Qaynadılmış su ekstraktı (boiled water extract, BWE), vəhşi mənşəli qəhvəyi Flammulina velutipes meyvə cisminin isti su ilə ekstraksiya edilməsi nəticəsində alınan və bu tədqiqatda bakterial biofilm yaranmasına təsiri yoxlanılan xam göbələk ekstraktıdır. Yui Nabetani, Kouji Kuramochi və Yuuki Furuyama-nın in vitro tədqiqatı BWE-nin Staphylococcus aureus tərəfindən yaradılan biofilmi konsentrasiyadan asılı şəkildə nəzərəçarpacaq dərəcədə azalda bildiyini, lakin bakterial böyüməni basqılamadığını göstərmişdir. Ekstrakt həmçinin Cutibacterium acnes biofilm yaranmasını da azaltmışdır. Buna görə mənbə vəhşi mənşəli F. velutipes daxilində bakteriyanı birbaşa öldürmədən biofilm inkişafına təsir edən komponentin və ya komponentlərin ola biləcəyini göstərir.

Tədqiqatın mərkəzindəki fərq mühümdür: biofilm miqdarının azalması bakteriyaların aradan qaldırılması ilə izah edilmir. Colony-forming unit (CFU) ölçümündə BWE ilə işlənmiş S. aureus kulturlarının hüceyrə konsentrasiyası azalmamışdır. Buna görə tədqiqat klassik bakterisid yanaşma əvəzinə bakteriyaların səthə yapışması və biofilm təşkilatlanması kimi davranışlarını hədəfləyə bilən non-bactericidal strategiya ehtimalına işarə edir.

Bununla belə, aktiv molekul hələ müəyyən edilməyib. Nuclear magnetic resonance (NMR) analizləri aktiv komponentin şəkər spirti ola biləcəyini düşündürür, lakin kimyəvi quruluş dəqiqləşdirilmir. Mexanizmin ilkin səthə yapışmanın basqılanması və ya detergent-like təsirlə əlaqəli ola biləcəyi irəli sürülür; bunlar birbaşa mexanistik olaraq sübut edilmiş nəticələr deyil. Tədqiqat laboratoriya miqyasındadır və təhlükəsizlik, klinik effektivlik və ya antimikrob müqavimətin inkişafı birbaşa yoxlanılmayıb.

Biofilm niyə mühüm mikrobioloji hədəfdir?

Biofilm mikroorqanizmlərin səthə yapışaraq polisaxaridlər, zülallar və extracellular DNA kimi komponentlərdən ibarət matriks daxilində təşkil olunduğu icma quruluşudur. Bu quruluş bakteriyaları ətraf mühit streslərindən qoruya və antimikrob agentlərin effektivliyini azalda bilər.

Staphylococcus aureus insan dərisində mövcud ola bilən opportunist patogendir. Onun kateter, süni oynaq və digər tibbi cihaz səthlərinə yapışaraq biofilm yarada bilməsi səhiyyə xidməti ilə əlaqəli infeksiyalarda mühüm problem təşkil edir.

Biofilmdəki bakteriyalara nəzarət üçün yalnız bakteriyaları öldürmək kifayət etməyə bilər. Güclü antimikrob təzyiq davamlı alt populyasiyaları seçə bildiyi üçün bakterial həyatı tam dayandırmadan biofilm davranışını hədəfləyən yanaşmalar ayrıca tədqiqat sahəsidir.

Bakteriyanı öldürmədən biofilm yaranmasını azaltmaq nə deməkdir?

Bu, ümumi canlı bakteriya sayı nəzərəçarpacaq dərəcədə azalmadan bakteriyaların səthə bağlı təşkilatlanmış matriks yaratma qabiliyyətinin basqılanması deməkdir. Bu tədqiqatda BWE ilə S. aureus biofilm siqnalı azalarkən CFU sayının azalmaması anti-biofilm təsirin sadə böyümə inhibisiyası ilə izah edilə bilmədiyini göstərir.

