Өнөкөт бөйрөк бейтаплыгынын мененрлейерек бөйрөк йетмезлигине дөнүшмесинде ортак сон йолаклардан бири бөйрөк фиброзидир. Фиброз сырасында нормал бөйрөк докусунун йерини гидерек коллажен жана дигер клетка дышы матрикс бмененшенлери алыр; ишлевсел доку мимариси бозулур жана бөбрегин чыпкалоо жөндөмү азалыр. Бул мөөнөтч болгону фибробластларын ашыры изилдөөсыйла ачыкланамаз. Хүжресел метаболизм, бөйрөк түбүл клеткалары, иммунитет клеткалары жана сезгенүүчүл синйаллер бирбирини беслейен бир микроайлана олуштурур.

Инжеленен изилдөө, өнөкөт бөйрөк хасарында метаболик өзгөримин насыл узак мөөнөтли бир иммунитет йанытына жана фиброзе дөнүштүгүнү ачыклайан бир меканизма өнермектедир. Изилдөөжылара боюнча хасарлы бөйрөкте гексозамин биосинтез жолу, йани HBP еткинлешмекте жана клетка үчүнде UDP-GlcNAc үретимини артырмактадыр. UDP-GlcNAc, протеинлере О-баглы Н-асетилглукозамин екленмеси үчүн кулланылан темел субстраттыр.

Изилдөөнын өнердиги генел меканизма шу шекилде өзетленебилир:

\[ \mathrm{HBP}\uparrow \rightarrow \mathrm{UDP\!-\!GlcNAc}\uparrow \rightarrow \mathrm{STAT3\!-\!T717\ O\!-\!GlcNAc}\uparrow \rightarrow \mathrm{SMURF1\ bağlanması}\downarrow \rightarrow \mathrm{STAT3\ yıkımı}\downarrow \]

\[ \mathrm{STAT3\ kararlılığı}\uparrow \rightarrow \mathrm{CXCL10}\uparrow \rightarrow \mathrm{CD4^+\ T\ hücresi\ göçü}\uparrow \rightarrow \mathrm{Th17/IL\!-\!17A}\uparrow \rightarrow \mathrm{böbrek\ fibrozisi}\uparrow \]

Изилдөөда инсан өнөкөт бөйрөк бейтаплыгы маалыматлеринде OGT жана OGA експресйонунда белиргин өзгөрүүлик гөрүлмезкен HBP’нин темел ферментлери олан GFPT1, GNPNAT1, PGM3 жана UAP1’ин арттыгы кабарланган. Инсан бөйрөк бийопсмененринде жана ики айры чычкан модельинде генел протеин O-GlcNAc деңгээллеринин йүкселдиги көзленмиштир.

Фарелерде кулланылан ики фиброз модельи шунлардыр:

• Үретерин багланмасыйла олуштурулан тек тарафлы үретер обстрүксийону модельи — UUO
• 250 мг/кг фолик асит енжексийонуйла олуштурулан фолик асит нефропатиси модельи — ФА

HBP’нин хыз сынырлайыжы ферменти GFPT1’и баскыламак амажыйла кулланылан DON, чычкан бөйрөклеринде O-GlcNAc деңгээлини азалтмыш; коллажен Ы жана α-SMA гиби фиброз белиртечлерини, хистоложик коллажен бирикимини жана сезгенүүчүл клетка инфилтрасйонуну дүшүрмүштүр. Серум креатинин жана кан мочевина азоту маанилеринде де иймененшме кабарланган.

RNA дизмененме анализинде бөйрөк хасарыйла йүкселен, DON дарылоосийле йениден дүшен 97 ген белирленмиштир. Бул генлерин кемокин ресептөрү активитеси, Т клеткаси гөчү жана иммунитет йанытларыйла байланыштуу экени байкалган. Өзелликле CXCL10–CXCR3 ексени, CD4+ Т клеткаларынин бөбреге чекилмесинде борбордук бир багланты катары өне чыкмыштыр.

Изилдөөда O-GlcNAc деңгээлинин артырылмасы бөйрөк түбүл клеткаларынде CXCL10 експресйонуну йүкселтмиштир. CXCR3 антагонисти AMG487’нин колдонулушу исе CD4+ Т клеткаси инфилтрасйонуну, фиброз белиртечлерини жана бөйрөк ишлевиндеки бозулмайы азалтмыштыр.

Икинжи иммунитет басамагы Th17 клеткаларыдир. Акым ситометрисийле бөйрөктеки жанлы CD4+ Т клеткалары арасында IL-17A үретен Th17 клеткаларынин катышы өлчүлмүштүр. HBP’нин DON менен баскыланмасы Th17 катышыны жана бөйрөктеки IL-17A деңгээлини азалтмыштыр. IL-17’нин секукинумаб менен түздөн-түз нөтрализе едилмеси де хайван модельинде хасары жана фибрози хафифлетмиштир.

Молекүлер денейлер, бул метаболик жана иммүноложик өзгөримин борбордукне STAT3 протеинини йерлештирмектедир. Изилдөөжылар STAT3’үн треонин 717, йани T717 бөлгесине O-GlcNAc екленмесинин протеинин клетка үчүндеки өмрүнү узаттыгыны билдирмиштир. Бул модификасйон STAT3’үн ген деңгээлини артырмамыш; протеинин йыкылмасыны енгеллемиштир.

Нормал кошулларда SMURF1 адлы Е3 убикуитин лигазын STAT3’е багланарак протеинин убиквитинденүүсини жана протеазомда парчаланмасыны колайлаштырдыгы өне сүрүлмектедир. T717 бөлгесине O-GlcNAc еклендигинде SMURF1’ин STAT3’е багланмасы азаюукта, STAT3 дагы аз убиквитинденүүкте жана клеткаде дагы узак мөөнөт калмактадыр.

\[ \mathrm{STAT3 + SMURF1} \rightarrow \mathrm{STAT3\!-\!Ub_n} \rightarrow \mathrm{proteazomal\ yıkım} \]

O-GlcNAc модификасйону бул зинжирин илк басамагыны енгеллейерек STAT3’ү карарлы хâле гетирмектедир. T717 аланинин аланине дөнүштүрүлдүгү STAT3-T717A мутантында протеин йары өмрүнүн кысалдыгы жана убиквитинденүүнин арттыгы кабарланган.

Изилдөөжылар дагы кийин STAT3’үн T717 бөлгесини максатлейебмененжек бмененшиклер үчүн түзүлүш темелли санал тарама йапмыштыр. “FDA онайлы бмененшик күтүпханеси” катары танымланан 3.158 бмененшик таранмыш, 38 адай сечилмиш жана ен жогорку сыраламадаки иноситол никотинат, сакинавир жана рутин гидрат денейсел катары изилденген.

