Кайнатылган суу экстракты (boiled water extract, BWE) — жапайы тектүү күрөң Flammulina velutipes мөмө денесин ысык суу менен экстракциялоодон алынган жана бактериялык биоплёнкага таасири текшерилген чийки козу карын экстракты. Yui Nabetani, Kouji Kuramochi жана Yuuki Furuyama жүргүзгөн in vitro изилдөө BWE Staphylococcus aureus түзгөн биоплёнканы концентрацияга жараша азайтып, бактериянын өсүшүн баспаганын көрсөттү. Экстракт Cutibacterium acnes биоплёнкасын да азайтты. Демек, жапайы F. velutipes курамында бактерияны өлтүрбөстөн биоплёнкага таасир этүүчү компоненттер болушу мүмкүн.

Негизги айырма: биоплёнканын азайышы бактериялардын жок кылынышы менен түшүндүрүлбөйт. Colony-forming unit (CFU) өлчөөсүндө BWE менен иштетилген S. aureus культураларынын клетка концентрациясы төмөндөгөн эмес. Изилдөө классикалык бактерициддик ыкманын ордуна бактериянын бетке жабышуусу жана биоплёнка уюштуруусу сыяктуу жүрүм-турумун бутага алган non-bactericidal стратегияны көрсөтөт.

Активдүү молекула аныктала элек. Nuclear magnetic resonance (NMR) аны кант спирти болушу мүмкүн деп көрсөтөт, бирок түзүлүшү такталган эмес. Алгачкы жабышууну басуу же detergent-like таасир болжолдонгон; булар түз далилденген механизмдер эмес. Изилдөө лабораториялык, коопсуздук, клиникалык натыйжалуулук жана туруктуулук түз сыналган эмес.

Биоплёнка эмне үчүн маанилүү микробиологиялык бута?

Биоплёнка — микроорганизмдер бетке жабышып, полисахарид, белок жана extracellular DNA матриксинде уюшкан коомчулук. Ал бактерияларды стресстен коргоп, микробго каршы агенттердин таасирин азайтышы мүмкүн.

Staphylococcus aureus адам терисинде кездешүүчү оппортунисттик патоген. Катетерге, жасалма муунга жана медициналык түзмөктөргө жабышып биоплёнка түзүшү саламаттык сактоого байланышкан инфекцияларда чоң көйгөй.

Бактерияларды өлтүрүү гана жетишсиз болушу мүмкүн. Күчтүү антимикробдук басым туруктуу субпопуляцияларды тандай алгандыктан, бактериянын жашоосун толук токтотпой биоплёнка жүрүм-турумун бутага алуу өзүнчө багыт.

Бактерияны өлтүрбөстөн биоплёнканы азайтуу эмнени билдирет?

Жалпы тирүү бактериялар олуттуу азайбастан, алардын бетке байланышкан уюшкан матрикс түзүү жөндөмүн басууну билдирет. BWE менен S. aureus биоплёнка сигналы төмөндөп, CFU азайбаганы таасир жөнөкөй өсүү ингибициясы эмес экенин көрсөтөт.

Бул айырма эмне үчүн маанилүү?

Кошулма бактерияны өлтүрүп да, биоплёнканы азайтса, төмөндөө тирүү клеткалардын аздыгынан гана болушу мүмкүн. Анда биоплёнканын өзгөчө баскычына таасирин ажыратуу кыйын.

CFU көзөмөлү биоплёнканын азайышын өсүштүн басылышынан айырмалоого мүмкүндүк берет. Изилдөөнүн өзгөчө суроосу ушул.

Жапайы тектүү F. velutipes эмне үчүн тандалды?

Коммерциялык F. velutipes, башкача айтканда enoki, көбүнчө ак культивар. Yaseishu-enoki жапайы тоо популяциясынан келип, коммерциялык өндүрүшкө ылайыкташкан күрөң культивар.

Биоактивдүү профиль генетика, өстүрүү шарты жана жашоо чөйрөсүнө жараша өзгөрөт. Ошондуктан жапайы күрөң жана ак же башка өстүрүлгөн F. velutipes түрлөрүнүн таасири бирдей болбошу мүмкүн.

Кайсы козу карындар салыштырылды?

Кайнатылган суу экстракты кантип даярдалды?

Жапайы F. velutipes мөмө денесинин 15 g үлгүсү 500 mL Milli-Q сууга салынып, бир саат кайнатылып, No. 5B кагазынан чыпкаланган. Суюктук буулантуу менен коюуланып, кайра Milli-Q сууда эритилип, керектүү концентрацияларга келтирилген.

Кайсы бактериялар колдонулган?