Bu fərq tədqiqat baxımından niyə mühümdür?

Birləşmə həm bakteriyanı öldürür, həm də biofilmi azaldırsa, biofilmdəki azalma yalnız canlı hüceyrələrin sayının azalmasından qaynaqlana bilər. Bu halda birləşmənin biofilm yaranmasının xüsusi mərhələsinə həqiqətən təsir edib-etmədiyini ayırmaq çətinləşir.

Bu tədqiqatda CFU nəzarətinin ayrıca aparılması biofilm azalmasını bakterial böyümənin basqılanmasından ayırmağa imkan verir. Tədqiqatın orijinal elmi sualı da məhz burada ortaya çıxır.

Vəhşi mənşəli F. velutipes niyə seçildi?

Kommersiya F. velutipes, yəni enoki göbələyi əsasən ağ kultivarlarla tanınır. Bu tədqiqatda istifadə edilən Yaseishu-enoki isə təbii dağ mühitindəki vəhşi populyasiyadan mənşələnmiş, sonra kommersiya istehsalına uyğunlaşdırılmış qəhvəyi kultivardır.

Göbələklərin bioaktiv birləşmə profili genetik əsas, yetişdirmə şəraiti və habitat kimi dəyişənlərdən təsirlənə bilər. Buna görə tədqiqatçılar vəhşi mənşəli qəhvəyi kultivarla ağ və digər yetişdirilən F. velutipes növlərinin bioloji təsirlərinin eyni olmaya biləcəyini qiymətləndirmişlər.

Tədqiqatda hansı göbələklər müqayisə edildi?

Qaynadılmış su ekstraktı necə hazırlandı?

Vəhşi mənşəli F. velutipes meyvə cismindən 15 g nümunə 500 mL Milli-Q suya əlavə edilmişdir. Qarışıq bir saat qaynadılmış, sonra No. 5B filtr kağızından keçirilmişdir. Filtrasiya olunmuş maye buxarlandırma ilə qatılaşdırılmış və alınan ekstrakt yenidən Milli-Q suda həll edilərək təcrübədə tələb olunan konsentrasiyalara uyğunlaşdırılmışdır.

Hansı bakteriyalardan istifadə edildi?

Staphylococcus aureus NBRC 100910 NITE Biological Resource Center-dan əldə edilmişdir. Bakteriya LB agar və ya LB broth-da aerob şəraitdə 37 °C-də yetişdirilmişdir.

Cutibacterium acnes JCM6245 isə RIKEN Bio Resource Research Center-dan təmin edilmiş və Gifu anaerobic medium-da %10 CO2, %0,1 O2 olan anaerob şəraitdə 37 °C-də kultivasiya edilmişdir.

Biofilm sınağı necə aparıldı?

S. aureus ilkin kulturu %1 qlükoza olan LB mühitində OD600=0,2–0,3 olacaq şəkildə beş dəfə durulaşdırılmışdır. Qlükoza S. aureus biofilm yaranmasını dəstəklədiyi üçün təcrübə mühitinə xüsusi olaraq əlavə edilmişdir.

Hər şəraitdən 200 µL yastı dibli 96-well plate-in üç quyucuğuna əlavə edilmişdir. Mənfi nəzarətdə Milli-Q su, müsbət nəzarətdə son konsentrasiyası 20 µg/mL olan ampicillin istifadə edilmişdir. Lövhələr 37 °C-də üç gün anaerob şəraitdə inkubasiya edilmişdir.

Crystal violet metodu nəyi ölçür?

Crystal violet sınağı quyucuq səthinə bağlanmış ümumi biofilm biokütləsini boyayan, sonra boyanı həll edib optik absorbansı ölçən metoddur. Bu tədqiqatda absorbans 595 nm-də ölçülmüş; daha aşağı siqnal quyucuq səthinə yapışmış daha az crystal-violet ilə boyana bilən biofilm materialını göstərmişdir.

