Temporomandibulyar boʻgʻim osteoartritida (TMJOA) mandibulyar kondil yuzaki fibrotogʻayidagi tabiiy I tur kollagen tarmogʻi boʻgʻim yuzasining vaqtga bogʻliq yuk koʻtarish va energiyani taqsimlash xatti-harakatiga hissa qoʻshadigan tartibli ekstrasellyulyar matriks arxitekturasidir. Ushbu preprint tadqiqot MIA bilan hosil qilingan kalamush TMJOA modelida erta mexanik buzilish kollagen miqdoridagi yaqqol fibrotik ortishdan oldin boshlanishi mumkinligini koʻrsatadi. Nanoindentatsiya, polarizatsiya-rezolyutsiyali ikkinchi garmonik generatsiya mikroskopiyasi (pSHG), skanerlovchi elektron mikroskopiya (SEM), fluoressensiya fotobleachingidan keyingi tiklanish (FRAP), immunoboʻyash va gen ekspressiyasi tahlillari birgalikda qoʻllanganda kasallikning birinchi haftasida uzoq vaqt masshtabidagi viskoelastik retardatsiya kamaygani, kollagen fibrillari tekislanishi buzilgani, molekulyar qadoqlanish tartibi pasaygani, kollagen tutamlari qoʻshilib tartibsizlashgani va matriks oʻtkazuvchanligi oshgani kuzatilgan. Bunga qarama-qarshi ravishda yaqqol patologik COL1 toʻplanishi keyinroq paydo boʻlgan. COL12A1 ekspressiyasining erta kamayishi ham fibril tashkiloti buzilishi bilan bogʻliq nomzod molekulyar xususiyat sifatida aniqlangan. Natijalar erta TMJOA davrida “koʻproq yoki kamroq kollagen” savolidan oldin tabiiy kollagen tarmogʻi qanday tashkil etilganining mexanik jihatdan hal qiluvchi boʻlishi mumkinligini koʻrsatadi; biroq tadqiqot hayvon modeliga asoslangan va COL12A1 uchun sababiylik toʻgʻridan-toʻgʻri genetik aralashuv bilan koʻrsatilmagan.

Temporomandibulyar boʻgʻim togʻayi nega boshqa boʻgʻim togʻaylaridan farq qiladi?

Mandibulyar kondil togʻayi (mandibular condylar cartilage, MCC) tizza kabi koʻplab sinovial boʻgʻimlardagi gialin togʻaydan tuzilishi jihatidan farq qiladi. MCC tuzilmasining boʻgʻim yuzasiga qaragan yuzaki fibrotogʻay (superficial fibrocartilage, SF) qatlami zich tashkil topgan I tur kollagen (COL1) saqlaydi, chuqurroq joylashgan artikulyar togʻay qatlami esa II tur kollagen va glikozaminoglikanga boyroqdir.

Manba tadqiqotida sogʻlom MCC toʻrtta asosiy tuzilma sifatida tavsiflangan: yuzaki fibrotogʻay (SF), proliferativ qatlam (PF), artikulyar togʻay (AC) va subxondral suyak. Gistologik va ikkinchi garmonik generatsiya tasvirlari COL1 ga boy yuzaki qatlam zich va yoʻnalgan kollagen tutamlaridan tashkil topganini koʻrsatadi.

Bu yuzaki tarmoq faqat biokimyoviy tuzilma emas. U boʻgʻim yuzasining deformatsiyaga qarshilik koʻrsatishiga, yukni taqsimlashiga, ishqalanishni kamaytirishiga va vaqtga bogʻliq mexanik javob hosil qilishiga hissa qoʻshadi. Shu sababli COL1 miqdori oʻzgarmasa ham, fibrillarning yoʻnalishi, oraligʻi, qadoqlanishi va tutam tartibi buzilganda toʻqima funksiyasi oʻzgarishi mumkin.

Erta TMJOA Davrida Asosan Kollagen Miqdori Oʻzgaradimi yoki Kollagen Arxitekturasi?

Ushbu tadqiqot ma’lumotlari MIA bilan induksiya qilingan erta TMJOA modelining birinchi haftasida yaqqol sof COL1 toʻplanishidan oldin tabiiy COL1 tarmogʻi arxitekturasida buzilish yuzaga kelishini qoʻllab-quvvatlaydi. Birinchi haftada COL1 oʻrtacha fluoressensiya intensivligida sezilarli ortish va Col1a1/Col1a2 transkriptlarida koʻtarilish kuzatilmagan boʻlsa-da, fibril tekislanishi, molekulyar qadoqlanish, tutam tashkiloti va matriks oʻtkazuvchanligi oʻzgargan; yaqqol patologik COL1 toʻplanishi esa keyinroq, ayniqsa ikkinchi haftadan boshlab paydo boʻlgan.

