Utafiti huu unachunguza mbinu ya kromatografia ya kioevu yenye utendaji wa juu iliyotengenezwa na kuthibitishwa kwa ajili ya upimaji wa kiasi wa wakati mmoja wa gemcitabine (GEM) na olaparib (OLA) katika sampuli moja. Mbinu iliyotengenezwa ni HPLC ya isokratiki isiyotumia bafa, inayotenganisha GEM na OLA kwenye kolamu ya awamu ya kinyume C18 na kupima analiti zote mbili katika 243 nm kwa kigunduzi cha safu ya fotodiodi. Awamu tembezi ya mwisho ilikuwa asetonitrili:maji 50:50 (v/v), kiwango cha mtiririko 0,8 mL/dak, halijoto ya kolamu 30 °C na ujazo wa sindano 10 µL. GEM ilielutiwa katika takribani dakika 3,3 na OLA katika takribani dakika 4,3. Mbinu ilionyesha uhusiano wa mstari kati ya 0,5–10,0 µg/mL; \(R^2>0.999\) ilipatikana kwa analiti zote mbili, na unyeti, usahihi wa kurudiarudia, usahihi, uteuzi, uimara na uthabiti vilitathminiwa. Urejeshaji katika tishu ya kongosho ya panya iliyotengwa uliripotiwa kuwa %102,64–104,26 ± 0,56 kwa GEM na %97,80–99,51 ± 0,57 kwa OLA. Kikomo kikuu cha utafiti ni kwamba huu si utafiti wa ufanisi wa matibabu wala farmakokinetiki ya in vivo, bali ni utafiti wa uthibitishaji wa mbinu ya uchanganuzi.

Changamoto kuu katika uundaji wa mbinu ni kwamba sifa za kifizikokemia za GEM na OLA zinatofautiana kwa kiasi kikubwa. GEM ni polar zaidi, ilhali OLA ni molekuli yenye upolari mdogo. Lengo la utafiti halikuwa tu kutenganisha suluhisho mbili safi za viwango, bali pia kuhakikisha kuwa dawa hizo mbili zinaweza kutambuliwa kwa kuaminika katika mazingira yenye viingilizi vinavyowezekana kama vipengele vya liposomu vilivyofunikwa kwa chitosan, salini iliyobafishwa kwa fosfati na tishu ya kongosho.

Tatizo la kisayansi la utafiti

Gemcitabine ni analojia ya nukleosidi inayotumika katika matibabu ya saratani ya kongosho. Olaparib ni kizuizi cha poly(ADP-ribose) polymerase, yaani PARP. Utafiti chanzo unachukulia hasa maslahi ya sasa ya kifamasia katika mchanganyiko wa GEM na OLA kwenye uvimbe wa kongosho wenye hitilafu za urekebishaji wa DNA zinazohusishwa na BRCA1 au BRCA2 kama muktadha wa matumizi ya mbinu.

Hata hivyo, lengo la majaribio la utafiti si kupima ufanisi wa kupambana na uvimbe wa mchanganyiko huu. Ikiwa mifumo mipya ya kubeba dawa ya liposomu au nanopartikeli itatengenezwa, kunahitajika mbinu ya uchanganuzi inayoweza kupima kwa kuaminika kiasi cha kila dawa katika sampuli ileile ya kibaolojia. Pengo la fasihi lililotajwa na waandishi wa chanzo ni kwamba, ingawa kuna mbinu za kupima GEM au OLA peke yake, hakuna mbinu ya kutosha ya kubainisha molekuli zote mbili kwa wakati mmoja mbele ya viingilizi changamano kama tishu ya kongosho au vipengele vya fomulesheni ya liposomu.

Kwa nini sifa tofauti za kikemia za GEM na OLA ni muhimu?