İnkubasiyadan sonra supernatant uzaqlaşdırılmış və quyucuqlar iki dəfə phosphate-buffered saline ilə yuyulmuşdur. Biofilm 200 µL methanol ilə 15 dəqiqə fiksasiya edilmiş və 65 °C-də qurudulmuşdur. Sonra 150 µL %0,1 crystal violet əlavə edilərək 20 dəqiqə boyama aparılmışdır.

Yuyulduqdan sonra quyucuqlara 200 µL %99,5 ethanol əlavə edilmiş, boya pipetləmə ilə həll edilmiş və supernatantın 100 µL-i yeni lövhəyə köçürülərək 595 nm absorbansı ölçülmüşdür.

Figure 1: Konsentrasiya artdıqca nə baş verdi?

Mənbədəki Figure 1, 10, 15 və 30 mg/mL BWE şəraitində S. aureus biofilm yaranmasının nəzarət qrupuna nisbətən azaldığını göstərir. Vizual quyucuqlarda crystal violet intensivliyinin BWE ilə aydın azalması absorbans qrafikindəki konsentrasiyadan asılı enişlə uyğundur.

10 mg/mL şəraitində biofilm nəzarətdən aşağı qalmış; 15 və 30 mg/mL şəraitində crystal violet siqnalı daha aşağı səviyyələrə enmişdir. Üç konsentrasiyanın nəzarətlə müqayisəsi mənbədə p<0,001 ilə işarələnmişdir.

Bu qrafik dozadan asılı anti-biofilm əlaqəni dəstəkləyir, lakin BWE-də hansı molekulun bu davranışı yaratdığını göstərmir.

Figure 2: Digər göbələklər eyni təsiri göstərdimi?

Xeyr. 10 mg/mL ekstrakt müqayisəsində vəhşi mənşəli qəhvəyi F. velutipes BWE-si ağ və Amashiyaki F. velutipes ekstraktları ilə yanaşı P. ostreatus ve P. eryngii var. tuoliensis ekstraktlarından da daha aşağı biofilm absorbansı göstərmişdir.

Bu nəticə bütün F. velutipes kultivarlarını eyni farmakoloji material kimi qiymətləndirməyin düzgün olmadığını göstərir. Müəlliflər fərqi ekstraksiya metodundan çox kultivarın genetik keçmişi və kimyəvi tərkib fərqləri ilə əlaqələndirirlər.

BWE həqiqətən antibakterial deyildimi?

Tədqiq edilən S. aureus şəraitində BWE bakterial hüceyrə sıxlığını azaltmamışdır. Figure 3-də 2,5 mg/mL BWE ilə işlənmiş kulturun CFU dəyəri mənfi nəzarətdən aşağı deyil; buna görə müşahidə edilən biofilm azalması bakteriyaların birbaşa öldürülməsi və ya böyümənin dayandırılması ilə izah olunmur.

Böyümə təcrübəsi necə aparıldı?

S. aureus %1 qlükoza olan LB mühitində 24 saat ilkin kultivasiya edilmişdir. Ekstrakt və ya aktiv fraksiyalar kultura əlavə edilmiş; Milli-Q su mənfi nəzarət və 20 µg/mL ampicillin müsbət nəzarət kimi istifadə edilmişdir.

Nümunələr 37 °C-də 24 saat anaerob inkubasiya edilmişdir. Kultur bulanıqlığı OD600=0,1 olana qədər tənzimləndikdən sonra suspenziya 10.000 dəfə durulaşdırılmış və hər nümunədən 50 µL üç ayrı LB agar lövhəsinə yayılmışdır. Lövhələr 37 °C-də 24 saat inkubasiya edilmiş və yaranan koloniyalar sayılmışdır.