Бу үч адай үчүнде болгону рутин гидратын STAT3 O-GlcNAc модификасйонуну жана STAT3 протеин деңгээлини азалттыгы кабарланган. Рутин хидрат STAT3 мRNA’сыны өзгөртирмемиш, факат CXCL10 експресйонуну дүшүрмүштүр. T717 мутасйону ташыйан STAT3 үзеринде айны еткинин гөрүлмемеси, йазарлар тарафындан T717 бөлгесине өзгү меканизмайы дестеклейен маалымат катары йорумланмыштыр.

UUO чычканлеринде агыздан 5 мг/кг/гүн рутин гидрат уйгуланмасы; STAT3 жана фосформенен STAT3 деңгээллерини, CD4+ Т клеткаси инфилтрасйонуну, Th17 фарклылашмасыны, бөйрөк хасары белиртечлерини жана хистоложик фибрози азалтмыштыр. Серум креатинин жана BUN маанилеринде де иймененшме кабарланган.

Бу жыйынтыклар рутин гидратын инсанларда өнөкөт бөйрөк бейтаплыгыны дарылоо еттигини гөстермемектедир. Жыйынтыктар клетка күлтүрү жана чакан хайван групларына дайанмактадыр. Илажын инсанлардаки емилими, уйгун дозу, бөйрөк бейтаптардында гүвенлиги, узак мөөнөттүү токсиситеси жана клиникалык еткинлиги араштырылмамыштыр.

Изилдөөнын темел проблеми недир?

Өнөкөт бөйрөк бейтаплыгында фарклы баштапкы себеплери булунабилир: хипертансийон, метаболик оорулар, иммүноложик хасар, токсик еткмененр же текрарлайан акут бөйрөк йараланмалары. Башлангыч себепи өзгөрсе де мененрлейен ооруларда ортак бир патоложик сонланым ортайа чыкар: бөйрөк фибрози.

Фиброзте:

• нормал бөйрөк докусу зарар гөрүр,
• мийофибробласт бензери клеткалер еткинлешир,
• коллажен жана клетка дышы матрикс бирикир,
• бөйрөк түбүллери жана дамар айланаси йениден шекилленир,
• ишлев боюнчан нефрон саны азалыр.

Билинен сезгенүүчүл жана хемодинамик меканизмалар бул мөөнөтжин болгону бир бөлүмүнү ачыклар. Изилдөөнын одакландыгы бошлук, клеткалык метаболизмдаки өзгөримин насыл калыжы бир иммунитет тепкисине дөнүштүгү жана бул тепкинин фибрози насыл сүрдүрдүгүдүр.

Хексозамин бийосентез йолу недир?

Хексозамин бийосентез йолу, гликоз метаболизмсынын чакан факат дүзенлейижи ачыдан өнемли бир колудур. Хүжредеки гликоз, глутамин, йаг асиди жана нүклеотид метаболизмсындан гелен гирдмененри бир арайа гетиререк UDP-GlcNAc үретир.

Йолун саделештирилмиш акышы, изилдөөнын мантыгыны түшүндүрмөк үчүн шөйле гөстермененбилир:

\[ \mathrm{Fruktoz\!-\!6\!-\!fosfat + Glutamin} \xrightarrow{\mathrm{GFPT1}} \mathrm{Glukozamin\!-\!6\!-\!fosfat} \]

\[ \mathrm{Glukozamin\!-\!6\!-\!fosfat} \xrightarrow{\mathrm{GNPNAT1,\ PGM3,\ UAP1}} \mathrm{UDP\!-\!GlcNAc} \]

Бу денклемлер макаладе тек бир реаксийон дизиси катары маалыматлмемиштир; HBP ферментлеринин ишлевсел сырасыны анлашылыр хâле гетирмек амажыйла көрсөтүлгөн.

Изилдөөда инжеленен темел HBP ферментлери шунлардыр:

HBP, болгону енержи үретим йолу эмес. Хүжренин бесин жана стрес абалын протеинлерин ишлевини өзгөртирен химиялык бир синйале дөнүштүрмектедир.

O-GlcNAc модификасйону недир?

O-GlcNAc модификасйону, клетка үчүндеки протеинлерин серин же треонин калынтыларына тек бир Н-асетилглукозамин грубунун екленмесидир. Фосфориласйона бензер бичимде хызлы жана гери дөнүшүмлү бир протеин дүзенлеме ыкмаидир.

O-GlcNAc трансфераз, йани OGT, шекер грубуну протеине еклер:

\[ \mathrm{Protein\!-\!OH + UDP\!-\!GlcNAc} \xrightarrow{\mathrm{OGT}} \mathrm{Protein\!-\!O\!-\!GlcNAc + UDP} \]

O-GlcNAcase, йани OGA исе бул грубу протеинден узаклаштырыр:

\[ \mathrm{Protein\!-\!O\!-\!GlcNAc} \xrightarrow{\mathrm{OGA}} \mathrm{Protein\!-\!OH + GlcNAc} \]

Бу темел денклемлер изилдөөнын бийохимиялык мантыгыны түшүндүрмөк амажыйла маалыматлмиштир.

Протеин үзериндеки O-GlcNAc өзгөрүүлиги:

• протеинин клетка үчүндеки йерини,
• дигер протеинлерле еткмененшимини,
• активитесини,
• фосфориласйонуну,
• убиквитинденүүсини,
• йары өмрүнү

өзгөртиребилир.

Изилдөөнын илк темел табылгасу: Сорун OGT/OGA миктарындан чок субстрат акышы болушу мүмкүн

Инсан өнөкөт бөйрөк бейтаплыгына аит Непхросеq маалыматлеринде OGT жана OGA експресйонунун саглыклы бөйрөклерден маанилүү бичимде фарклы олмадыгы кабарланган. Буна каршылык GFPT1, GNPNAT1, PGM3 жана UAP1 експресйону йүкселмиштир.

Инсан CKD бийопсмененринде түзүлүшлан иммүнохистохимиялык инжелемеде генел O-GlcNAc деңгээлинин арттыгы белгиленген. Шекил түшүндүрмөсында бул анализ үчүн н = 20 маалыматлмектедир; бирок өрнеклерин CKD еврелерине же саглыклы контрол групларына насыл дагылдыгы ана метинде айрынтылы катары ачыкланмамыштыр.

UUO жана фолик асит нефропатиси модельлеринде де:

• HBP ферментлеринин мRNA деңгээллери арткан,
• HBP ферментлеринин протеин деңгээллери арткан,
• генел O-GlcNAc модификасйону йүкселмиш,
• OGT експресйонунда белиргин өзгөрүүлик гөрүлмемиштир.

Йазарлар бул өрүнтүйү HBP акышынын жана UDP-GlcNAc субстрат арзынын артмасыйла түшүндүрмөктадыр.