Staphylococcus aureus NBRC 100910 NITE Biological Resource Center-ден алынып, LB agar же LB broth ичинде аэробдук 37 °Cде өстүрүлгөн.

Cutibacterium acnes JCM6245 RIKEN Bio Resource Research Center-ден алынып, Gifu anaerobic medium ичинде %10 CO2, %0,1 O2 шартында 37 °Cде өстүрүлгөн.

Биоплёнка тести кантип жүргүзүлгөн?

S. aureus алдын ала культурасы %1 глюкозалуу LBде OD600=0,2–0,3 болуу үчүн беш эсе суюлтулган. Глюкоза S. aureus биоплёнкасын колдогондуктан кошулган.

Ар шарттан 200 µL жалпак түптүү 96-well plateтин үч уячасына кошулган. Терс көзөмөл Milli-Q суу, оң көзөмөл 20 µg/mL ampicillin болгон. Пластиналар 37 °Cде үч күн анаэробдук инкубацияланган.

Crystal violet эмнени өлчөйт?

Ал уяча бетиндеги жалпы биоплёнка биомассасын боёп, боёкту эритип оптикалык абсорбансты өлчөйт. 595 nmдеги төмөн сигнал crystal-violet менен боёлуучу материал аз экенин билдирет.

Supernatant алынып, уячалар phosphate-buffered saline менен эки ирет жуулган. Биоплёнка 200 µL methanol менен 15 мүнөт фиксацияланып, 65 °Cде кургатылып, 150 µL %0,1 crystal violet менен 20 мүнөт боёлгон.

Андан кийин 200 µL %99,5 ethanol менен боёк эритилип, supernatantтын 100 µL жаңы пластинага өткөрүлүп, 595 nm өлчөнгөн.

Figure 1: Концентрация жогорулаганда эмне болду?

Figure 1де 10, 15 жана 30 mg/mL BWEде S. aureus биоплёнкасы көзөмөлгө караганда азайган. Уячадагы crystal violet азайышы концентрацияга жараша абсорбанстын төмөндөшүнө шайкеш.

10 mg/mLде төмөндөп, 15 жана 30 mg/mLде сигнал андан да төмөн болгон. Үчөө тең p<0,001.

Бул дозага көз каранды байланышты колдойт, бирок молекуланы аныктабайт.

Figure 2: Башка козу карындар ушундай таасир бердиби?

Жок. 10 mg/mLде жапайы күрөң F. velutipes BWEси ак жана Amashiyaki F. velutipes, ошондой эле P. ostreatus ve P. eryngii var. tuoliensis экстракттарына караганда төмөн абсорбанс көрсөткөн.

Бардык F. velutipes культиварларын бирдей фармакологиялык материал деп кароо туура эмес. Авторлор айырманы генетикалык тарых жана химиялык курам менен байланыштырат.

BWE чын эле антибактериялык эмес беле?

Изилденген S. aureus шартында BWE клетка тыгыздыгын азайткан эмес. Figure 3тө 2,5 mg/mL BWEнин CFUсу терс көзөмөлдөн төмөн эмес; азайыш өлтүрүү же өсүүнү токтотуу менен түшүндүрүлбөйт.

Өсүү эксперименти кантип жасалды?

S. aureus %1 глюкозалуу LBде 24 саат өстүрүлүп, экстракт же фракциялар кошулган; Milli-Q терс, 20 µg/mL ampicillin оң көзөмөл болгон.

37 °Cде 24 саат анаэробдук инкубациядан кийин OD600=0,1ге жөндөлүп, 10.000 эсе суюлтулуп, 50 µL үч LB agarга себилген. 37 °Cде 24 сааттан соң колониялар саналган.

Figure 3 captionында BWE 2,5 mg/mL деп берилген.

Эмне үчүн BWE тобунда CFU жогору көрүндү?

Аминокислота жана канттар S. aureus үчүн азык болушу мүмкүн деген автордук түшүндүрмө берилген; бул түз далилденген метаболизм механизми эмес.

C. acnes эксперименти эмне үчүн жасалды?

C. acnes тести таасир S. aureusга гана тиешелүүбү деп текшерди.

Figure 4тө 10, 15 жана 30 mg/mL BWE C. acnes сигналын күчтүү азайткан; үчөө тең p<0,001.

S. aureus жана C. acnes башка механизмдерди колдонгондуктан, эки түрдөгү ингибиция жалпы баскычка таасир этүү гипотезасын жараткан.

Активдүү кошулма кайсы молекула?