Figure 3-ün caption hissəsində bu böyümə müqayisəsi üçün istifadə olunan BWE konsentrasiyası 2,5 mg/mL kimi verilir.

BWE qrupunda CFU niyə daha yüksək göründü?

Mənbə müəllifləri BWE-dəki amin turşuları və şəkərlərin S. aureus tərəfindən qida mənbəyi kimi istifadə edilə bilməsinin daha yüksək hüceyrə konsentrasiyasını izah edə biləcəyini irəli sürürlər. Bu, birbaşa metabolik mexanizm təcrübəsi ilə göstərilmiş nəticə deyil, müşahidəyə dair müəllif şərhidir.

C. acnes təcrübəsi niyə aparıldı?

C. acnes sınağı BWE-nin anti-biofilm təsirinin yalnız S. aureus-a xas olub-olmadığını araşdırmaq üçün aparılmışdır.

Mənbədəki Figure 4-də 10, 15 və 30 mg/mL BWE-nin C. acnes crystal-violet biofilm siqnalını nəzarət qrupuna nisbətən güclü şəkildə azaltdığı görünür. Hər üç konsentrasiya p<0,001 ilə işarələnmişdir.

S. aureus ilə C. acnes müxtəlif biofilm mexanizmlərindən istifadə etdiyi üçün hər iki növdə inhibisiyanın görülməsi ekstraktın biofilm inkişafının daha ümumi mərhələsinə təsir edə biləcəyi hipotezini doğurmuşdur.

Aktiv birləşmə hansı molekuldur?

Bu tədqiqat aktiv birləşmənin kimyəvi kimliyini qəti müəyyən etməmişdir. Supplementary NMR analizləri aktiv fraksiyada sugar alcohol olduğunu düşündürür; lakin hansı şəkər spirtinin aktivliyə cavabdeh olduğu və ya tək molekulun bütün aktivliyi izah edib-etmədiyi göstərilməmişdir.

NMR nə göstərdi?

Supplementary materialda aktiv fraksiyanın proton və karbon NMR spektrləri təqdim edilmişdir. Məqalə mətnində bu analizlərin birləşmənin sugar alcohol quruluşuna malik ola biləcəyinə işarə etdiyi bildirilir.

Mənbə supplementary material daxilində:

• Figure S1 — 1H NMR, 400 MHz, MeOD,
• Figure S2 — Figure S1-in böyüdülmüş 1H NMR sahəsi,
• Figure S3 — 13C NMR, 100 MHz, MeOD

olduğunu bildirir.

Xylitol ilə eyni molekuldurmu?

Mənbə xylitolü yalnız məlum sugar-alcohol anti-biofilm nümunəsi kimi müzakirə edir. Tədqiqatdakı aktiv fraksiyanın xylitol olduğu göstərilməmişdir.

Xylitol bəzi bakteriyalarda polisaxarid vasitəli adeziya ilə əlaqəli genlərə təsir edə və bakteriyalar tərəfindən metabolizə edilə bilmədiyi üçün əlavə antibakterial xüsusiyyət göstərə bilər. Buna qarşılıq bu tədqiqatın vəhşi mənşəli F. velutipes BWE-si S. aureus böyüməsini basqılamamışdır.

Bu fərq mənbədəki aktiv birləşmənin məlum antibacterial sugar alcohol mexanizmlərindən fərqli proseslə işləyə biləcəyini düşündürür.

BWE biofilm yaranmasını hansı mexanizmlə əngəlləyə bilər?

Tədqiqat dəqiq molekulyar mexanizmi müəyyən etməyib. Müəlliflərin müzakirə etdiyi iki əsas ehtimal ekstraktın bakteriyaların ilkin səthə yapışmasını əngəlləməsi və ya biofilm yaranmasını detergent-like fiziki-kimyəvi təsirlə pozmasıdır; hansı mexanizmin keçərli olduğu gələcək təcrübələrlə təsdiqlənməlidir.