Өнемли айрым: OGT жана OGA експресйонунун өзгөрмемеси, бул ферментлерин каталитик активителеринин кесикн катары өзгөрмедигини канытламаз. Изилдөөда OGT/OGA миктары изилденген, факат ана метинде түздөн-түз фермент активитеси өлчүмү рапорланмамыштыр. Ошондуктан жыйынтыктар HBP’нин күчтүү бир түшүндүрмө экенин дестеклер; OGT же OGA активитесинин хичбир каткысы булунмадыгыны кесикнлештирмез.

Инсан маалыматсинде бөйрөк ишлевийле илишки

Инсан маалыматлеринде GFPT1, PGM3 жана GNPNAT1 експресйонунун дагы бозук гломерүлер филтрасйонла байланыштуу экени кабарланган. OGT жана OGA үчүн айны илишки гөрүлмемиштир.

Шекил 2 түшүндүрмөсында бозулмуш бөйрөк ишлеви:

\[ \mathrm{GFR} < 60\ \mathrm{mL/dakika/1{,}73\ m^2} \]

катары аныкталган.

Бу инсан маалыматси көзлемселдир. HBP ферментинин жогорку олмасы бөйрөк ишлевинин бозулмасына себеп олмуш болушу мүмкүн; бөйрөк хасары HBP ферментлерини артырмыш болушу мүмкүн же хер ики өзгөрүүлик үчүнчү бир мөөнөтчтен булакланмыш болушу мүмкүн. Неденселлик хайван жана клетка денейлерийле араштырылмыштыр.

Биринжи хайван модельи: Тек тарафлы үретер обстрүксийону

8–10 хафталык еркек BALB/c чычкандарда сол үретер ики ноктадан багланмыш жана арадан кесиклмиштир. Контрол хайванларында айны хирургиялык ишлем түзүлүшлмыш, факат үретер багланмамыштыр. Бөйрөклер операциятан йеди гүн кийин топланмыштыр.

UUO модельи хызлы өнүккөн түбүлоинтерстисйел хасар, сезгенүү жана фиброз үретмектедир. Бул модель, инсан CKD’синин бүтүн себеплерини темсил етмез; фиброз меканизмаларыны кыса мөөнөт үчүнде инжелемек үчүн кулланылан денейсел бир модельдир.

Икинжи хайван модельи: Фолик асит нефропатиси

Еркек BALB/c чычканлере:

\[ 250\ \mathrm{mg/kg\ folik\ asit} \]

тек доз интраперитонеал катары колдонулган. Контроллер болгону ташыйыжы чөзелти алмыштыр. Хайванлар 28. гүнде маанилендирилмиштир.

Фолик асит модельи түбүлер хасар, сезгенүү жана заманла өнүккөн фиброз олуштурур. Ики айры модельин колдонулушу, меканизманын болгону үретер тыканыклыгына өзгү олмадыгыны дестеклемектедир. Бунунла бирликте хер ики модель де инсанларда жыллар үчүнде өнүккөн кармашык CKD мөөнөтжини там катары таклит етмез.

HBP’нин DON менен баскыланмасы

Изилдөөда GFPT1 жана HBP акышыны баскыламак амажыйла 6-диазо-5-оxо-Л-норлеужине, йани DON пайдаланылган:

\[ 20\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

DON уйгуламасындан кийин:

• бөйрөк O-GlcNAc деңгээли азайган,
• коллажен Ы деңгээли дүшмүш,
• α-SMA деңгээли дүшмүш,
• Массон бойамасында коллажен бирикими азайган,
• PAS бойамасында доку хасары жана сезгенүүчүл инфилтрасйон хафифлемиш,
• сарысуу креатинини жана BUN өсүшы азайгантыр.

Бу жыйынтыклар хем UUO хем де фолик асит модельинде текрарландыгы үчүн йазарлар HBP булаклы O-GlcNAc өсүшынын фиброз жана ишлев кайбына каткыда булундугу сонужуна вармыштыр.

Анжак ана метинде болгону фармаколожик HBP баскыланмасы көрсөтүлгөн. GFPT1’ин бөйрөк клеткаларынде генетик катары силиндиги же ашыры ифаде едилдиги бир деней рапорланмамыштыр. Ошондуктан DON’ун бүтүн еткмененринин болгону GFPT1 үзеринден герчеклештиги кесикн катары канытланмыш эмес.

RNA дизмененме ханги йолу гөстерди?

UUO, схам жана DON колдонулган UUO бөйрөклеринде транскриптом анализи түзүлүшлмыштыр. Бөйрөк хасарыйла йүкселен жана DON менен текрар дүшен 97 ген белирленмиштир.

Ген Онтоложиси анализинде:

• C-X-C кемокин ресептөрү активитеси,
• иммунитет йанытлары,
• Т клеткаси байланыштуу синйаллер

өне чыкмыштыр.

Cd4, Cxcr3 жана Cxcr6 темел генлер арасында кабарланган. KEGG анализи исе Th17 клетка фарклылашмасыйла байланыштуу йолакларын зенгинлештигини гөстермиштир.

CXCL10–CXCR3 ексени не түзүлүшйор?

CXCL10, белирли иммунитет клеткаларыни химиялык бир йогунлук фаркы бойунжа хасарлы докуйа чекен бир кемокиндир. CXCR3 исе өзелликле активе Т клеткаларынде булунан ресептөрлерден биридир.

Изилдөөнын өнердиги клеткалык акыш шөйледир:

\[ \mathrm{Böbrek\ tübül\ hücresi\ CXCL10}\uparrow \rightarrow \mathrm{CXCR3^+\ CD4^+\ T\ hücresi\ göçü}\uparrow \]

DON уйгуламасы бөйрөкте Cxcl10 жана Cd4 мRNA деңгээллерини жана CD4+ Т клеткаси инфилтрасйонуну азалтмыштыр.

HK-2 инсан проксимал түбүл клеткаларынде OGA инхибитөрү Тхиамет Г кулланыларак O-GlcNAc деңгээли йүкселтилдигинде CXCL10 експресйону арткантыр. Бөйлеже O-GlcNAc синйалинин болгону иммунитет клеткаларыни эмес, иммунитет клеткаларыни чагыран бөйрөк епител клеткаларыни де еткмененйебмененжеги гөстерилмек истенмиштир.

AMG487 денейи нейи тест етти?

CXCR3’үн ишлевсел ролүнү маанилендирмек амажыйла UUO чычканлерине:

\[ 5\ \mathrm{mg/kg/gün\ AMG487,\ intraperitoneal} \]

колдонулган.