Eksperimental kasallik modeli

Tadqiqotchilar sakkiz haftalik erkak Sprague–Dawley kalamushlarining ikkala temporomandibulyar boʻgʻimiga 50 µL fiziologik eritmada 0,5 mg monosodium yodoatsetat (MIA) yuborib TMJOA modelini yaratgan. Nazorat hayvonlariga faqat fiziologik eritma qoʻllangan. Tuzilmaviy, mexanik va molekulyar oʻzgarishlar birinchi, ikkinchi va toʻrtinchi haftalarda baholangan.

Tajribalar ARRIVE koʻrsatmalariga muvofiq oʻtkazilgan va Showa Medical University Animal Care and Use Committee tomonidan 225080 havola raqami bilan tasdiqlangan.

Gistologiya va mikro-CT orqali kasallikning rivojlanishi

Mikro-CT tekshiruvida MIA qoʻllangan boʻgʻimlarda progressiv subxondral suyak eroziyasi kuzatilgan. Gistologik tahlillarda esa modifikatsiyalangan Mankin balli va TMJOA gistologik shikastlanish darajasi birinchi haftadan boshlab oshgan.

Yuzaki fibrotogʻay qatlamining qalinligi birinchi haftada oshgan; hujayralarning kattalashishi, yumaloqlashishi va yuzada toʻplanishi kuzatilgan. Ikkinchi va toʻrtinchi haftalarda SF qatlami qalinligicha qolgan, biroq hujayra yoʻqotilishi sababli gipotsellyulyar koʻrinish olgan.

Nanoindentatsiya orqali vaqtga bogʻliq mexanik xatti-harakat

Yangi mandibulyar kondil yuzalari diametri 50 µm boʻlgan yassi uchli indentordan foydalanuvchi TI 950 TriboIndenter tizimida sinovdan oʻtkazilgan. Namunalar PBS ichida 22 ± 1 °C da gidratlangan holda saqlangan. Har bir namuna uchun kondilning markaziy yuzasidan uchdan ortiq indentatsiya oʻlchovi olingan va har bir hayvon boʻyicha oʻrtacha qiymat tahlil qilingan.

Creep protokolida yuk tezda 5 µN gacha oshirilgan, 20 soniya doimiy saqlangan va soʻng tezda olib tashlangan. Doimiy yuk davridagi vaqtga bogʻliq deformatsiya ikki elementli umumlashtirilgan Kelvin–Voigt modeli bilan baholangan.

Modeldan ikki retardatsiya vaqti \(\tau_1\) va \(\tau_2\), ikki yopishqoqlik koeffitsienti \(\eta_1\) va \(\eta_2\), shuningdek elastik komponentlar \(E_1\) va \(E_2\) olingan. Uzoq vaqt masshtabidagi ikkinchi komponent uchun:

\[ \tau_2=\frac{\eta_2}{E_2} \]

munosabatidan foydalaniladi. Bu yerda \(\eta_2\) toʻqima matriksining sekinroq yopishqoq energiya taqsimlash xatti-harakati bilan, \(E_2\) esa ayni mexanik komponentning elastik qarshiligi bilan bogʻliq. \(\tau_2\) ning kamayishi toʻqima sekin vaqt masshtabidagi yuk ostida normal viskoelastik kechikish xatti-harakatini tezroq yoʻqotishini koʻrsatadi.

Viskoelastik Retardatsiya Vaqti Nimani Koʻrsatadi?

Viskoelastik retardatsiya vaqti viskoelastik toʻqimaning qoʻllangan mexanik yuk ostidagi vaqtga bogʻliq deformatsiyasining xarakterli tezligini ifodalaydi. Ushbu tadqiqotda ayniqsa \(\tau_2=\eta_2/E_2\) bilan aniqlangan uzoq vaqt masshtabidagi komponentning kamayishi yuzaki fibrotogʻayning yuk ostida sekin energiya taqsimlash qobiliyati erta TMJOA davomida buzilganini koʻrsatadi; tadqiqotchilar bu oʻzgarish asosan \(\eta_2\) dagi mutanosib ravishda kattaroq pasayish bilan bogʻliqligini bildirgan.

