Dondoo la maji yaliyochemshwa (boiled water extract, BWE) ni dondoo ghafi kutoka mwili wa tunda wa Flammulina velutipes ya kahawia yenye asili ya porini, lililojaribiwa dhidi ya biofilamu. Utafiti wa in vitro wa Yui Nabetani, Kouji Kuramochi na Yuuki Furuyama ulionyesha kuwa BWE hupunguza biofilamu ya Staphylococcus aureus kulingana na konsentrasheni bila kuzuia ukuaji. Pia lilipunguza biofilamu ya Cutibacterium acnes. Hivyo F. velutipes ya porini huenda ina viambato vinavyoathiri biofilamu bila kuua bakteria.

Tofauti kuu: kupungua kwa biofilamu hakukutokana na kuondolewa kwa bakteria. Katika Colony-forming unit (CFU), konsentrasheni ya seli za S. aureus haikupungua. Hii inaashiria mkakati wa non-bactericidal unaolenga kushikamana na uso na mpangilio wa biofilamu.

Molekuli tendaji haijatambuliwa. Nuclear magnetic resonance (NMR) inaashiria sugar alcohol, lakini muundo si hakika. Kuzuia mshikamano wa awali au athari ya detergent-like ni nadharia tu. Usalama, ufanisi wa kliniki na usugu havikujaribiwa.

Kwa nini biofilamu ni lengo muhimu?

Ni jamii ya vijidudu vinavyoshikamana na uso ndani ya matriksi ya polysaccharides, protein na extracellular DNA. Huilinda bakteria dhidi ya msongo na kupunguza ufanisi wa viua-vijidudu.

Staphylococcus aureus ni pathojeni nyemelezi ya ngozi; biofilamu kwenye catheter, kiungo bandia na vifaa ni tatizo la maambukizi ya huduma za afya.

Kuua bakteria pekee huenda hakutoshi. Shinikizo kubwa la viua-vijidudu linaweza kuchagua makundi sugu; kulenga tabia ya biofilamu ni eneo tofauti la utafiti.

Kupunguza biofilamu bila kuua bakteria humaanisha nini?

Ni kuzuia uwezo wa kuunda matriksi iliyopangwa bila kupunguza sana bakteria hai. Kwa S. aureus, ishara ilipungua lakini CFU haikupungua; si kizuizi rahisi cha ukuaji.

Kwa nini tofauti hii ni muhimu?

Dutu ikiua bakteria na kupunguza biofilamu, kupungua kunaweza kuwa kwa sababu ya seli hai chache; ni vigumu kutenganisha athari maalumu.

Udhibiti wa CFU ulitenganisha kupungua kwa biofilamu na kuzuiwa kwa ukuaji.

Kwa nini F. velutipes ya porini ilichaguliwa?

Ya kibiashara F. velutipes, enoki, hujulikana kwa cultivars nyeupe. Yaseishu-enoki ni cultivar ya kahawia kutoka idadi ya porini ya milimani iliyofaa uzalishaji.

Wasifu wa viambato hai huathiriwa na jenetiki, ukuzaji na makazi; kwa hiyo athari za cultivars za F. velutipes zinaweza kutofautiana.

Ni uyoga gani ulilinganishwa?

Dondoo liliandaliwaje?

Sampuli ya F. velutipes ya 15 g iliwekwa katika 500 mL Milli-Q, ikachemshwa saa moja, ikachujwa kwa No. 5B, ikakolezwa kwa uvukizaji na kurekebishwa kwa konsentrasheni.

Bakteria gani zilitumika?

Staphylococcus aureus NBRC 100910 kutoka NITE Biological Resource Center ilikuzwa katika LB agar/LB broth kwa 37 °C aerobically.

Cutibacterium acnes JCM6245 kutoka RIKEN Bio Resource Research Center ilikuzwa katika Gifu anaerobic medium, %10 CO2, %0,1 O2, 37 °C.

Jaribio la biofilamu lilifanywaje?

S. aureus ilipunguzwa mara tano katika LB yenye %1 glucose hadi OD600=0,2–0,3; glucose iliongezwa kusaidia S. aureus kuunda biofilamu.

200 µL iliwekwa katika visima vitatu vya 96-well plate. Milli-Q ilikuwa udhibiti hasi, 20 µg/mL ampicillin chanya; 37 °C, siku tatu anaerobically.

Crystal violet hupima nini?

Hutia rangi biomass yote iliyoshikamana; baada ya kuyeyusha rangi absorbance hupimwa kwa 595 nm. Ishara ndogo ni nyenzo kidogo.

Supernatant iliondolewa, kuoshwa kwa phosphate-buffered saline, kufungwa kwa 200 µL methanol dakika 15, kukaushwa 65 °C na kutiwa 150 µL %0,1 crystal violet dakika 20.

Baada ya kuosha, 200 µL %99,5 ethanol iliyeyusha rangi; 100 µL ilihamishwa na kupimwa 595 nm.

Figure 1: Konsentrasheni ilipoongezeka nini kilitokea?