CXCR3 антагонизмасы:

• CD4+ Т клеткаларынин бөбреге гиришини азалтмыш,
• коллажен Ы жана α-SMA деңгээллерини дүшүрмүш,
• сарысуу креатинини жана BUN жыйынтыкларыны иймененштирмиштир.

Бу деней, CXCL10–CXCR3 хаттынын болгону RNA анализинде гөрүлен бир ишарет олмадыгыны, фиброз фенотипине ишлевсел катары каткыда булундугуну дестеклемектедир.

Th17 клеткалары себеп өнемлидир?

Th17 клеткалары, IL-17A башта олмак үзере сезгенүүчүл ситокинлер үретен CD4+ йардымжы Т клеткаларыдир. Бөйрөк хасары сырасында бул клеткаларын үреттиги синйаллер:

• епител клеткаларынде стрес жана хасары артырабилир,
• TGF-β гиби профибротик фактөрлери йүкселтебилир,
• епител-мезенкимал өзеллик өзгөримини дестеклейебилир,
• клетка дышы матрикс бирикимини хызландырабилир.

Акым ситометрисинде Th17 клеткалары, жанлы CD4+ Т ленфосит капысы үчүндеки IL-17A позитиф клеткалер катары аныкталган:

\[ \mathrm{Th17\ oranı} = \frac{\mathrm{IL\!-\!17A^+\ CD4^+\ T\ hücreleri}}{\mathrm{toplam\ canlı\ CD4^+\ T\ hücreleri}} \times 100 \]

DON дарылооси Th17 катышыны, Il17a мRNA’сыны жана IL-17A протеинини азалтмыштыр.

IL-17’нин нөтрализасйону

Изилдөөда IL-17 йолуну түздөн-түз кесмек үчүн секукинумаб:

\[ 20\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

колдонулган. Ек шекил түшүндүрмөсына боюнча IL-17 нөтрализасйону бөйрөк хасарыны жана фибрози азалтмыштыр.

Бу маалымат, Th17/IL-17 бмененшенинин болгону HBP инхибисйонуна ешлик еден икинжил бир өзгөрүүлик олмадыгыны, фибротик жыйынтыклара каткы сунабмененжегини дестеклемектедир. Анжак секукинумаб денейинин айрынтылары ана PDF’де йер алмайан ек матерйале быракылмыштыр.

STAT3 себеп борбордук молекүл катары сечилди?

STAT3, клетка дышындан гелен ситокин жана бүйүме фактөрү синйаллерини чекирдекте ген експресйонуна дөнүштүрен бир транскрипсийон фактөрүдүр. Th17 клетка фарклылашмасы үчүн темел дүзенлейижмененрден биридир жана CXCL10 гиби кемокинлерин експресйонуну да еткмененйебилир.

Иммүнофлоресан денейлеринде STAT3 синйали менен O-GlcNAc синйалинин айны клеткалык бөлгелерде бирликте булундугу кабарланган.

DON дарылооси:

• STAT3 протеинини азалтмыш,
• фосформенен STAT3 деңгээлини азалтмыш,
• STAT3 мRNA’сыны өзгөртирмемиштир.

Бу айрым, дүзенлеменин ген транскрипсийонундан кийин, йани пост-трансласйонел деңгээлде герчеклештигини дүшүндүрмектедир.

STAT3 инхибисйону

STAT3 инхибитөрү Статтиж:

\[ 10\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

чычкандарда колдонулган; клетка денейлеринде де STAT3 синйалини баскыламак амажыйла колдонулган.

STAT3 инхибисйону:

• CXCL10 транскрипсийонуну,
• CD4+ Т клеткаси инфилтрасйонуну,
• Th17 фарклылашмасыны,
• фиброз белиртечлерини

азалтмыштыр. Бул жыйынтыклар, STAT3’үн HBP/O-GlcNAc синйали менен иммүн фиброз арасындаки баглантыда ишлевсел бир ара дүгүм экенин дестеклемектедир.

Протеин йары өмрү насыл өлчүлдү?

HK-2 клеткаларынде йени протеин сентезини дурдурмак үчүн сиклохексимид, йани CHX пайдаланылган. Хүжрелер 0, 3, 6, 9, 12 жана 24 саатлерде изилденген; учурдагы STAT3 протеининин не кадар хызлы кайбэкени маанилендирилмиштир.

Протеин азайышы саделештирилмиш катары шу илишкийле ачыкланабилир:

\[ P(t) = P_0 e^{-kt} \]

\[ t_{1/2} = \frac{\ln 2}{k} \]

Бурада:

• П(т), т заманындаки STAT3 миктарыны,
• П₀, баштапкы STAT3 миктарыны,
• к, йыкым хыз сабитини,
• т_1/2, протеинин йары өмрүнү

ифаде едер.

Бу денклемлер макаладе маалыматлмемиштир; CHX йары өмүр денейинин математиксел мантыгыны түшүндүрмөк амажыйла екленмиштир.

DON уйгуландыгында STAT3 протеининин дагы хызлы кайбэкени жана йары өмрүнүн кысалдыгы кабарланган.

T717 бөлгеси насыл белирленди?

Изилдөөжылар STAT3 үзеринде алты оласы O-GlcNAc модификасйон бөлгеси өнгөрмүш жана бул бөлгелерде амино асит өзгөрүүликлери олуштуран мутант протеинлер үретмиштир.

T717, S719, T721 жана S727 мутасйонлары STAT3 O-GlcNAc деңгээлини азалтмыштыр. Анжак болгону T717 мутасйону STAT3 йары өмрүнү белиргин бичимде кысалтмыштыр.

Ошондуктан изилдөө:

• бирден көп бөлгенин O-GlcNAc модификасйону алабмененжегини,
• протеин карарлылыгы ачысындан белирлейижи бөлгенин T717 экенин

өне сүрмектедир.

Убикуитин–протеазом системи

Хүжре, ишлеви сона ерен же хасарлы протеинлери убикуитин адлы чакан протеинлерле ишаретлейерек протеазома гөндерир.

\[ \mathrm{STAT3} \xrightarrow{\mathrm{E3\ ligaz}} \mathrm{STAT3\!-\!Ub_n} \xrightarrow{\mathrm{proteazom}} \mathrm{parçalanmış\ ürünler} \]

MG132 менен протеазом баскыландыгында DON’ун нормал STAT3 протеинини азалтан еткиси гери чеврилмиштир. T717A мутантында исе MG132 айны өрүнтүйү гөстермемиштир.

T717 мутасйону STAT3 убиквитинденүүсини артырмыштыр. T717A мутантынын убиквитинденүүси, O-GlcNAc деңгээлини йүкселтен же дүшүрен уйгуламалардан белиргин бичимде еткмененнмемиштир. Бул жыйынтыклар T717’нин O-GlcNAc менен убиквитинденүү арасындаки ана дүзенлеме ноктасы экенин дестеклемектедир.