İlkin səthə yapışma hipotezi

Biofilm yaranmasının erkən mərhələlərindən biri bakteriyaların səthə ilkin bağlanmasıdır. BWE bu adeziya mərhələsini azaldırsa, bakteriya çoxala bilər, lakin səthdə sabit biofilm quruluşu yaratmaqda çətinlik çəkə bilər.

Bu mexanizm tədqiqatda birbaşa adeziya sınağı ilə ölçülməmişdir.

Detergent-like təsir hipotezi

Alternativ izah BWE-dəki komponentlərin səth xüsusiyyətlərini və ya hüceyrə–matriks qarşılıqlı təsirlərini fiziki-kimyəvi olaraq dəyişdirərək biofilm toplanmasını pozmasıdır.

Mənbə bunu mümkün izah kimi göstərir; səth gərginliyi, membran quruluşu və ya detergent aktivliyi üçün birbaşa təcrübə aparılmayıb.

Tədqiqatın metodu və nəticələri

Eksperimental dizaynın ümumi axını

1. Vəhşi mənşəli qəhvəyi F. velutipes isti suda ekstraksiya edildi.
2. BWE müxtəlif konsentrasiyalara uyğunlaşdırıldı.
3. S. aureus %1 qlükoza olan mühitdə biofilm yaradacaq şəkildə inkubasiya edildi.
4. BWE-nin biofilmə təsiri crystal violet ilə ölçüldü.
5. Müxtəlif F. velutipes kultivarları və digər göbələklərlə müqayisə aparıldı.
6. CFU sınağı ilə biofilm azalmasının bakterial böyümə inhibisiyasından qaynaqlanıb-qaynaqlanmadığı yoxlanıldı.
7. C. acnes vasitəsilə təsirin ikinci biofilm-forming növdə olub-olmadığı araşdırıldı.
8. NMR aktiv fraksiyanın kimyəvi sinfi haqqında ilkin struktur ipucu verdi.

Əsas eksperimental parametrlər

Figure 1 nəticəsi

Mənbə xam rəqəmsal absorbans dəyərlərini mətn daxilində cədvəl şəklində vermədiyi üçün Verianla qrafikdən saxta dəqiqliklə qəti dəyərlər yaratmır.

Figure 2 nəticəsi

10 mg/mL müqayisəsində vəhşi mənşəli F. velutipes ekstraktının biofilm siqnalı digər F. velutipes kultivarları və iki Pleurotus növündən aşağıdır.

Figure 2-də vəhşi mənşəli F. velutipes qrupu nəzarət müqayisəsində p<0,01 ilə işarələnmişdir. Ampicillin müsbət nəzarətində p<0,001 görülür.

Figure 3 nəticəsi

CFU sınağı anti-biofilm aktivliyin bakterisid təsirdən qaynaqlanmadığını qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir. 2,5 mg/mL BWE S. aureus hüceyrə konsentrasiyasını azaltmamışdır.

Qrafikdə BWE qrupunun CFU dəyəri mənfi nəzarətdən yüksəkdir; müəlliflər bunu ekstraktdakı qidalı komponentlərin istifadə oluna bilməsi ilə əlaqələndirirlər. Bu izah təsdiqlənmiş metabolizm mexanizmi deyil.

Figure 4 nəticəsi

C. acnes biofilm təcrübəsində 10, 15 və 30 mg/mL BWE qruplarının hamısında crystal-violet siqnalı nəzarət qrupundan aydın şəkildə aşağıdır və mənbədə hər üç şərait p<0,001 kimi işarələnib.

Statistik təhlil

Eksperimental nəticələr orta ± standart sapma kimi bildirilmişdir. Əksər təcrübələr üç təkrar üzərindən aparılmışdır.

Eksperimental nümunələrin nəzarətlə müqayisəsi üçün Dunnett testi istifadə edilmişdir. Duplicate nümunələrin müqayisəsində Tukey–Kramer testi tətbiq edilmişdir. Təhlillər Microsoft Office Excel və R version 4.0.2 ilə aparılmışdır.

