гузориш шудааст.

Натиҷаҳои асосии мутобиқати биологӣ

• Зиндамонии ҳуҷайраҳои PC12 дар тамоми вояҳои санҷидашуда умуман дар диапазони %80–100 гузориш шудааст.
• Дар 160 µg/mL зиндамонӣ то %80 ± 3,1 коҳиш ёфт; назорат %100 ± 2,2 буд.
• Муҳаққиқон таҷрибаҳои баъдиро бо ҳадди аксар 80 µg/mL анҷом доданд.
• Дар санҷиши AO/EtBr барои ZnO-NFs-Skp то 80 µg/mL нишонаи равшани куштани ҳуҷайра гузориш нашудааст.
• Дар арзёбии муфассали ҷанинҳои моҳии зебра то 80 µg/mL нуқсони равшани морфологии инкишоф гузориш нашудааст.
• Дар 40 ва 80 µg/mL каме дершавии баромадан аз тухм мушоҳида шуд, аммо манбаъ онро аҳамиятнок наёфт.

Натиҷаҳои асосии амилоид

• Флуорессенсияи ThT-и IA-и коркарднашуда байни 4–24 соат аз 394 то 810 афзуд.
• Дар 24 соат дар гурӯҳи 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp флуорессенсия 504 чен карда шуд.
• Манбаъ ин фарқро тақрибан %38 вайроншавии IA тафсир кард.
• Дар шароити 12 соат ва 80 µg/mL, ZnO-NP-и химиявӣ тақрибан %18 ва ZnO-NFs-Skp тақрибан %35 вайроншавии IA нишон дод.
• Дар мушоҳидаҳои SEM пеш аз коркард фибриллаҳои дарози амилоид ва баъд аз коркард қисмҳои хурдтар дида шудаанд.

Номувофиқатиҳои муҳими дохили манбаъ

Натиҷаҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ мекунад

• Бо истифода аз Shankhapushpi наноструктураҳои ZnO-и гулмонанд синтез карда шуданд.
• Маводи ҳосилшуда бо усулҳои DLS, потенсиали зета, FTIR, XRD, SEM ва EDAX тавсиф шуд.
• Дар шароити истифодашудаи таҷрибаҳои PC12 ва ҷанини моҳии зебра барои ZnO-NFs-Skp як равзанаи муайяни мутобиқати биологӣ мушоҳида шуд.
• Модели пешакӣ тайёршудаи insulin amyloid баъд аз инкубатсия бо ZnO-NFs-Skp флуорессенсияи пасттари ThT нишон дод.
• Дар шароити 24 соат ва 80 µg/mL манбаъ тақрибан %38 коҳиши флуорессенсияи ThT-ро ҳамчун вайроншавии амилоид гузориш кард.
• Дар ҳамон муқоисаи 12 соат ва 80 µg/mL ZnO-NFs-Skp нисбат ба ZnO-NP-и химиявӣ коҳиши бештари флуорессенсияи ThT нишон дод.
• Тасвирҳои SEM мушоҳидаи морфологиеро пешниҳод карданд, ки гузариш аз фибриллаҳои дарози IA ба сохторҳои хурдтари пора-порашударо дастгирӣ мекунад.

Натиҷаҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ намекунад

• Нишон дода нашудааст, ки ZnO-NFs-Skp бемории Алтсгеймерро табобат мекунад.
• Вояи бехатар барои инсон муайян нашудааст.
• Гузариш аз монеаи хун-мағз нишон дода нашудааст.
• Нишон дода нашудааст, ки плакаҳои Aβ1-42 дар майнаи инсон вайрон шудаанд.
• Таъсири мустақим ба агрегатҳои α-синуклеин дар бемории Паркинсон санҷида нашудааст.
• Дар ин таҳқиқот таҷрибаи мустақими вайроншавӣ ба сафедаҳои прион анҷом дода нашудааст.
• Дар таҷрибаи моҳии зебра нишон дода нашудааст, ки бемории амилоидӣ табобат шудааст; ин бахш барои мутобиқати биологӣ аст.
• Коҳиши %38 ThT маънои онро надорад, ки бори амилоид дар бадани инсон %38 кам мешавад.
• Аз ҷиҳати таҷрибавӣ ҷудо карда нашудааст, ки морфологияи наногул ягона механизми сабабии бартарии мушоҳидашуда аст.

Маҳдудиятҳои асосии таҳқиқот

Муаллифон ошкоро ҳамчун маҳдудият қайд мекунанд, ки барои истифодаи клиникӣ вайроншавии пурраи амилоид зарур хоҳад буд ва дар таҷрибаҳои онҳо ба %100 вайроншавӣ расида нашудааст. Онҳо пешниҳод мекунанд, ки инкубатсияи дарозтар метавонад вайроншавии бештар диҳад; аммо ин пешниҳод натиҷаи бевосита исботшудаи таҷрибаи мавҷуда нест.

Муҳимтарин маҳдудияти биологӣ ин аст, ки санҷишҳои вайроншавии амилоид бо модели insulin amyloid анҷом дода шудаанд. Aβ1-42 ё пептидҳои прионӣ, ки бо бемории Алтсгеймер алоқаманданд, сафедаи ҳадафии ин таҷриба нестанд. Муҳаққиқон пешниҳод мекунанд, ки ин намудҳои амилоид дар оянда алоҳида санҷида шаванд.