SMURF1 насыл булунду?

Нормал STAT3 менен T717A мутантына багланан протеинлери салыштыруук үчүн ко-иммүнопресипитасйон, SDS-PAGE жана күтле спектрометриси пайдаланылган.

T717A мутасйонунда STAT3’е дагы көп багланан протеинлерден бири Е3 убикуитин лигаз SMURF1 болгон.

Сонраки денейлерде:

• STAT3 жана SMURF1’ин физиксел еткмененшими ко-иммүнопресипитасйонла догруланмыш,
• SMURF1’ин ашыры експресйону STAT3 протеинини азалтмыш,
• CXCL10 мRNA’сыны дүшүрмүш,
• O-GlcNAc деңгээлинин артырылмасы SMURF1 еткисини азалтмыш,
• T717A мутасйону SMURF1–STAT3 багланмасыны артырмыштыр.

Өнермененн молекулярдык модель шөйледир:

STAT3’үн карарлы калмасы фибрози насыл еткилийор?

Даха узак мөөнөт клеткаде калан STAT3, бөйрөк түбүл клеткасиндеки профибротик транскрипсийон програмыны сүрдүребилир. Изилдөөйа боюнча бунун ики темел сонужу бар:

1. CXCL10 өсүшы: CXCR3 ташыйан CD4+ Т клеткалары бөбреге чекилир.
2. Th17 фарклылашмасы: Бөбреге гелен CD4+ Т клеткалары IL-17A үретен Th17 фенотипине йөнелир.

Бу ики меканизма бирбирини тамамлар. Биринжиси иммунитет клеткасини хасарлы бөбреге гетирир; икинжиси гелен клетканин фибрози гүчлендирен бир иммунитет алт типине дөнүшмесини саглар.

Рутин хидрат насыл булунду?

STAT3 T717 бөлгесинин үч бойутлу түзүлүшсына дайалы санал тарама түзүлүшлмыштыр. Изилдөөда кулланылан бмененшик күтүпханеси 3.158 пунктден олушмактадыр.

Тарама басамаклары аягында:

• 38 адай бмененшик сечилмиш,
• ен жогорку сыраламадаки үч бмененшик денейсел инжелемейе алынмыштыр.

Бу үч бмененшик:

1. Иноситол никотинат
2. Сакинавир
3. Рутин хидрат

катары кабарланган.

Рутин хидрат бир флавоноиддир. Изилдөөнын темел иддиасы, бул бмененшигин болгону генел антиоксидан же сезгенүү азалтыжы өзеллик гөстермедиги; STAT3’үн T717 бөлгесиндеки O-GlcNAc модификасйонуну максатледигидир.

Рутин хидратын клетка денейлериндеки еткиси

Рутин хидрат:

• нормал STAT3’үн O-GlcNAc модификасйонуну азалтмыш,
• STAT3 протеин деңгээлини дүшүрмүш,
• STAT3 мRNA деңгээлини өзгөртирмемиш,
• CXCL10 експресйонуну азалтмыштыр.

T717A мутанты ташыйан STAT3’те айны еткинин гөрүлмемеси, йазарлар тарафындан T717 бөлгесине йөнелик өзгүллүгүн каныты катары йорумланмыштыр.

Бунунла бирликте ана метинде рутин гидратын STAT3’е багланма гүжүнү түздөн-түз өлчен йүзей плазмон резонансы, изотермал титрасйон калориметриси же бензери нижел бир бийофизиксел багланма денейи рапорланмамыштыр. Жыйынтыктар санал модельлеме, мутасйон багымлылыгы, иммүнопресипитасйон жана протеин експресйону жыйынтыкларына дайанмактадыр.

Рутин хидратын хайван денейиндеки еткиси

UUO чычканлерине агыздан:

\[ 5\ \mathrm{mg/kg/gün\ rutin\ hidrat} \]

колдонулган. Шекил 6 түшүндүрмөсында дарылоонин бир хафта сүрдүгү белиртилмектедир.

Рутин хидрат кийинсында:

• STAT3 жана п-STAT3 деңгээли азайган,
• сарысуу креатинини жана BUN маанилери иймененшмиш,
• KIM-1 хасар белиртежи азайган,
• CD4+ Т клеткаси инфилтрасйону азайган,
• Th17 клеткаси катышы дүшмүш,
• ХЕ, PAS, Сириус Ред жана Массон бойамаларында доку хасары жана коллажен бирикими азайгантыр.

Бу жыйынтыктар рутин гидраты йени бир изилдөө адайы хâлине гетирмектедир. Анжак тек бир кыса мөөнөтли хайван дозунун еткили булунмасы, илажын инсанларда гүвенли же еткили олажагы дегенди билдирбейт.

Шекил 1’ин анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 1 түшүндүрмөсына боюнча изилдөө:

• инсан маалымат табанларында OGT, OGA жана HBP ферментлерини каршылаштырмыш,
• 20 инсан CKD бөйрөк бийопсисинде O-GlcNAc иммүнохистокимйасы йапмыш,
• UUO жана фолик асит модельлеринин деней акышыны гөстермиш,
• хер ики модельде HBP ферментлерини RT-qPCR, Wестерн блот жана иммүнохистокимйайла инжелемиштир.

Йүкленен PDF’де Шекил 1’ин герчек гөрүнтү панеллери булунмамактадыр; болгону шеклин түшүндүрмө метни камтылган. Ошондуктан бойама йогунлуклары, бант гөрүнтүлери, дагылым графиклери жана хата чубуклары гөрсел катары көз карандысыз бичимде маанилендирмененмемиштир.

Шекил 2’нин анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 2 түшүндүрмөсына боюнча:

• HBP ферментлери менен GFR илишкиси изилденген,
• DON’ун O-GlcNAc деңгээлине еткиси өлчүлмүш,
• коллажен Ы жана α-SMA Wестерн блотлары түзүлүшлмыш,
• BUN жана креатинин маанилендирилмиш,
• PAS, Массон жана иммүнохистокимйа гөрүнтүлери пайдаланылган.

UUO жана ФА модельлериндеки бөйрөк ишлеви өлчүмлеринде базы груплар үчүн н = 4, доку анализлеринде чогунлукла н = 5 катары белгиленген.

Шекил 3’үн анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 3:

• RNA дизмененме фарк анализлерини,
• DON менен гери дөнен 97 гени,
• ГО жана KEGG зенгинлешмесини,
• CD4 жана CXCL10 өлчүмлерини,
• AMG487 денейлерини,
• Th17 агым цитометриясыни,
• IL-17A мRNA жана протеин жыйынтыкларыны

бир арайа гетирмектедир.