Химиялык кимдиги такталган эмес. Supplementary NMR sugar alcohol бар экенин көрсөтөт, бирок кайсынысы жана бир молекула бардык активдүүлүктү түшүндүрөбү — белгисиз.

NMR эмнени көрсөттү?

Supplementary материалда протон жана көмүртек NMR спектрлери берилип, sugar alcohol түзүлүшү болушу мүмкүн деп айтылган.

Supplementary материал:

• Figure S1 — 1H NMR, 400 MHz, MeOD,
• Figure S2 — Figure S1дин чоңойтулган 1H NMR аймагы,
• Figure S3 — 13C NMR, 100 MHz, MeOD

камтылган.

Xylitol менен бир молекулабы?

Xylitol белгилүү sugar-alcohol anti-biofilm мисалы гана; фракция xylitol экени көрсөтүлгөн эмес.

Xylitol адгезия гендерине таасир этип, метаболизмденбегендиктен антибактериялык болушу мүмкүн. Бирок жапайы F. velutipes BWEси S. aureus өсүшүн баскан эмес.

Демек, процесс белгилүү antibacterial sugar alcohol механизмдеринен айырмаланышы мүмкүн.

BWE биоплёнканы кайсы механизм менен тосушу мүмкүн?

Так механизм аныкталган эмес. Эки мүмкүнчүлүк: алгачкы жабышууну токтотуу же detergent-like физика-химиялык таасир; келечекте текшерилиши керек.

Алгачкы бетке жабышуу гипотезасы

Эрте баскыч — бактериянын бетке байланышы. BWE адгезияны азайтса, бактерия көбөйсө да туруктуу биоплёнка түзө албайт.

Бул түз адгезия тести менен өлчөнгөн эмес.

Detergent-like таасир гипотезасы

Компоненттер беттин касиеттерин же клетка–матрикс аракетин өзгөртүп, топтолууну бузушу мүмкүн.

Бул болжол гана; беттик чыңалуу, мембрана же detergent активдүүлүгү түз сыналган эмес.

Изилдөөнүн ыкмасы жана жыйынтыктары

Эксперименттин жалпы агымы

1. Жапайы күрөң F. velutipes ысык сууда экстракцияланды.
2. BWE ар концентрацияга жөндөлдү.
3. S. aureus %1 глюкозалуу чөйрөдө биоплёнка үчүн инкубацияланды.
4. Таасир crystal violet менен өлчөндү.
5. Ар башка F. velutipes культиварлары жана козу карындар салыштырылды.
6. CFU өсүү ингибициясын текшерди.
7. C. acnes менен экинчи biofilm-forming түр текшерилди.
8. NMR химиялык класска алдын ала түзүлүштүк белги берди.

Негизги параметрлер

Figure 1 жыйынтыгы

Чийки абсорбанс сандары берилбегендиктен Verianla графиктен жасалма так маанилерди чыгарбайт.

Figure 2 жыйынтыгы

10 mg/mLде жапайы F. velutipes экстракты башка F. velutipes культиварларынан жана эки Pleurotus түрүнөн төмөн болгон.

Figure 2де жапайы F. velutipes тобу p<0,01, Ampicillin p<0,001 менен белгиленген.

Figure 3 жыйынтыгы

CFU активдүүлүк бактерициддик эмес экенин баалаган. 2,5 mg/mL BWE S. aureus концентрациясын азайткан эмес.

CFU терс көзөмөлдөн жогору; бул азык компоненттери менен түшүндүрүлөт, бирок далилденген механизм эмес.

Figure 4 жыйынтыгы

C. acnes үчүн 10, 15 жана 30 mg/mL топторунун сигналы төмөн жана p<0,001.

Статистикалык талдоо

Орточо ± стандарттык четтөө; көпчүлүк эксперимент үч кайталоо.

Dunnett тести көзөмөл үчүн, Tukey–Kramer Duplicate үлгүлөр үчүн колдонулган. Microsoft Office Excel жана R version 4.0.2.

Изилдөө колдогон жыйынтыктар

• Жапайы күрөң F. velutipes BWEси S. aureus биоплёнкасын азайткан.
• S. aureus үчүн 10–30 mg/mL концентрацияга көз каранды таасир болгон.
• Жапайы культивар күчтүүрөөк болгон.
• BWE CFU шартында S. aureus өсүшүн азайткан эмес.
• Азайуу өсүү ингибициясы эмес.
• BWE C. acnes биоплёнкасын да азайткан.
• NMR sugar alcohol болушу мүмкүн дейт.