Илова бар ин, самаранокии вайроншавии амилоид дар организми воқеии беморӣ арзёбӣ нашудааст. Муаллифон қайд мекунанд, ки қобилияти вайрон кардани амилоиди ZnO-NFs-Skp дар оянда бояд дар модели ҳайвоноти беморӣ таҳқиқ шавад.

Ёддошт оид ба Манбаъ ва Усул

Таҳқиқоти аслӣ: Spectrofluorimetric Analysis of Amyloid Degradation Using Shankhapushpi Extract/Zinc Oxide Nanoflower—An In Vitro Study

Муаллифон: Tharun Asaithambi; Naga Snigdha Syamala Bandhakavi; Pavithra Arikrishnan; Sarvesh Sridharan; Sania Ullas; Saranya Udayakumar; Agnishwar Girigoswami; Koyeli Girigoswami.

Муаллифони масъул: PDF-и манбаъ Agnishwar Girigoswami ва Koyeli Girigoswami-ро бо аломати correspondence нишон медиҳад.

Муассиса 1: Medical Bionanotechnology Lab, Department of Obstetrics and Gynaecology, Saveetha Medical College and Hospital, Saveetha Institute of Medical and Technical Sciences, Thandalam, Chennai 602105, Tamilnadu, India.

Муассиса 2: Department of Pharmacology, Saveetha Medical College and Hospital, Saveetha Institute of Medical and Technical Sciences, Thandalam, Chennai 602105, Tamilnadu, India.

Муассиса 3: Faculty of Allied Health Sciences, Chettinad Hospital and Research Institute, Chettinad Academy of Research and Education, Chettinad Health City, Kelambakkam, Chennai 603103, Tamilnadu, India.

Маҷалла: Chemistry.

Ношир: MDPI, Basel, Switzerland.

Сол: 2026.

Ҷилд / шумора / рақами мақола: 8(7), 98.

DOI: 10.3390/chemistry8070098.

Санаи ирсол: 9 июни 2026.

Санаи бознигарӣ: 10 июли 2026.

Санаи қабул: 14 июли 2026.

Санаи нашр: 15 июли 2026.

Навъи манбаъ: Мақолаи аслии таҷрибавии илмӣ.

Ҳолати ҳамтоёбӣ: Мақолаи ҳамтоёбишудаи дар маҷалла нашршуда.

Иҷозатнома: Creative Commons Attribution (CC BY).

Маблағгузорӣ: Муаллифон гузориш кардаанд, ки таҳқиқот маблағгузории беруна нагирифтааст.

Бархӯрди манфиатҳо: Муаллифон изҳор кардаанд, ки бархӯрди манфиатҳо вуҷуд надорад.

Дастрасии маълумот: Тибқи манбаъ, маълумотро бо дархости асоснок аз муаллифони масъул дастрас кардан мумкин аст.

Маводи иловагӣ: Дар маводи иловагӣ тасвири SEM-и нанозарраҳои ZnO-и бо усули химиявӣ синтезшуда, муқоисаи ThT-и вайроншавии insulin amyloid бо ZnO-NP дар 12 соат ва Ҷадвали S1 бо ҷузъҳои GC-MS-и экстракти Shankhapushpi мавҷуд аст.

Саҳми муаллифон: Консептуализатсия K.G.; методология K.G., T.A., N.S.S.B., S.S. ва A.G.; тасдиқ K.G. ва A.G.; таҳқиқ ва ҷамъоварии маълумот T.A., N.S.S.B., P.A., S.S., S.U. (Sania Ullas), S.U. (Saranya Udayakumar), A.G. ва K.G.; тарҳи аввал A.G. ва K.G.; бозбинӣ, визуализатсия ва назорат аз ҷониби A.G. ва K.G. анҷом дода шуданд.

Ёддошт оид ба номувофиқати дохилии манбаъ: Силсилаи консентратсияи ThT дар бахшҳои усул ва натиҷаҳо гуногун дода шудааст; назорати BSA дар бахши усул “positive” ва дар бахши натиҷа “negative” номида шудааст; дар усули оморӣ ҳадди p < 0,001 нишон дода шудааст, дар ҳоле ки дар шарҳи Шакли 3 *p < 0,01 навишта шудааст. Изҳори хулоса дар бораи мутобиқати биологии “in vitro ва in vivo” то 160 µg/mL бо ҳадди 80 µg/mL дар натиҷаҳои муфассали моҳии зебра низ якхела нест. Ин фарқҳо дар баёни Verianla хомӯшона ислоҳ нашудаанд.

Ҳадди тафсири илмӣ: Бозёфтҳои вайроншавии амилоид дар ин таҳқиқот ба модели insulin amyloid-и дар лаборатория тайёршуда тааллуқ доранд. Натиҷаҳоро ҳамчун самаранокии клиникии табобат дар Алтсгеймер, Паркинсон, бемории прион ё дигар амилоидозҳои инсонӣ тафсир кардан мумкин нест.