Шекил 4’үн анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 4’те:

• STAT3–O-GlcNAc ортак йерлешими,
• STAT3 протеин жана мRNA салыштыруусы,
• CHX йары өмүр денейи,
• STAT3 бөлге мутасйонлары,
• MG132 протеазом денейи,
• STAT3 убиквитинденүүси

изилденген.

Шекил 5’ин анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 5, SMURF1’ин белирленмесини жана STAT3 менен еткмененшимини гөстерен:

• күтле спектрометриси,
• ко-иммүнопресипитасйон,
• SMURF1 ашыры експресйону,
• CXCL10 өлчүмү,
• нормал STAT3 жана T717A мутанты убиквитинденүү денейлерини

ичермектедир.

Шекил 6’нын анлаттыгы мөөнөтч

Шекил 6, рутин гидратын:

• STAT3 O-GlcNAc модификасйонуна,
• T717A мутантына,
• CXCL10 жана CXCR3 експресйонуна,
• креатинин жана BUN маанилерине,
• KIM-1 жана CD4 експресйонуна,
• бөйрөк хистоложисине,
• Th17 клетка катышына

еткисини өзетлемектедир.

Анжак Шекил 1–6’нын герчек деней панеллери йүкленен 36 сайфалык PDF’де булунмамактадыр. PDF, жыйынтык метнинин ардындан шекил түшүндүрмөларыйла сона ермектедир. Ошондуктан макала үчүндеки гөрсел жыйынтыкларын чоңлүгү, дагылымы жана хам гөрүнтү калитеси болгону түшүндүрмөлардан харекетле маанилендирмененбилмиштир.

Изилдөөнын күчтүү йөнлери

• Чок катманлы деней тасарымы: Инсан маалыматси, инсан бөйрөк докусу, ики хайван модельи жана ики клетка хатты бирликте пайдаланылган.
• Ики фарклы фиброз модельи: Жыйынтыктар болгону үретер обстрүксийону модельине дайанмамактадыр.
• Йолак бойунжа чоклу мүдагыле: HBP, CXCR3, STAT3 жана IL-17 айры фармаколожик арачларла максатленмиштир.
• Транскриптом анализи: Өнжеден сечилмиш биркач ген йерине дагы гениш иммунитет өрүнтүсү араштырылмыштыр.
• Мутасйон денейлери: STAT3 үзериндеки өзгүл T717 аланы тест едилмиштир.
• Протеин йыкым меканизмасы: CHX, MG132 жана убикуитин денейлери бирликте пайдаланылган.
• Е3 лигазын белирленмеси: Күтле спектрометриси жана ко-иммүнопресипитасйонла SMURF1 баглантысы араштырылмыштыр.
• Меканизмадан адай бмененшиге кечиш: Йапы темелли тарама кийинсында рутин гидрат клетка жана хайван денейлеринде маанилендирилмиштир.
• Инсан бөйрөк докусу догруламасы: Меканизма болгону клетка күлтүрү же чычкан маалыматсине дайандырылмамыштыр.
• Вери пайлашым планы: RNA-seq маалыматси PRJNA14422936 BioProject еришим нумарасыйла билдирилмектедир.

Изилдөөнын чектелгенлыклары

• Хакем маанилендирмеси жок: Изилдөө бир препринттир.
• Клиник изилдөө эмес: Хичбир CKD бейтапсына DON, AMG487, Статтиж, секукинумаб же рутин гидрат маалыматлмемиштир.
• Күчүк хайван груплары: Чогу деней грубунда н = 5, базы бөйрөк ишлеви анализлеринде н = 4 пайдаланылган.
• Йалнызжа еркек чычканлер: Жинсийете баглы биологиялык фарклылыклар маанилендирмененмемиштир.
• Кыса мөөнөтли модельлер: UUO йеди гүн, фолик асит модельи 28 гүн изленмиштир.
• Инсан CKD’сини там темсил етмез: Инсан бейтаплыгы генелликле жыллар үчүнде жана чок саныда ешлик еден фактөрле гелишир.
• Генетик HBP догруламасы чектелгендыр: GFPT1’ин бөбреге өзгү силинмеси же ашыры експресйону ана метинде гөстерилмемиштир.
• Фармаколожик өзгүллүк соруну: DON’ун бүтүн еткмененринин болгону GFPT1/HBP үзеринден герчеклештиги кесикнлештирилмемиштир.
• OGT/OGA активитеси өлчүлмемиштир: Експресйонун өзгөрмемеси фермент активитесинин өзгөрмедигини канытламаз.
• Инсан өрнек өзелликлери ексиктир: Бейтапларын йашы, жинсийети, CKD себепи, евреси, дийабет абалы жана дарылоолери айрынтылы бичимде сунулмамыштыр.
• Шекиллер PDF’де булунмамактадыр: Йалнызжа шекил түшүндүрмөлары камтылган.
• Ек ыкмалер учурдагы эмес: Метин, калан ыкмалерин ек матерйалде экенин белиртмекте; бул матерйал йүкленен досйада булунмамактадыр.
• Растгелелештирме жана көрлеме ачыкланмамыштыр: Хайванларын груплара насыл атандыгы жана хистоложик маанилендирмелерин көр түзүлүшлып түзүлүшлмадыгы белиртилмемиштир.
• Өрнеклем чоңлүгү хесабы маалыматлмемиштир: Хайван сажыларынын статистикалык герекчеси сунулмамыштыр.
• Деней текрарлары чектелген рапорланмыштыр: Денейлерин ен аз ики кез текрарландыгы белиртилмиш; биологиялык жана текник текрарларын айрынтысы маалыматлмемиштир.
• Истатистиксел рапорлама чектелгендыр: Темел катары тек йөнлү ANOVA, орталама ± SEM жана жылдызлы п ешиклери маалыматлмиштир.
• Етки чоңлүгү жана гүвен аралыклары ексиктир: Бирчок жыйынтык үчүн кесикн санысал фарклар, гүвен аралыклары жана хам маалыматлер ана метинде сунулмамыштыр.
• Чоклу салыштыруу дүзелтмеси ачыкланмамыштыр: Чок саныда ген, протеин жана дарылоо грубу маанилендирилмиштир.
• Рутин хидрат үчүн доз-йаныт анализи жок: Фарклы дозларын еткинлик жана токсиситеси каршылаштырылмамыштыр.
• Фармакокинетик маалымат жок: Емилим, кандаки деңгээл, бөйрөк докусуна кечиш жана йары өмүр инжеленмемиштир.
• Узун дөнем гүвенлик билинмемектедир: Кроник кулланым, каражигер еткмененри, препарат еткмененшимлери жана иммүноложик йан еткмененр араштырылмамыштыр.
• Догрудан багланма тести чектелгендыр: Рутин хидрат–STAT3 багланмасы нижел бир бийофизиксел ыкмале ана метинде гөстерилмемиштир.
• Стандарт дарылоойле салыштыруу жок: Рутин хидрат учурдагы CKD же антифибротик йаклашымларла каршылаштырылмамыштыр.
• Фигүр жана ек матерйал нумараландырмасында едиторйал сорунлар бар: Базы шекил түшүндүрмөларында панел харфлери текрар едилмиш жана деней айрынтылары ексик быракылмыштыр.