Tədqiqatın dəstəklədiyi nəticələr

• Vəhşi mənşəli qəhvəyi F. velutipes BWE-si S. aureus biofilm yaranmasını azaltmışdır.
• S. aureus üzərində anti-biofilm təsir 10–30 mg/mL aralığında konsentrasiyadan asılı nümunə göstərmişdir.
• Vəhşi mənşəli kultivar sınaqdan keçirilən digər göbələk ekstraktlarından daha güclü anti-biofilm aktivliyi göstərmişdir.
• BWE istifadə olunan CFU sınaq şəraitində S. aureus böyüməsini azaltmamışdır.
• Biofilm azalması birbaşa bakterial böyümə inhibisiyası ilə izah edilə bilmir.
• BWE həmçinin C. acnes biofilm yaranmasını azaltmışdır.
• NMR nəticələri aktiv birləşmənin sugar alcohol ola biləcəyini düşündürür.

Tədqiqatın dəstəkləmədiyi nəticələr

• Aktiv molekulun dəqiq kimyəvi quruluşu müəyyən edilməmişdir.
• Aktiv birləşmənin xylitol olduğu göstərilməmişdir.
• İlkin səthə yapışma və ya detergent-like təsir mexanizmi birbaşa sübut edilməmişdir.
• BWE-nin insanlarda biofilm infeksiyalarının qarşısını aldığı göstərilməmişdir.
• Tibbi cihaz örtüyü kimi təhlükəsiz və ya effektiv olduğu göstərilməmişdir.
• İnsan hüceyrələrinə toksiklik və ya biouyğunluq sınaqdan keçirilməmişdir.
• Biofilm nəzarətinin antimikrob müqavimətin inkişafını həqiqətən azaltdığı birbaşa ölçülməmişdir.
• Təsirin bütün bakteriya və ya göbələk növlərinə yayıldığı göstərilməmişdir.
• Yeyilə bilən göbələkdən alınması təkbaşına tibbi istifadə təhlükəsizliyini sübut etmir.

Əsas metodoloji məhdudiyyətlər

Tədqiqat yalnız laboratoriya şəraitində iki bakteriya növü üzərində aparılmışdır. Biofilm arxitekturası real toxuma, implant və ya xroniki infeksiya mühitindəki çoxnövlü mikrob icmalarını tam təmsil etmir.

Aktiv birləşmə kimyəvi cəhətdən dəqiq müəyyən edilməyib. Buna görə müşahidə olunan təsirin bir molekula, bir neçə komponentin birgə təsirinə və ya ekstraktın fiziki-kimyəvi xüsusiyyətlərinə bağlı olduğu bilinmir.

Molekulyar mexanizm birbaşa ölçülməyib. Adhesion genes, quorum sensing, extracellular matrix istehsalı, səth gərginliyi və ya membran təsiri üçün mexanistik təcrübələr aparılmayıb.

Biofilm ölçümü crystal violet metodu ilə aparılmışdır. Bu metod ümumi səthə bağlı biofilm biokütləsini göstərmək üçün faydalıdır, lakin canlı hüceyrələri, ölü hüceyrələri və extracellular matrix komponentlərini bir-birindən ayırmır.

CFU təcrübəsi bakterial böyümənin qorunduğunu göstərir; buna baxmayaraq uzunmüddətli fizioloji uyğunlaşma və ya müqavimət təkamülü araşdırılmayıb.

Tədqiqatda hüceyrə toksikliyi, heyvan modeli və ya insan klinik təsdiqi yoxdur.

Gələcək tədqiqatlar

Mənbənin birbaşa ehtiyac kimi göstərdiyi iki əsas mərhələ aktiv birləşmənin və ya birləşmələrin kimyəvi müəyyənləşdirilməsi və anti-biofilm mexanizminin təyin edilməsidir.