Изилдөө колдобогон жыйынтыктар

• Так химиялык түзүлүш аныкталган эмес.
• Xylitol экени көрсөтүлгөн эмес.
• Жабышуу же detergent-like механизм далилденген эмес.
• Адамда инфекцияны алдын алары көрсөтүлгөн эмес.
• Түзмөк каптамасы катары коопсуз/натыйжалуу эмес.
• Уулуулук жана биоылайыктуулук текшерилген эмес.
• Туруктуулукту азайтуу өлчөнгөн эмес.
• Бардык түргө жайылары көрсөтүлгөн эмес.
• Жегенге жарактуулук медициналык коопсуздукту далилдебейт.

Негизги ыкмалык чектөөлөр

Эки бактерия менен лабораторияда гана жасалган; чыныгы ткань, имплант же көп түрлүү жамаатты толук чагылдырбайт.

Активдүү кошулма белгисиз; таасир бир молекулага, аралашмага же физика-химиялык касиетке байланыштуубу — белгисиз.

Adhesion genes, quorum sensing, extracellular matrix, беттик чыңалуу жана мембрана механизмдери сыналган эмес.

Crystal violet жалпы биомассаны өлчөйт, тирүү/өлүү клетка жана extracellular matrixти айырмалабайт.

CFU өсүү сакталганын көрсөтөт; узак адаптация жана туруктуулук эволюциясы изилденген эмес.

Клетка уулуулугу, жаныбар модели, адамдык текшерүү жок.

Келечектеги изилдөөлөр

Кошулмаларды химиялык аныктоо жана механизмди белгилөө керек.

Клиникага же түзмөккө өтүү үчүн биоылайыктуулук, уулуулук, клиникалык штаммдар, mature biofilm жана чыныгы беттерде текшерүү керек; булар азыркы макаланын жыйынтыгы эмес.

Булак жана ыкма жөнүндө эскертүү

Түпнуска аталышы: Boiled Water Extract of Wild-Derived Flammulina velutipes Inhibits Biofilm Formation by Staphylococcus aureus Without Bactericidal Effects

Авторлор: Yui Nabetani; Kouji Kuramochi; Yuuki Furuyama.

Corresponding author: Yuuki Furuyama.

Мекеме: Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Science, 2641 Yamazaki, Noda 278-8519, Chiba, Japan.

Журнал: Acta Microbiologica Hellenica.

Басмачы: MDPI, Hellenic Society for Microbiology атынан.

Библиографиялык жазуу: Acta Microbiol. Hell. 2026, Volume 71, Article 25.

DOI: 10.3390/amh71030025

Жарыяланган күнү: 15-июль 2026.

Редакциялык даталар: Received 17 June 2026; Revised 8 July 2026; Accepted 14 July 2026.

Булак түрү: Рецензияланган Brief Report; in vitro микробиология жана табигый продукт изилдөөсү.

Лицензия: Creative Commons Attribution (CC BY).

Негизги материал: Жапайы күрөң Flammulina velutipes, Yaseishu-enoki.

Негизги микроорганизм:Staphylococcus aureus NBRC 100910.

Экинчи микроорганизм:Cutibacterium acnes JCM6245.

Экстракция: 15 g козу карын + 500 mL Milli-Q суу; 1 саат кайнатуу; чыпкалоо жана буулантуу.

Биоплёнка өлчөмү: Crystal violet staining; абсорбанс 595 nm.

Өсүү өлчөмү: Colony-forming unit эсептөө.

Оң көзөмөл: Ampicillin, 20 µg/mL.

Статистика: Орточо ± стандарттык четтөө; Dunnett жана Tukey–Kramer; Microsoft Office Excel жана R 4.0.2.

Supplementary материал: Supplementary Methods; Figure S1 жана S2, 1H NMR 400 MHz MeOD; Figure S3, 13C NMR 100 MHz MeOD.

Каржылоо: JSPS KAKENHI, grant number 22K14814.

Institutional Review Board: Not applicable.

Informed Consent: Not applicable.

Маалымат жеткиликтүүлүгү: Маалымат жарыяланган макалада экендиги айтылган.

Ыраазычылык: Shinko Industrial козу карындарды бергендиги үчүн белгиленген.

Кызыкчылык кагылышы: Авторлор кагылыш жок дешкен.

Авторлордун салымы: Yui Nabetani: Writing—original draft жана Methodology; Kouji Kuramochi: Writing—review and editing жана Supervision; Yuuki Furuyama: Writing—review and editing, Conceptualization жана Project administration.

Негизги чечмелөө чеги: Бул in vitro лабораториялык эксперимент. BWE биоплёнканы азайткан, бирок молекула жана механизм так эмес, адам/жаныбар коопсуздугу жана клиникалык алдын алуу же дарылоо көрсөтүлгөн эмес.