Калпротектини наҷосат дар арзёбии лаборатории илтиҳоби рӯда ба биомаркери муҳим табдил ёфтааст. Калпротектин сафедаест, ки дар нейтрофилҳо фаровон аст; ҳангоми илтиҳоби луобпардаи рӯда сатҳи он дар наҷосат метавонад зиёд шавад. Аз ин рӯ ченкунии он, махсусан дар inflammatory bowel diseases, ба клиницист маълумоти ғайриинвазивӣ медиҳад. Таҳқиқот мегӯяд, ки ин бемориҳо дар соли 2020 тақрибан %0,2 аҳолии Аврупоро таъсир кардаанд.

Колоноскопия арзёбии мустақими визуалӣ медиҳад, вале инвазивӣ ва захираталаб аст. Fecal calprotectin метавонад эҳтимоли илтиҳобро арзёбӣ карда, баъзе эндоскопияҳои нолозимро кам кунад. Аммо ин маркери хоси беморӣ нест ва танҳо бо баланд буданаш ташхиси муайян намедиҳад.

Масъалаи таҳқиқот амалияи лабораторӣ аст. ELISA маъмул аст, аммо вақт мегирад ва корманди таҷрибадор мехоҳад. Усулҳои immunoturbidimetric метавонанд ба анализаторҳои биокимиёи рутинӣ ҳамгиро шаванд ва натиҷаро дар тақрибан 30 дақиқа диҳанд. Усули арзёбишуда Bühlmann fCAL® turbo дар Roche cobas c503 мебошад.

Принсипи усул particle-enhanced turbidimetric immunoassay аст. Калпротектин бо антителоҳои зидди калпротектини инсон, ки ба нанозарраҳои полистирен пайвастанд, комплекс месозад; тирагӣ меафзояд ва анализатор онро бо абсорбанс чен мекунад:

\[ \text{Absorbans artışı} \propto \text{Kalprotektin-antikor partikül kompleksleri} \propto \text{fCal konsantrasyonu} \]

Намунаҳо аз фаъолияти рутинӣ дар Montauban Hastanesi ва маводҳои IQC/EQC гирифта шуданд. IQC ду сатҳ дошт: 87 µg/g ва 281 µg/g. EQC аз Biologie Prospective® омад. Намунаҳо бо CALEX Cap дар давоми 6 соат коркард шуда, 1:500 dilution сохта шуд; баъд 10 дақиқа дар 2000 × g ва 20°C центрифуга шуданд.

Шаш намунаи A-F арзишҳои 42,5 µg/g, 59,0 µg/g, 179,7 µg/g, 192,8 µg/g, 1141,2 µg/g ва 1723,0 µg/g доштанд. Диапазони ченкунӣ 30-2000 µg/g буд. Blank limit 9,1 µg/g, detection limit 19,1 µg/g, lower quantitation limit 30,0 µg/g ва upper quantitation limit 2000,0 µg/g гузориш шуд.

Дурустӣ ва дақиқӣ чунин ҳисоб шуданд:

\[ \text{Trueness}(\%) = \frac{\text{Ölçülen konsantrasyon} - \text{Hedef konsantrasyon}}{\text{Hedef konsantrasyon}} \times 100 \]

\[ CV(\%) = \frac{\text{Standart sapma}}{\text{Ortalama}} \times 100 \]

Номуайянии ченкунӣ чунин ифода шуд:

\[ u(C) = \sqrt{u^2_{\text{IQC}}} \]

\[ U = 2 \times u(C) \]

Модели вобаста ба консентратсия чунин буд:

\[ \log(2 \cdot CV) = -0.852 \cdot \log(C) + 2.922 + \epsilon \]

r²=0,9476 буд, вале модел бо маълумоти берунӣ ё лабораторияҳои дигар тасдиқ нашудааст.

Истеҳсолкунанда устувории реактивро дар дастгоҳ 90 рӯз тавсия мекунад. Дар таҳқиқот lot 1 то 236 рӯз ва lot 2 то 99 рӯз арзёбӣ шуд. Калибронӣ то 10 ҳафта drift нишон надод. Аммо ин натиҷаҳо танҳо дар шароити маҳаллии ин лаборатория ба даст омадаанд ва дар дигар марказҳо local validation талаб мекунанд.

Дар нигоҳдории намунаҳо дар +4°C, сатҳҳои паст бештар тағйирпазир буданд. Дар намунаҳои зери 200 µg/g баъзе bias аз %15 гузашт; дар намунаҳои зиёда аз 1000 µg/g bias зери %10 монд. Аз ин рӯ барои сатҳҳои паст риояи тавсияи 15 рӯз муҳим аст.

Bootstrap барои кам кардани хароҷоти validation истифода шуд. Ба ҷойи 120 test, равиши 30 test бо n=100.000 simulation тақрибан 188 € арзиш дошт, дар муқоиса бо 750 €; ин тақрибан %75 сарфаи реактив аст. Аммо ин равиш низ бояд барои ҳар лаборатория алоҳида санҷида шавад.

Усул ва Натиҷаҳои Таҳқиқот

Ин таҳқиқот validasyon-и усули лабораторӣ мебошад. Он иҷрои Bühlmann fCAL® turbo-ро дар Roche cobas c503 бо намунаҳои бемор, IQC ва EQC арзёбӣ мекунад. Тамаркуз ба иҷрои таҳлилӣ, устувории реактив, калибронӣ, нигоҳдории намуна, номуайянии ченкунӣ ва хароҷот аст.

Чизи гуфтаи таҳқиқот: усул иҷрои мувофиқ нишон дод; устувории реактив дар шароити таҳқиқот аз 90 рӯз зиёд буд; калибронӣ то 10 ҳафта устувор монд; bootstrap хароҷотро кам кард; сатҳҳои пасти fCal бештар эҳтиёт мехоҳанд. Чизи нагуфта: ин санҷиш танҳо ташхис намегузорад ва гузаштан аз давраи истеҳсолкунанда дар ҳама лабораторияҳо исбот нашудааст.

Ёддошт оид ба Манбаъ ва Усул

Ин мақола бар асоси кори Vallauris Meslé, Lucie Thene, Sabine Billoré, Claire Chassagne, Caroline Camaré ва David Metsu бо унвони “Analytical performance of Bühlmann fCAL® turbo assay on c503 Roche module for fecal calprotectin: validation for extended on-board stability” омода шудааст. Манбаъ preprint аст ва аз арзёбии ҳамтоён нагузаштааст; натиҷаҳо local validation ва назорати доимии IQC/EQC талаб мекунанд.