Katika utafiti chanzo, GEM imeripotiwa kuwa na uzito wa molekuli 299,7 g/mol, umumunyifu katika maji 0,824 mg/mL na thamani ya log P ya 0,28; OLA ina uzito wa molekuli 434,5 g/mol, umumunyifu katika maji 0,060 mg/mL na thamani ya log P ya 2,72. Tofauti hizi husababisha molekuli hizo mbili kuitikia kwa namna tofauti kwa awamu tembezi ileile katika kromatografia ya awamu ya kinyume.

Kielelezo 1 cha chanzo kinaonyesha miundo ya molekuli ya GEM na OLA kando kwa kando. Kazi ya kisayansi ya kielelezo si mapambo ya molekuli; ni kutoa muktadha wa kimuundo kuhusu kwa nini analiti hizo mbili, kwa sababu ya tofauti za upolari na umumunyifu, zinaweza kuonyesha tabia tofauti zinazohitaji kuboreshwa ndani ya mbinu ileile ya kromatografia.

Gemcitabine na olaparib zilitenganishwaje katika mbinu ileile ya HPLC?

GEM na OLA zilitenganishwa kwenye kolamu ya awamu ya kinyume C18 yenye vipimo 250 × 4,6 mm na kipenyo cha chembe 5 µm, kwa kupitisha awamu tembezi ya asetonitrili:maji 50:50 (v/v) kwa 0,8 mL/dak kwa hali ya isokratiki, kisha kupimwa katika 243 nm kwa ugunduzi wa PDA/DAD. Katika hali zilizochaguliwa, GEM ilielutiwa karibu dakika 3,3 na OLA karibu dakika 4,3, huku azimio kati ya vilele viwili likiwa karibu 5,2.

Kwa nini 243 nm ilichaguliwa?

Watafiti kwanza walichunguza viwango vya GEM na OLA katika hali ya skani ya UV–Vis kati ya 190–400 nm. Upeo uliripotiwa karibu 198, 243 na 275 nm kwa GEM; na karibu 207, 254 na 276 nm kwa OLA. Kisha 254, 275, 243 na 231 nm zililinganishwa katika vipimo vya HPLC-DAD.

Kielelezo 2 cha chanzo ndicho msingi wa kuona wa uchaguzi huu. Ingawa dawa zote mbili ziliweza kutenganishwa katika urefu wa mawimbi uliochunguzwa, 243 nm ilichaguliwa kama urefu wa wimbi wa pamoja wa ugunduzi unaotoa majibu ya vilele yenye nguvu ya kutosha na yanayokaribiana kwa GEM na OLA huku ukipunguza ufyonzwaji wa viingilizi vinavyowezekana.

Kwa nini awamu tembezi ilibadilishwa kutoka methanoli hadi asetonitrili?

Wakati wa uundaji wa mbinu, hali 15 za kromatografia zilijaribiwa. Katika majaribio ya kwanza mifumo ya methanoli/maji ilitumika; hata hivyo, kilele kilichotokana na kiyeyushi kilionekana katika eneo la ushikiliaji wa GEM, hivyo utengano kamili haukupatikana. Katika hali ambapo pH ya maji ilipunguzwa hadi 3, kilele cha GEM kiliharibika au kilele cha OLA kilitoweka.

Kubadilisha hadi asetonitrili kuliboresha utengano wa vilele vya GEM na OLA kutoka kwa vilele vya kiyeyushi/matriksi. Baada ya kupata utengano unaofaa kwa uwiano wa asetonitrili:maji 60:40, hali ya mwisho ya 50:50 ilichaguliwa kwa kuongeza sehemu ya maji na kupunguza mtiririko hadi 0,8 mL/dak.

Wasifu wa Lengo la Uchanganuzi na vigezo vya kukubalika

Watafiti hawakutathmini mbinu kwa kuangalia matokeo yaliyopatikana pekee, bali kabla ya majaribio walifafanua Wasifu wa Lengo la Uchanganuzi (Analytical Target Profile, ATP) na vigezo vya kukubalika. Lengo ni upimaji wa wakati mmoja wa GEM na OLA katika fomulesheni za liposomu na tishu ya kongosho katika masafa ya 0,5–10 µg/mL.