Изилдөө не сөйлүйор?

• Инжеленен инсан CKD докуларында жана ики чычкан модельинде генел протеин O-GlcNAc деңгээли йүкселмиштир.
• Бу йүкселише HBP ферментлеринин өсүшы ешлик етмиштир.
• OGT жана OGA експресйонунда белиргин өзгөрүүлик билдирилмемиштир.
• HBP’нин DON менен баскыланмасы чычкандарда фиброз жана бөйрөк ишлев бозуклугуну азалтмыштыр.
• HBP/O-GlcNAc синйали CXCL10–CXCR3 йолуйла CD4+ Т клеткаларыни бөбреге чекмектедир.
• Бу синйал Th17 фарклылашмасы жана IL-17A үретимийле байланыштуудир.
• STAT3, метаболик синйал менен иммүн йаныт арасында борбордук бир молекүл катары белирленмиштир.
• STAT3 T717 бөлгесиндеки O-GlcNAc модификасйону протеинин йары өмрүнү узатмыштыр.
• O-GlcNAc, SMURF1’ин STAT3’е багланмасыны жана STAT3 убиквитинденүүсини азалтмыштыр.
• Рутин хидрат клетка денейлеринде STAT3 O-GlcNAc модификасйонуну азалтмыштыр.
• Рутин хидрат кыса мөөнөтли UUO чычкан модельинде фиброз жана иммунитет инфилтрасйонуну азалтмыштыр.

Изилдөө не сөйлемийор?

• Рутин хидратын инсанларда CKD’йи дарылоо еттигини гөстермемектедир.
• Рутин камтыган гыдаларын же таквийелерин бөйрөк фиброзини өнледигини гөстермемектедир.
• Инсанлар үчүн еткили же гүвенли бир доз белирлемемектедир.
• Рутин хидратын дийализ герексинимини же бөйрөк йетмезлигини өнледигини гөстермемектедир.
• HBP’нин бүтүн CKD түрлеринде айны өлчүде еткин экенин гөстермемектедир.
• OGT жана OGA’нын CKD’де хичбир ролү булунмадыгыны канытламамактадыр.
• STAT3’үн фиброзте еткили тек O-GlcNAc максати экенин гөстермемектедир.
• Th17 клеткаларынин бөйрөк фиброзиндеки тек иммунитет клеткаси экенин гөстермемектедир.
• DON’ун инсанларда гүвенле кулланылабмененжек бир антифибротик дарылоо экенин гөстермемектедир.
• Рутин хидратын STAT3 T717’йе түздөн-түз жана жогорку сечижиликле багландыгыны тек башына кесикнлештирмемектедир.
• Кыса мөөнөтли чычкан иймененшмесинин узак мөөнөттүү CKD мененрлемесини дурдуражагыны канытламамактадыр.

Гечмиш ачысындан өнеми

Бөйрөк фибрози изилдөөлары узак мөөнөт TGF-β, фибробласт активасйону, хемодинамик стрес жана сезгенүүчүл ситокинлере одакланмыштыр. Сон жылларда хасарлы бөйрөк клеткаларынин метаболик програмларынын да фибрози йөнлендирдиги анлашылмайа башланмыштыр.

Бу изилдөө, метаболик йениден програмланмайы болгону клетканин енержи колдонулушуйла илишкмененндирмемекте; метаболик акышын протеин модификасйону үзеринден иммунитет клеткаларынин давранышына чеврмененбмененжегини гөстермейе изилдөөктадыр.

Бугүн ачысындан өнеми

Изилдөөнын темел каврамсал каткысы, бөйрөк фиброзини айры айры “метаболик оору” же “сезгенүүчүл оору” катары көрүүк йерине бүтүнлешик бир иммүнометаболик бозуклук катары еле алмасыдыр.

HBP:

• клетканин бесин абалын алгыламакта,
• UDP-GlcNAc үретимини өзгөртирмекте,
• STAT3 протеин карарлылыгыны дүзенлемекте,
• кемокин үретимини жана Т клеткаси гөчүнү еткмененмекте,
• Th17 йанытыны жана фибрози гүчлендирмектедир.

Бу түр бир йолак, тек бир клетка типини эмес бөйрөк түбүл клеткаси, Т ленфосити жана фибротик микроайлана арасындаки менентишими максатлеме оланагы сунабилир.

Гележек ачысындан өнеми

Илери изилдөөларын шу сорулары йанытламасы герекмектедир:

• CKD’де HBP’йи башлатан ен үст синйал недир?
• Хипокси, ендоплазмик ретикулум стреси же белирли ситокинлер HBP’йи насыл еткинлештирир?
• STAT3 дышында ханги профибротик протеинлер O-GlcNAc менен карарлы хâле гелир?
• T717 модификасйону инсан бөйрөк докусунда түздөн-түз жана нижел катары догруланабилир ми?
• HBP’нин бөйрөк клеткаларыне өзгү генетик баскыланмасы фибрози азалтыр мы?
• Рутин хидратын бөйрөк докусундаки герчек консантрасйону недир?
• Рутин хидрат узак мөөнөтли жана дагы йаваш өнүккөн CKD модельлеринде еткили мидир?
• Илажын иммунитет системи, каражигер жана дигер органлар үзериндеки узак мөөнөттүү еткмененри нелердир?
• Даха сечижи жана күчтүү T717 максатли түревлер гелиштирмененбилир ми?
• Инсанларда гүвенли доз аралыгы булунабилир ми?

Гүнделик жашоо жана бейтап ачысындан не анлама гелийор?

Изилдөө, бөйрөк бейтаптардынын рутин камтыган гыдалары же таквийелери дарылоо амажыйла кулланмасыны өнермемектедир. Рутин хидрат болгону клетка күлтүрлеринде жана денейсел чычкан модельлеринде маанилендирилмиштир.

Өнөкөт бөйрөк бейтаптардында бесин дестеклери жана биткисел үрүнлер:

• бөйрөк ишлевине боюнча вүжутта бирикебилир,
• речетели препаратларла еткмененшебилир,
• үрүнүн сафлыгына жана дозуна боюнча фарклы еткмененр гөстеребилир,
• потасйум же башка пунктлер ичеребилир.

Ошондуктан изилдөө, кенди кендине рутин таквийеси башланмасы үчүн клиникалык каныт олуштурмаз. Инсан дарылоосине кечмененбилмеси үчүн токсисите, фармакокинетик, доз белирлеме жана контроллү клиникалык денейлер гереклидир.