Sonrakı tədqiqatlarda mənbə nəticələrinin klinik və ya cihaz tətbiqinə daşına bilməsi üçün biouyğunluq, toksiklik, müxtəlif klinik ştammlar, mature biofilm modelləri və real material səthlərində ayrıca təsdiqləmə tələb olunur; bunlar cari məqalənin nəticələri deyil, translasiya üçün zəruri növbəti təsdiqləmə mərhələləridir.

Mənbə və metod qeydi

Orijinal başlıq: Boiled Water Extract of Wild-Derived Flammulina velutipes Inhibits Biofilm Formation by Staphylococcus aureus Without Bactericidal Effects

Müəlliflər: Yui Nabetani; Kouji Kuramochi; Yuuki Furuyama.

Corresponding author: Yuuki Furuyama.

Qurum: Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Science, 2641 Yamazaki, Noda 278-8519, Chiba, Japan.

Jurnal: Acta Microbiologica Hellenica.

Nəşriyyat: MDPI, Hellenic Society for Microbiology adından.

Biblioqrafik qeyd: Acta Microbiol. Hell. 2026, Volume 71, Article 25.

DOI: 10.3390/amh71030025

Nəşr tarixi: 15 iyul 2026.

Redaksiya tarixləri: Received 17 June 2026; Revised 8 July 2026; Accepted 14 July 2026.

Mənbə növü: Resenziyalı Brief Report; in vitro mikrobiologiya və təbii məhsul tədqiqatı.

Lisenziya: Creative Commons Attribution (CC BY).

Əsas eksperimental material: Vəhşi mənşəli qəhvəyi Flammulina velutipes, Yaseishu-enoki.

Əsas mikroorqanizm:Staphylococcus aureus NBRC 100910.

İkinci mikroorqanizm:Cutibacterium acnes JCM6245.

Ekstraksiya: 15 g göbələk + 500 mL Milli-Q su; 1 saat qaynatma; filtrasiya və buxarlandırma ilə qatılaşdırma.

Biofilm ölçümü: Crystal violet staining; absorbans 595 nm.

Böyümə ölçümü: Colony-forming unit sayımı.

Müsbət nəzarət: Ampicillin, 20 µg/mL.

Statistika: Orta ± standart sapma; Dunnett testi və Tukey–Kramer testi; Microsoft Office Excel və R 4.0.2.

Supplementary material: Supplementary Methods; Figure S1 və S2, 1H NMR 400 MHz MeOD; Figure S3, 13C NMR 100 MHz MeOD.

Maliyyələşdirmə: JSPS KAKENHI, grant number 22K14814.

Institutional Review Board: Not applicable.

Informed Consent: Not applicable.

Məlumatların əlçatanlığı: Tədqiqatda yaradılan və təhlil edilən məlumatların dərc olunmuş məqalədə yer aldığı bildirilmişdir.

Təşəkkür: Shinko Industrial tədqiqatda istifadə olunan göbələklərin təmin edilməsinə görə təşəkkür bölməsində qeyd edilmişdir.

Maraqlar toqquşması: Müəlliflər maraqlar toqquşmasının olmadığını bəyan etmişlər.

Müəllif töhfələri: Yui Nabetani: Writing—original draft və Methodology; Kouji Kuramochi: Writing—review and editing və Supervision; Yuuki Furuyama: Writing—review and editing, Conceptualization və Project administration.

Əsas şərh sərhədi: Tədqiqat in vitro laboratoriya təcrübəsidir. BWE-nin biofilmi azaldan təsiri göstərilsə də, aktiv molekul və mexanizm dəqiqləşdirilməmiş, insan və ya heyvan təhlükəsizliyi qiymətləndirilməmiş, klinik biofilm infeksiyalarının qarşısının alınması və ya müalicəsi göstərilməmişdir.