Matriksi ya kongosho iliandaliwaje?

Kongosho zilizotumika katika utafiti zilitolewa kutoka kwa panya waliofanyiwa euthanasia katika majaribio mengine ambayo hayakuathiri kazi ya kongosho. Chanzo kinatoa nambari ya itifaki 23106.125197/2021-49 kwa University of Brasília Ethics Committee.

Jumla ya 200 mg ya tishu ya kongosho iligawanywa katika sehemu za 40 mg na kila sehemu ikawekwa katika 1 mL ya methanoli. Sampuli zilichanganywa kwa 300 rpm kwa saa 24 katika halijoto ya kawaida; kisha zika-homojenishwa kwa 10.000 rpm kwa dakika 5 na kusentrifugishwa kwa 4000 rpm kwa dakika 10. Supernatanti iliwekwa juu ya barafu wakati wa jaribio. Kabla ya sindano, 5 mL ya supernatanti ilichanganywa na 45 mL ya suluhisho la asetonitrili:maji 50:50.

Kwa nini liposomu zilizofunikwa kwa chitosan ziliandaliwa?

Liposomu hazikuandaliwa katika utafiti huu ili kuonyesha mafanikio ya matibabu, bali kupima kama mbinu iliyotengenezwa ingeathiriwa na vipengele vya fomulesheni wakati wa kupima GEM na OLA kutoka mifumo ya baadaye ya usafirishaji wa dawa ya liposomu.

Phosphatidylcholine ilibadilishwa kuwa liposomu kwa mbinu ya uhidratishaji wa filamu nyembamba; filamu ilihidratishwa kwa PBS katika 55 °C, ikahomojenishwa na kisha ikapitishwa kwa mfuatano kupitia membrane zenye matundu ya 600, 200 na 100 nm. Baadaye liposomu zilifunikwa kwa suluhisho la %0,1 chitosan oligosaccharide. Vipengele hivi vilitumika kama viingilizi vya uchanganuzi katika majaribio ya uteuzi.

Uteuzi wa mbinu ulithibitishwaje?

Uteuzi ulitathminiwa kwa kulinganisha maeneo ya vilele, muda wa ushikiliaji na usafi wa vilele katika sampuli zenye dawa zote mbili kwa 5,0 µg/mL, mbele na bila PBS, vipengele vya liposomu vilivyofunikwa kwa chitosan na homogenati ya kongosho; hakuna ko-elusheni dhahiri iliyoripotiwa katika maeneo makuu ya ushikiliaji wa GEM na OLA, na fahirisi za usafi wa kilele zilibaki karibu 0,999–1,000.

Kielelezo 3 cha chanzo kinaonyesha kromatogramu za udhibiti zikiwa zimewekwa juu ya kromatogramu za PBS, vipengele vya liposomu na matriksi ya kongosho. Vilele vikuu vya GEM na OLA vilitenganishwa na vilele vya kuingilia. Kielelezo 4 kinalinganisha kwa kiasi eneo la kilele na muda wa ushikiliaji.

Dokezo la takwimu ndani ya chanzo: Katika sehemu ya mbinu imeelezwa kuwa ANOVA ya njia moja haikuonyesha athari kubwa ya matriksi na ulinganisho katika Kielelezo 4 umewekewa alama “ns”. Kinyume chake, sentensi moja katika maandishi ya matokeo ina usemi “p < 0.05, ANOVA”. Kauli hizi mbili hazipatani. Verianla haisahihishi thamani hii kwa dhana ya nje ya chanzo; inaweka wazi tofauti kati ya tafsiri ya jumla ya uteuzi katika chanzo na usemi uliochapishwa wa thamani ya p.

Ufaafu wa mfumo

Katika vipimo vya ufaafu wa mfumo vilivyofanywa kwa marudio sita, idadi ya sahani za kinadharia iliripotiwa kuwa \(5808\pm76\) kwa GEM na \(7966\pm56\) kwa OLA. Vipengele vya tailing vilikuwa \(1.44\pm0.01\) na \(1.36\pm0.01\) mtawalia, vipengele vya uwezo karibu \(2.0\pm0.0\) na \(2.6\pm0.2\), na azimio kati ya vilele viwili \(5.22\pm0.01\). Thamani za CV zilibaki chini ya %2.