Katika Figure 1, kwa 10, 15 na 30 mg/mL BWE, biofilamu ya S. aureus ilipungua dhidi ya udhibiti; rangi na absorbance zilipungua kulingana na konsentrasheni.

10 mg/mL ilikuwa chini; 15 na 30 mg/mL chini zaidi; zote p<0,001.

Hii inaunga mkono uhusiano wa dozi lakini haitambui molekuli.

Figure 2: Uyoga mwingine ulikuwa na athari sawa?

La. Kwa 10 mg/mL, BWE ya F. velutipes ya porini ilikuwa na absorbance ndogo kuliko nyeupe, Amashiyaki F. velutipes, P. ostreatus ve P. eryngii var. tuoliensis.

Si cultivars zote za F. velutipes ni nyenzo sawa; tofauti ilihusishwa na jenetiki na kemia.

Je, BWE haikuwa antibacterial kweli?

Kwa S. aureus, haikupunguza wingi wa seli. Figure 3: CFU ya 2,5 mg/mL haikuwa chini ya udhibiti; si kuua au kusimamisha ukuaji.

Ukuaji ulijaribiwaje?

S. aureus ilikuzwa saa 24 katika LB yenye %1 glucose; dondoo likaongezwa; Milli-Q hasi na 20 µg/mL ampicillin chanya.

37 °C saa 24 anaerobically; OD600=0,1; kupunguzwa mara 10.000; 50 µL kwenye LB agar tatu; 37 °C saa 24 na kuhesabu makoloni.

Figure 3 caption inasema 2,5 mg/mL.

Kwa nini CFU ya BWE ilionekana juu?

Amino acids na sugars huenda zilikuwa chakula cha S. aureus; ni tafsiri ya waandishi, si mekanizimu iliyothibitishwa.

Kwa nini C. acnes ilijaribiwa?

C. acnes iliangalia kama athari ni maalumu kwa S. aureus.

Figure 4: 10, 15 na 30 mg/mL zilipunguza ishara ya C. acnes; zote p<0,001.

S. aureus na C. acnes hutumia mekanizimu tofauti; hivyo huenda dondoo linalenga hatua ya pamoja.

Kiambato tendaji ni molekuli gani?

Utambulisho haujulikani. Supplementary NMR inaashiria sugar alcohol, lakini aina na mchango wa molekuli moja haujaonyeshwa.

NMR ilionyesha nini?

Spectra za proton na carbon ziliashiria muundo wa sugar alcohol.

Supplementary ina:

• Figure S1 — 1H NMR, 400 MHz, MeOD,
• Figure S2 — eneo la 1H NMR lililokuzwa la Figure S1,
• Figure S3 — 13C NMR, 100 MHz, MeOD

.

Je, ni Xylitol?

Xylitol ni mfano tu; haikuonyeshwa kuwa fraksheni hiyo.

Xylitol huenda huathiri adhesion genes na kuwa antibacterial kwa kutometabolishwa. Lakini BWE ya F. velutipes haikuzuia ukuaji wa S. aureus.

Mekanizimu huenda ni tofauti na antibacterial sugar alcohol inayojulikana.

BWE huenda huzuia biofilamu vipi?

Mekanizimu haijulikani: kuzuia mshikamano wa awali au athari ya detergent-like; lazima ithibitishwe.

Nadharia ya mshikamano wa awali

Ikiipunguza adhesion, bakteria inaweza kuongezeka lakini ishindwe kuunda biofilamu thabiti.

Haikupimwa moja kwa moja.

Nadharia ya detergent-like

Viambato huenda hubadili uso au mwingiliano wa seli–matriksi na kuvuruga mkusanyiko.

Surface tension, membrane na detergent activity havikujaribiwa.

Mbinu na Matokeo ya Utafiti

Mtiririko wa jaribio

1. F. velutipes ya porini ilichakatwa kwa maji moto.
2. BWE ikarekebishwa kwa konsentrasheni.
3. S. aureus iliinkubishwa katika %1 glucose.
4. Athari ilipimwa kwa crystal violet.
5. Cultivars za F. velutipes na uyoga mwingine zililinganishwa.
6. CFU ilikagua kizuizi cha ukuaji.
7. C. acnes ilikagua spishi ya pili.
8. NMR ilitoa dokezo la muundo.

Vigezo kuu

Matokeo Figure 1

Chanzo hakikutoa absorbance ghafi; Verianla haitoi thamani bandia kutoka grafu.

Matokeo Figure 2

Kwa 10 mg/mL dondoo la F. velutipes lilikuwa chini ya cultivars za F. velutipes na spishi mbili za Pleurotus.

Katika Figure 2 kundi la F. velutipes p<0,01; Ampicillin p<0,001.

Matokeo Figure 3

CFU ilikagua kuwa athari si bactericidal. 2,5 mg/mL BWE haikupunguza S. aureus.

CFU ilikuwa juu; maelezo ya virutubishi si mekanizimu iliyothibitishwa.

Matokeo Figure 4

C. acnes: 10, 15 na 30 mg/mL zote chini na p<0,001.

Uchambuzi wa takwimu

Wastani ± standard deviation; majaribio mengi marudio matatu.