Изилдөөнын Ыкмаи жана Жыйынтыктары

Изилдөө йаклашымынын текник өзети

Кулланылан фармаколожик мүдагылелер

Хүжре денейлеринде кулланылан темел арачлар

Деней зинжиринин текник мантыгы

1. Инсан жана чычкан бөбрегинде HBP жана O-GlcNAc өсүшы гөстерилди.
2. HBP’нин баскыланмасыйла фиброз жана бөйрөк ишлеви жыйынтыклары маанилендирилди.
3. RNA-seq менен иммүн йаныт жана кемокин ексени белирленди.
4. CXCR3, STAT3 жана IL-17 айры мүдагылелерле тест едилди.
5. STAT3 протеин йары өмрүнүн O-GlcNAc абалына баглы экени гөстерилди.
6. Мутасйонларла T717 бөлгеси ишлевсел алан катары танымланды.
7. SMURF1’ин STAT3 йыкымыны саглайан Е3 лигаз экени өне сүрүлдү.
8. Санал тарамайла T717 бөлгесини максатлейебмененжек адайлар сечилди.
9. Рутин хидрат клетка жана чычкан денейлеринде догруланды.

Ана молекулярдык модель

Мүдагыле жыйынтыкларынын текник өзети

Рутин хидрат тарамасынын өзети

Текник катары ен өнемли жыйынтык

Изилдөөнын ен өнемли билимсел өнериси, бөйрөк фиброзинде метаболик синйал менен иммунитет йанытынын тек бир молекулярдык зинжир үзеринден багланабмененжегидир.

HBP’нин артмасы болгону клетка үчүндеки шекер метаболизмсыны өзгөртирмемектедир. UDP-GlcNAc миктарыны йүкселтерек STAT3 протеинине T717 бөлгесинден химиялык бир ишарет еклемекте, бул ишарет STAT3’ү клеткалык йыкымдан корумакта жана дагы узак мөөнөт еткин калмасыны сагламактадыр.

Карарлы STAT3 дагы көп CXCL10 үретимини, CD4+ Т клеткаси гөчүнү жана Th17 йанытыны дестеклемектедир. Бөйлеже кыса мөөнөтли бир метаболик өзгөрүүлик, кендини сүрдүрен бир иммүн-фибротик микроайланайе дөнүшебилмектедир.

Рутин хидрат бул зинжирин T717 модификасйону деңгэколунда кесиклебмененжегини гөстерен бир изилдөө аражы жана адай бмененшик катары сунулмуштур. Анжак азырынча бир CKD илажы катары маанилендирилмемелидир.

Булак жана Ыкма Ноту

Бу ичерик, Хонгxиа Йанг, Бин Лиу, Гуангтао Ли, Дан Зханг, Сханггуо Wанг, Зехуа Зханг, Xиаодонг Зхао, Жиаxин Лиу, Qианхуи Ли, Йифан Сонг, Йанг Тан, Схуйуе Ма, Хонглан Зхоу, Йисху Wанг жана Йангхе Зханг тарафындан хазырланан “Hexosamine Biosynthesis Pathway Driven O-GlcNAcylation of STAT3 Orchestrates Renal Fibrosis via a T cell Mediated Immune Pathway in CKD” аталышлы изилдөөйа дайанмактадыр.

Изилдөө; инсан бөйрөк докусу, камуйа ачык инсан експресйон маалыматлери, еркек BALB/c чычкандарда UUO жана фолик асит нефропатиси модельлери, HK-2 жана 293Т клеткалары, RNA дизмененме, мутасйон, иммүнопресипитасйон, убиквитинденүү жана түзүлүш темелли санал тарама ыкмалерини бирлештирен преклиникалык меканизма жана препарат адайы кешиф препринтидир.

Метинде ачыкча “This preprint research paper has not been peer reviewed” жана “Preprint not peer reviewed” ифаделери булунмактадыр. Долайысыйла изилдөө хакем маанилендирмесинден кечмемиштир. PDF’де нихаи дерги кабулү же хакемли йайын статүсү догруланмамактадыр.

Хайван денейлеринин Жилин Үниверситеси Жоллеге оф Басиж Медижал Сжиенжес IACUC курулу тарафындан 2025-530 нумаралы протоколле онайландыгы белгиленген. Инсан бөйрөк докусу изилдөөлары үчүн Фирст Хоспитал оф Jilin University етик курулундан 2024-1151 нумаралы онай алындыгы жана катылымжылардан йазылы билгмененндирилмиш онам сагландыгы кабарланган.

RNA-seq маалыматлеринин NCBI Sequence Read Archive үчүнде PRJNA14422936 BioProject нумарасыйла пайлашылдыгы белгиленген. Дигер маалыматлерин макала, ек досйалар же макул талеп үзерине сорумлу йазардан сагланабмененжеги ифаде едилмиштир.

Изилдөө National Natural Science Foundation of China, Жилин Провинже Натурал Сжиенже Фоундатион жана метинде листеленен дигер курумсал фонлар тарафындан дестекленмиштир. Йазарлар чыкар чатышмасы билдирмемиштир.

Йүкленен 36 сайфалык PDF’де Шекил 1–6’нын денейсел гөрүнтүлери жана график панеллери булунмамакта, болгону шекил түшүндүрмөлары камтылган. Ана ыкма бөлүмүнде калан деней ыкмалеринин ек матерйалде сунулажагы белиртилмесине рагмен ек матерйал йүкленен досйада булунмамактадыр.

Рутин хидрат болгону клетка күлтүрү жана кыса мөөнөтли чычкан денейлеринде маанилендирилмиштир. Инсанларда доз, фармакокинетик, гүвенлик, еткилилик же клиникалык жыйынтык маалыматси жок. Изилдөө рутин таквийеси колдонулушуны, учурдагы CKD дарылоолеринин быракылмасыны же рутин гидратын дарылоо амажыйла колдонулушуны дестеклемемектедир.

Изилдөөнын “илк сыныф максатли инхибитөр” ифадеси йазарларын преклиникалык маалыматлер үзеринден йаптыгы танымламадыр. Бул ифаде клиникалык катары онайланмыш препарат, канытланмыш дарылоо же инсанларда гөстерилмиш максат өзгүллүгү анламына гелмемектедир.

Бу макала болгону йүкленен PDF’деки ыкмалер, шекил түшүндүрмөлары, деней жыйынтыклары жана йазарларын йорумларына дайаныларак хазырланмыштыр. PDF’де булунмайан клиникалык еткинлик, инсан дозу, дарылоо үстүнлүгү, гүвенлик гарантиси же бөйрөк бейтаплыгыны иймененштирме иддиасы екленмемиштир.