Ulinganifu wa mstari

Mikondo ya kalibresheni ya GEM na OLA, iliyoandaliwa kutoka suluhisho tatu huru za akiba, ilichunguzwa katika masafa ya 0,5–10,0 µg/mL. Milinganyo iliyopatikana kwa regresheni ya mstari ya mraba mdogo ni kama ifuatavyo:

\[ \text{GEM:}\quad y=20703x-897.76,\qquad R^2=0.9991 \]

\[ \text{OLA:}\quad y=25209x-710.11,\qquad R^2=0.9993 \]

Hapa \(x\) inawakilisha mkusanyiko wa analiti, na \(y\) jibu la kifaa katika umbo la eneo la kilele cha kromatografia. Katika grafu za mabaki za Kielelezo 5 cha chanzo, makosa ya jamaa yalitawanyika bila mpangilio kuzunguka mstari wa sifuri na kubaki ndani ya mipaka ya kukubalika ya ±%5.

LOD na LOQ zilihesabiwaje?

Kikomo cha ugunduzi (LOD) na kikomo cha upimaji wa kiasi (LOQ) vilihesabiwa kwa kutumia mkengeuko wa kawaida wa jibu la kalibresheni \(\sigma\) na mteremko wa mstari wa kalibresheni \(S\); chanzo kinatumia milinganyo \(LOD=(3.3\times\sigma)/S\) na \(LOQ=(10\times\sigma)/S\).

\[ LOD=\frac{3.3\times\sigma}{S} \]

\[ LOQ=\frac{10\times\sigma}{S} \]

\(\sigma\)ni mkengeuko wa kawaida wa jibu; \(S\) ni mteremko wa mstari wa kalibresheni. Kadiri mteremko unavyoongezeka, LOD na LOQ hupungua kwa utofauti uleule wa jibu; hivyo mbinu huwa na uwezo wa kutofautisha viwango vya chini zaidi.

Thamani zote mbili za LOQ ziko chini ya 0,5 µg/mL, ambayo ni sehemu ya chini zaidi ya masafa ya kalibresheni yaliyothibitishwa. Chanzo pia kinaeleza kuwa ICH Q2(R2) haitoi thamani moja ya ulimwengu ya kukubalika kwa LOD/LOQ kwa mbinu zote za uchanganuzi.

Usahihi wa kurudiarudia ulihesabiwaje?

Usahihi ulijaribiwa kama kurudiarudia na usahihi wa kati. Sampuli za GEM na OLA katika viwango vya 1,0; 5,0 na 10,0 µg/mL zilichanganuliwa kwa marudio matatu; usahihi wa kati ulitathminiwa katika siku mbili tofauti na kwa wachanganuzi wawili tofauti.

Mgawo wa tofauti ulihesabiwa kwa mlinganyo ufuatao:

\[ CV(\%)=\frac{\text{standart sapma}}{\text{ortalama}}\times100 \]

Thamani zote za CV katika Jedwali 2 la chanzo zilibaki chini ya kikomo cha kukubalika cha %5. Matokeo haya yanaunga mkono kwamba katika masafa ya mkusanyiko yaliyochunguzwa, mbinu ilitoa jibu linaloweza kurudiwa licha ya mabadiliko ya mchambuzi na siku.

Usahihi ulihesabiwaje?