Dunnett kwa udhibiti, Tukey–Kramer kwa Duplicate; Microsoft Office Excel na R version 4.0.2.

Hitimisho zinazoungwa mkono

• BWE ya F. velutipes ya porini ilipunguza biofilamu ya S. aureus.
• S. aureusAthari ya 10–30 mg/mL ilitegemea konsentrasheni.
• Cultivar ya porini ilikuwa na nguvu zaidi.
• BWE haikupunguza ukuaji wa S. aureus.
• Kupungua hakuelezwi na kizuizi cha ukuaji.
• Pia ilipunguza biofilamu ya C. acnes.
• NMR inaashiria sugar alcohol.

Hitimisho zisizoungwa mkono

• Muundo haujatambuliwa.
• Haikuonyeshwa kuwa xylitol.
• Mekanizimu hazijathibitishwa.
• Kuzuia maambukizi kwa binadamu hakukuonyeshwa.
• Usalama/ufanisi kama mipako haukuonyeshwa.
• Sumu na biocompatibility havikupimwa.
• Kupunguza usugu hakukupimwa.
• Athari kwa spishi zote haikuonyeshwa.
• Kutoka uyoga wa kuliwa hakuthibitishi usalama wa kitabibu.

Vikwazo vikuu

Spishi mbili tu maabara; haiwakilishi tishu, implant au jamii mchanganyiko kikamilifu.

Kiambato hakijulikani; molekuli moja, mchanganyiko au sifa za fizikia-kemia ni haijulikani.

Adhesion genes, quorum sensing, extracellular matrix, surface tension na membrane havikupimwa.

Crystal violet hupima biomass yote, haitenganishi seli hai, zilizokufa na matrix.

CFU huonyesha ukuaji; adaptation ya muda mrefu na evolution ya usugu hazikusomwa.

Hakuna sumu ya seli, modeli ya mnyama au uthibitisho wa binadamu.

Utafiti wa baadaye

Kutambua viambato na mekanizimu kunahitajika.

Kwa matumizi ya kliniki: biocompatibility, sumu, strains, mature biofilm na nyuso halisi lazima zithibitishwe; si matokeo ya sasa.

Maelezo ya Chanzo na Mbinu

Kichwa asili: Boiled Water Extract of Wild-Derived Flammulina velutipes Inhibits Biofilm Formation by Staphylococcus aureus Without Bactericidal Effects

Waandishi: Yui Nabetani; Kouji Kuramochi; Yuuki Furuyama.

Corresponding author: Yuuki Furuyama.

Taasisi: Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Science, 2641 Yamazaki, Noda 278-8519, Chiba, Japan.

Jarida: Acta Microbiologica Hellenica.

Mchapishaji: MDPI kwa niaba ya Hellenic Society for Microbiology.

Rekodi ya bibliografia: Acta Microbiol. Hell. 2026, Volume 71, Article 25.

DOI: 10.3390/amh71030025

Tarehe ya uchapishaji: 15 Julai 2026.

Tarehe za uhariri: Received 17 June 2026; Revised 8 July 2026; Accepted 14 July 2026.

Aina ya chanzo: Brief Report iliyopitiwa; in vitro mikrobiolojia na bidhaa asilia.

Leseni: Creative Commons Attribution (CC BY).

Nyenzo kuu:Flammulina velutipes ya porini, Yaseishu-enoki.

Kijidudu kikuu:Staphylococcus aureus NBRC 100910.

Kijidudu cha pili:Cutibacterium acnes JCM6245.

Uchimbaji: 15 g + 500 mL Milli-Q; saa 1 kuchemsha; kuchuja na kuvukiza.

Kipimo cha biofilamu: Crystal violet staining; absorbance 595 nm.

Kipimo cha ukuaji: Colony-forming unit.

Udhibiti chanya: Ampicillin, 20 µg/mL.

Takwimu: Wastani ± standard deviation; Dunnett na Tukey–Kramer; Microsoft Office Excel na R 4.0.2.

Supplementary: Supplementary Methods; Figure S1 na S2, 1H NMR 400 MHz MeOD; Figure S3, 13C NMR 100 MHz MeOD.

Ufadhili: JSPS KAKENHI, grant number 22K14814.

Institutional Review Board: Not applicable.

Informed Consent: Not applicable.

Upatikanaji wa data: Data zimo katika makala iliyochapishwa.

Shukrani: Shinko Industrial ilitajwa kwa kutoa uyoga.

Mgongano wa maslahi: Waandishi hawakuwa nao.

Michango: Yui Nabetani: Writing—original draft na Methodology; Kouji Kuramochi: Writing—review and editing na Supervision; Yuuki Furuyama: Writing—review and editing, Conceptualization na Project administration.

Kikomo cha tafsiri: Jaribio la in vitro. Kupungua kwa biofilamu kulionyeshwa, lakini molekuli, mekanizimu, usalama wa binadamu/mnyama na kuzuia au kutibu kliniki havikuonyeshwa.