Fecal calprotectin imekuwa biomarker muhimu katika tathmini ya maabara ya uvimbe wa utumbo. Calprotectin ni protini inayopatikana kwa wingi katika neutrophils; uvimbe wa mucosa ya utumbo unaweza kuongeza kiwango chake kwenye kinyesi. Kwa hiyo upimaji wa fecal calprotectin unaweza kutoa taarifa isiyoingilia mwili, hasa katika inflammatory bowel diseases. Utafiti unasema kuwa magonjwa haya yaliathiri takribani %0,2 ya watu wa Ulaya mwaka 2020.

Colonoscopy hutoa tathmini ya moja kwa moja, lakini ni invasive na inahitaji rasilimali. Fecal calprotectin inaweza kusaidia kupunguza endoscopy zisizo za lazima, lakini si marker maalumu ya ugonjwa na peke yake haitoshi kufanya diagnosis.

Tatizo la utafiti ni mazoezi ya maabara. ELISA ni njia inayotumika sana, lakini huchukua muda na huhitaji wafanyakazi wenye uzoefu. Njia za immunoturbidimetric zinaweza kuunganishwa kwenye routine biochemistry analyzers na kutoa matokeo kwa takribani dakika 30. Njia iliyotathminiwa ni Bühlmann fCAL® turbo kwenye Roche cobas c503.

Kanuni ya test ni particle-enhanced turbidimetric immunoassay. Calprotectin huunda complexes na antibodies za anti-human calprotectin zilizofungwa kwenye polystyrene nanoparticles; turbidity huongezeka na analyzer hupima absorbance:

\[ \text{Absorbans artışı} \propto \text{Kalprotektin-antikor partikül kompleksleri} \propto \text{fCal konsantrasyonu} \]

Sampuli zilitoka katika shughuli za routine za Montauban Hastanesi na vifaa vya IQC/EQC. IQC ilikuwa na levels 87 µg/g na 281 µg/g. EQC ilitolewa na Biologie Prospective®. Sampuli zilichakatwa kwa CALEX Cap ndani ya saa 6, zikitengeneza 1:500 dilution, kisha zikacentrifuged kwa dakika 10 katika 2000 × g na 20°C.

Sampuli sita A-F zilikuwa 42,5 µg/g, 59,0 µg/g, 179,7 µg/g, 192,8 µg/g, 1141,2 µg/g na 1723,0 µg/g. Measurement range ilikuwa 30-2000 µg/g. Blank limit ilikuwa 9,1 µg/g, detection limit 19,1 µg/g, lower quantitation limit 30,0 µg/g na upper quantitation limit 2000,0 µg/g.

Trueness na precision zilihesabiwa hivi:

\[ \text{Trueness}(\%) = \frac{\text{Ölçülen konsantrasyon} - \text{Hedef konsantrasyon}}{\text{Hedef konsantrasyon}} \times 100 \]

\[ CV(\%) = \frac{\text{Standart sapma}}{\text{Ortalama}} \times 100 \]

Uncertainty of measurement ilielezwa hivi:

\[ u(C) = \sqrt{u^2_{\text{IQC}}} \]

\[ U = 2 \times u(C) \]

Modeli inayotegemea concentration ilikuwa:

\[ \log(2 \cdot CV) = -0.852 \cdot \log(C) + 2.922 + \epsilon \]

r²=0,9476, lakini modeli haijathibitishwa kwa external data au maabara nyingine.

Mtengenezaji hupendekeza reagent stability ya siku 90 kwenye kifaa. Katika utafiti, lot 1 ilitathminiwa hadi siku 236 na lot 2 hadi siku 99. Calibration haikuonyesha drift hadi wiki 10. Hata hivyo, matokeo haya yanahitaji local validation kabla ya kutumiwa katika maabara nyingine.

Katika uhifadhi wa extracts kwa +4°C, sampuli za concentration ya chini zilikuwa na variability zaidi. Katika sampuli chini ya 200 µg/g, baadhi ya bias ilizidi %15; katika sampuli zaidi ya 1000 µg/g bias ilibaki chini ya %10. Kwa hiyo viwango vya chini vinahitaji kufuata kwa makini pendekezo la siku 15.

Bootstrap ilitumika kupunguza gharama ya validation. Badala ya 120 test, njia ya 30 test yenye n=100.000 simulations iligharimu takribani 188 € badala ya 750 €, ikionyesha kupungua kwa gharama ya reagent kwa takribani %75. Njia hii bado inahitaji validation ya ndani.

Mbinu na Matokeo ya Utafiti

Utafiti huu ni validation ya mbinu ya maabara. Unatathmini Bühlmann fCAL® turbo kwenye Roche cobas c503 kwa kutumia sampuli za wagonjwa, IQC na EQC. Lengo ni analytical performance, reagent stability, calibration, sample storage, uncertainty of measurement na gharama.

Kile utafiti unasema: njia ilionyesha performance inayofaa; reagent stability ilidumu zaidi ya siku 90 katika mazingira ya utafiti; calibration ilikuwa thabiti hadi wiki 10; bootstrap ilipunguza gharama; na viwango vya chini vya fCal vinahitaji tahadhari zaidi. Kile hausomi: test hii peke yake haitambui ugonjwa, na kuvuka maagizo ya stability ya mtengenezaji hakujathibitishwa kwa kila maabara.

Maelezo ya Chanzo na Mbinu

Makala hii imeandaliwa kwa kuzingatia kazi ya Vallauris Meslé, Lucie Thene, Sabine Billoré, Claire Chassagne, Caroline Camaré na David Metsu yenye kichwa “Analytical performance of Bühlmann fCAL® turbo assay on c503 Roche module for fecal calprotectin: validation for extended on-board stability”. Chanzo ni preprint na hakijapitia peer review; matokeo yanahitaji local validation na ufuatiliaji wa IQC/EQC.