Usahihi ulihesabiwa kama uwiano wa mkusanyiko uliopimwa kwa majaribio dhidi ya mkusanyiko wa kinadharia:

\[ \text{Doğruluk}(\%)= \frac{\text{deneysel konsantrasyon}} {\text{teorik konsantrasyon}}\times100 \]

Maandishi ya simulizi ya chanzo yanaripoti masafa ya %97,50–101,82 kwa GEM na %96,89–103,15 kwa OLA, wakati thamani za mwisho zinazoonekana katika Jedwali 3 ni takribani %97,51–101,97 kwa GEM na %96,83–103,15 kwa OLA. Tofauti hii ndogo ya maandishi–jedwali inapaswa kuhifadhiwa kama ilivyo katika chanzo. Katika mawasilisho yote mawili, matokeo yako ndani ya masafa ya kukubalika yaliyofafanuliwa mapema ya %95–105.

Jaribio la uimara

Uimara ulijaribiwa kwa mkabala wa One-Factor-at-a-Time (OFAT). Muundo wa awamu tembezi ulibadilishwa kwa ±%5, halijoto ya kolamu kwa ±5 °C na kiwango cha mtiririko kwa ±0,1 mL/dak. Sampuli za jaribio zilikuwa na 5,0 µg/mL GEM na OLA na majaribio yalifanywa kwa marudio matatu.

Kadiri uwiano wa asetonitrili ulivyoongezeka, muda wa ushikiliaji wa OLA yenye upolari mdogo ulipungua; kiwango cha mtiririko kilipoongezeka, muda wa ushikiliaji wa analiti zote mbili ulipungua. Hata hivyo, vigezo vya ufaafu wa mfumo kama kipengele cha tailing, idadi ya sahani na kipengele cha uwezo vilibaki ndani ya mipaka ya kukubalika.

Uthabiti wa uchanganuzi

Dawa zote mbili zilifuatiliwa kwa siku 30 katika kiwango cha 5,0 µg/mL chini ya hali tatu za halijoto: 4 °C, halijoto ya kawaida na 40 °C. Vipimo vilifanywa katika siku 0, 7, 15, 21 na 30.

Kwa mujibu wa Kielelezo 6 cha chanzo, suluhisho katika 4 °C na halijoto ya kawaida zilibaki ndani ya masafa yanayokubalika ya %85–115 hadi siku ya 21. Katika 40 °C, suluhisho zilikidhi kigezo cha kukubalika hadi siku ya 15; ongezeko la mkusanyiko lililoonekana katika vipimo vya baadaye lilielezwa na waandishi kuwa lilitokana na uvukizaji mdogo wa kiyeyushi hai.

Uharibifu wa kulazimishwa

Suluhisho za akiba za GEM na OLA za 200 µg/mL ziliwekwa kwa saa moja chini ya mikazo ya asidi, alkali, oksidishaji, kimeng’enya, fotolitiki na joto. Mkazo wa asidi na alkali ulitumia 0,1 N HCl au NaOH; mkazo wa oksidishaji %3 H₂O₂; mkazo wa kimeng’enya tripsin; mkazo wa fotolitiki mwanga wa UV wa 1,2 milioni lux/h; na mkazo wa joto ulitumika katika 80 °C.

Uharibifu mkubwa zaidi ulionekana chini ya mkazo wa joto. Katika Kielelezo 7, bidhaa za uharibifu kuonekana katika muda wa ushikiliaji tofauti na vilele vikuu vya GEM na OLA kunaonyesha kwamba mbinu inaweza kutenganisha analiti kuu hata mbele ya bidhaa za uharibifu.

Mbinu na Matokeo ya Utafiti

Mfumo wa uchanganuzi na vifaa

Skani za spektra za UV zilifanywa kwa kifaa Shimadzu UV-1800 katika masafa ya 190–400 nm kwa kutumia seli ya quartz yenye urefu wa njia ya macho wa 10 mm. Uchambuzi wa kromatografia ulifanywa kwenye mfumo wa kromatografia ya kioevu Shimadzu LC-20AD; mfumo ulihusisha pampu ya vipengele vinne, sindano otomatiki ya sampuli SIL-20AD, oveni ya kolamu CTO-20AS, degasser na kigunduzi cha safu ya fotodiodi SPD-M20A. Shimadzu LC Software Version 1.25 SP4 ilitumika kukusanya na kuchanganua data.

Viwango vya kalibresheni

Suluhisho za akiba za GEM na OLA ziliandaliwa kando kwa mkusanyiko wa 200 µg/mL katika maji:asetonitrili 50:50 (v/v). Suluhisho za kalibresheni zilipunguzwa katika mfumo huohuo wa kiyeyushi na kuunda masafa ya kazi ya 0,5–10,0 µg/mL.

Jaribio la uteuzi

Dawa zote mbili zilichanganuliwa katika kiwango cha 5,0 µg/mL kwa marudio sita katika suluhisho la udhibiti, PBS, vipengele vya liposomu vilivyofunikwa kwa chitosan na homogenati ya kongosho. Watafiti walilinganisha muda wa ushikiliaji, maeneo ya vilele na usafi wa vilele kwa PDA.

Usahihi na usahihi wa kati

Viwango vya 1,0; 5,0 na 10,0 µg/mL vilichanganuliwa kwa marudio matatu; usahihi wa kati ulijaribiwa kwa kutumia wachanganuzi wawili tofauti na siku mbili tofauti. Katika Jedwali 2 la chanzo, thamani zote za CV ziko chini ya %5.

Jaribio la urejeshaji katika tishu ya kongosho

Katika jaribio la urejeshaji, kiasi kinachojulikana cha GEM na OLA kiliongezwa kwenye tishu ya kongosho ya panya. 1,0 mL ya suluhisho ya 250,0 µg/mL GEM+OLA iliongezwa kwenye sampuli ya tishu; baada ya kuondoa kiyeyushi, tishu iligawanywa vipande vidogo na kusimamishwa tena katika 50,0 mL maji:asetonitrili 50:50 ili kuweka mkusanyiko wa mwisho wa kila dawa katika 5,0 µg/mL.

Sampuli zilizungushwa usiku kucha katika kifaa Multi Bio RS-24 kwa 30 rpm katika halijoto ya kawaida, zikachujwa na kuchanganuliwa kwa mbinu ya HPLC-DAD iliyothibitishwa. Jaribio lilifanywa kwa marudio sita.

Matokeo ya urejeshaji katika tishu ya kongosho yanaonyesha nini?

Kati ya GEM iliyoongezwa kwa kiasi kinachojulikana kwenye tishu ya kongosho ya panya iliyotengwa, %102,64–104,26 ± 0,56 iliweza kupimwa mwisho wa mchakato wa uchanganuzi, na kwa OLA %97,80–99,51 ± 0,57; thamani hizi zinaunga mkono kufaa kwa mbinu kwa upimaji wa kiasi wa pamoja wa analiti mbili katika matriksi changamano ya kongosho, lakini hazionyeshi usambazaji wa dawa katika kiumbe hai halisi wala ufanisi wa matibabu katika uvimbe wa kongosho.

Muhtasari wa matokeo makuu ya uthibitishaji

Matokeo yanayoungwa mkono na utafiti

• GEM na OLA zinaweza kutenganishwa na kupimwa kwa kiasi katika mbinu ileile ya HPLC katika 243 nm.
• Katika masafa ya 0,5–10,0 µg/mL, jibu la mstari la kiwango cha \(R^2>0.999\) lilipatikana kwa analiti zote mbili.
• Thamani za LOD na LOQ ziko chini ya 0,5 µg/mL, ambayo ni kikomo cha chini cha masafa ya kazi yaliyothibitishwa.
• Katika majaribio ya usahihi, thamani za CV zilibaki chini ya kikomo kinachokubalika cha %5.
• Vipengele vya liposomu vilivyofunikwa kwa chitosan, PBS na matriksi ya kongosho havikusababisha ko-elusheni dhahiri na vilele vikuu vya analiti.
• Mabadiliko yaliyodhibitiwa ya awamu tembezi, halijoto na kiwango cha mtiririko hayakusukuma ufaafu wa mfumo nje ya mipaka ya kukubalika.
• Bidhaa za uharibifu wa kulazimishwa zilitenganishwa na vilele vikuu vya kromatografia vya GEM na OLA.
• Thamani za urejeshaji kutoka tishu ya kongosho ya panya iliyotengwa zinaendana na masafa ya kukubalika yaliyofafanuliwa mapema.

Matokeo yasiyoungwa mkono na utafiti

• Haithibitishi kwamba mchanganyiko wa GEM na OLA unatibu saratani ya kongosho kwa ufanisi zaidi kwa binadamu.
• Haionyeshi kwamba fomulesheni ya liposomu iliyofunikwa kwa chitosan imefanikiwa kliniki katika usafirishaji wa dawa unaolenga uvimbe.
• Haiwezi kuchukua nafasi ya jaribio halisi la farmakokinetiki ya in vivo kwa kutumia tu mtihani wa urejeshaji katika tishu ya kongosho ya panya.
• Haionyeshi kwamba viwango vilevile vya urejeshaji vitapatikana moja kwa moja katika tishu ya kongosho ya binadamu.
• Haifanyi tathmini ya usalama wa muda mrefu wa dawa au sumu ya kimatibabu.
• Haihakikishi kwamba mbinu ya uchanganuzi iliyotengenezwa itatoa utendaji uleule katika mifumo yote ya maabara bila uthibitishaji upya.

Nguvu na mipaka ya kimetodolojia

Nguvu za mbinu ni uwezo wa kupima analiti mbili zenye sifa tofauti za kifizikokemia katika hali moja ya isokratiki, kwa urefu mmoja wa wimbi na kwa lengo la muda wa kazi wa chini ya dakika nane; kutotumia bafa; kutathmini viingilizi vya fomulesheni za dawa pamoja na matriksi ya kibaolojia ya kongosho; na pia kupima usafi wa vilele mbele ya bidhaa za uharibifu wa kulazimishwa.

Hata hivyo, jaribio la urejeshaji wa kongosho ni la ex vivo na dawa ziliongezwa kwenye tishu kwa namna iliyodhibitiwa. Katika kiumbe halisi, mambo kama ufyonzwaji, usambazaji, metabolizimu, utoaji na utofauti ndani ya uvimbe hayakujaribiwa katika utafiti huu. Kwa hiyo, uwezekano wa kutumia mbinu katika tafiti za baadaye za farmakokinetiki lazima utofautishwe na madai kwamba utafiti kama huo wa in vivo ulifanywa katika makala hii.

Maelezo ya Chanzo na Mbinu

Utafiti asili: Chromatographic Method for Simultaneous Quantification of Gemcitabine and Olaparib Recovered from Isolated Pancreatic Tissue.

Waandishi: Mateus T. Silva; Breno N. Matos; Moacyr J. B. Melo Rego; Tais Gratieri; Marcilio Cunha-Filho; Guilherme M. Gelfuso.

Mwandishi wa mawasiliano: Guilherme M. Gelfuso.

Taasisi: Laboratory of Food, Drugs, and Cosmetics (LTMAC), School of Health Sciences, University of Brasília, Brasília, Brazil; Laboratory of Immunomodulation and New Therapeutical Approaches, Research Centre for Therapeutic Innovation Suely Galdino (NUPIT-SG), Federal University of Pernambuco, Recife, Brazil.

Jarida: Chemistry.

Mchapishaji: MDPI.

Rekodi ya bibliografia: Chemistry 2026, 8(5), 63.

DOI: 10.3390/chemistry8050063.

Kiungo rasmi cha chapisho: https://www.mdpi.com/2624-8549/8/5/63

Tarehe ya kuchapishwa: 7 Mei 2026. Makala ilipokelewa 4 Aprili 2026, ikarekebishwa 29 Aprili 2026 na kukubaliwa 4 Mei 2026.

Aina ya chanzo: Makala ya utafiti iliyopitiwa na wataalamu katika kemia ya uchanganuzi / uchanganuzi wa dawa; utafiti wa majaribio wa uundaji na uthibitishaji wa mbinu.

Mbinu kuu: HPLC ya awamu ya kinyume C18, awamu tembezi ya isokratiki ya asetonitrili:maji, ugunduzi wa PDA/DAD; mkabala wa uthibitishaji wa ICH Q2(R2) na kanuni za ufaafu wa mfumo wa USP <621>.

Matriksi: Suluhisho za viwango, PBS, vipengele vya liposomu vilivyofunikwa kwa chitosan na tishu ya kongosho ya panya iliyotengwa.

Taarifa ya kimaadili ya chanzo: Tishu za kongosho zilipatikana kutoka kwa panya waliofanyiwa euthanasia kwa majaribio mengine na waliobaki kutoka tafiti ambazo hazikuathiri kazi ya kongosho; chanzo kinatoa nambari ya itifaki ya University of Brasília Ethics Committee kama 23106.125197/2021-49.

Leseni: Creative Commons Attribution (CC BY).

Ufadhili: Utafiti ulifadhiliwa na CNPq kupitia ruzuku namba 310291/2021-6 na 402518/2025-0 na kwa msaada wa Edital Interno nº 005/2025/PPGCS ya University of Brasília. CAPES ilitoa msaada wa ufadhili kwa wanafunzi.

Upatikanaji wa data: Imeripotiwa kwamba data ghafi zinazounga mkono matokeo ya makala zitatolewa na waandishi kwa ombi.

Mgongano wa maslahi: Waandishi wametangaza kuwa hakuna mgongano wa maslahi.

Shukrani: Waandishi wanamshukuru Marcia Mortari kwa kutoa sampuli za kongosho.

Michango ya waandishi: Uundaji wa dhana G.M.G. na M.J.B.M.R.; mbinu na uthibitishaji M.T.S. na B.N.M.; uchanganuzi rasmi M.T.S. na G.M.G.; utafiti M.T.S. na B.N.M.; rasilimali T.G., M.C.-F., M.J.B.M.R. na G.M.G.; rasimu ya awali M.T.S. na B.N.M.; mapitio na uhariri T.G., M.C.-F., M.J.B.M.R. na G.M.G.; usimamizi M.J.B.M.R. na G.M.G.; usimamizi wa mradi G.M.G.; upatikanaji wa ufadhili M.J.B.M.R. na G.M.G. imeripotiwa.

Kutofautiana ndani ya chanzo 1: Katika sehemu ya uteuzi, sehemu ya maandishi hutoa ulinganisho wa vichafuzi kama “p < 0.05, ANOVA”, ilhali utafiti huohuo unaweka alama “ns” katika Kielelezo 4 na kuripoti katika sehemu ya mbinu kwamba hakuna athari kubwa ya matriksi. Verianla haisahihishi tofauti hii kwa dhana ya nje ya chanzo.

Kutofautiana ndani ya chanzo 2: Kuna tofauti ndogo za nambari kati ya masafa ya simulizi katika sehemu ya usahihi na thamani za mwisho zinazoonekana katika Jedwali 3. Verianla haijabadilisha thamani za jedwali kuwa za maandishi wala kinyume chake.

Kikomo kikuu cha kimetodolojia: Matumizi ya matriksi ya kibaolojia katika utafiti yanategemea urejeshaji wa kiasi kinachojulikana cha dawa kilichoongezwa kwenye tishu ya kongosho ya panya iliyotengwa. Usambazaji halisi wa farmakokinetiki ya in vivo, ulengaji wa uvimbe, uthibitishaji katika tishu ya binadamu na ufanisi wa matibabu ya kliniki havimo ndani ya wigo wa utafiti huu.

Kikomo cha matumizi ya kisayansi: Maandishi haya ya Verianla yanaeleza kwa muundo wa kielimu muundo wa mbinu, uthibitishaji wake, matokeo ya kiasi na mipaka iliyo ndani ya chanzo. Kwa uthibitishaji wa kikanuni, uhamisho wa mbinu kwenda maabara nyingine au marejeo ya kitaaluma, makala asili na nyaraka husika za ICH/USP zinapaswa kuchunguzwa.