Birinchi haftadagi mexanik natija

Birinchi haftada kamaytirilgan elastik modul \(E_r\) MIA va fiziologik eritma guruhlari oʻrtasida oʻxshash boʻlib qolgan. Birinchi Kelvin–Voigt komponentiga tegishli \(\tau_1\), \(\eta_1\) va \(E_1\) parametrlarida ham sezilarli farq qayd etilmagan.

Bunga qarama-qarshi ravishda, uzoq vaqt masshtabidagi ikkinchi komponentning \(\tau_2\) qiymati yaqqol kamaygan. Oʻrtacha \(\tau_2\) fiziologik eritma guruhida taxminan 44 soniyadan MIA guruhida taxminan 23 soniyaga tushgan va farq statistik jihatdan ahamiyatli boʻlgan (\(P=0{,}010\)).

Ham \(\eta_2\), ham \(E_2\) kamaygan, biroq \(\eta_2\) dagi mutanosib pasayish kattaroq boʻlgani uchun \(\tau_2\) dagi kamayishni asosan yopishqoq energiyani taqsimlash qobiliyatining yoʻqolishi belgilagan. Shunga oʻxshash kamayish ikkinchi haftada sezilarli tarzda davom etgan va toʻrtinchi haftada ham ayni yoʻnalishdagi tendensiya saqlangan.

Nega COL1 miqdori birinchi haftada yakka oʻzi yetarli tushuntirish bermaydi?

Immunofluoressensiya tahlilida sogʻlom boʻgʻimda COL1 asosan SF va PF–AC oʻtish hududida, COL2 esa chuqurroq artikulyar togʻay hududida kuzatilgan.

MIA qoʻllanganidan bir hafta oʻtib yuzaki qatlamning kengayishi tufayli COL1 signalining fazoviy taqsimoti oʻzgargan, biroq oʻrtacha fluoressensiya intensivligida sezilarli ortish topilmagan. COL1 boʻyicha musbat maydon kamayish tendensiyasini koʻrsatgan (\(P=0{,}13\)). Shu davrda Col1a1 va Col1a2 gen ekspressiyalarida ham ortish kuzatilmagan.

Ikkinchi va toʻrtinchi haftalarda esa COL1 boʻyicha musbat maydon va oʻrtacha fluoressensiya intensivligi oshgan, ikkinchi haftada Col1a1 va Col1a2 ekspressiyalari ham koʻtarilgan. Demak, yaqqol fibrotik COL1 toʻplanishi mexanik buzilish boshlangan birinchi haftadan keyin yuzaga keladi.

LOX topilmasi va klassik fibroz modeli bilan farqi

Gialin togʻay osteoartritida LOX vositasidagi kollagenning koʻndalang bogʻlanishi matriks qattiqlashuvi va fibrotik oʻzgarish bilan bogʻlanishi mumkin. Biroq ushbu TMJOA modelida birinchi haftada LOX oqsilida yaqqol ortish kuzatilmagan, Lox transkript darajasi MIA guruhida kamaygan.

Bu topilma erta TMJ fibrotogʻay buzilishini klassik “LOX ortishi → koʻndalang bogʻlanish → matriks qattiqlashuvi → fibroz” modeli bilan toʻliq tushuntirib boʻlmasligini koʻrsatadi.

pSHG orqali kollagen fibril yoʻnalishi va molekulyar qadoqlanish

Polarizatsiya-rezolyutsiyali ikkinchi garmonik generatsiya (pSHG) mikroskopiyasi kollagen fibrillarining yoʻnalishi va molekulyar tartibi haqida optik ma’lumot berdi. Sogʻlom nazorat guruhida yuzaki qatlamdagi fibrillar asosan boʻgʻim yuzasiga parallel yoʻnalgan.

MIA guruhida fibrillar 30°–60° va 60°–90° oraliqlariga siljigani, ya’ni yuzadan ogʻish ortgani kuzatilgan. Molekulyar qadoqlanish koʻrsatkichi boʻlgan \(I_2\) taqsimotining choʻqqi qiymati taxminan 0,275 dan 0,20 ga siljigan. Tadqiqotchilar buni kollagen molekulalarining tartibli qadoqlanishi kamayishi sifatida talqin qilgan.

SEM orqali fibril tutamlarining bevosita koʻrinishi

SEM tasvirlarida fiziologik eritma nazorat guruhi zich va tartibli fibrillyar tarmoqni koʻrsatgan, MIA namunalarida esa dagʻalroq, toʻplangan, chigallashgan va egri fibril tutamlari kuzatilgan. Hujayra toʻplamlari bilan bogʻliq deb hisoblangan boʻshliqsimon tuzilmalar va yuzaning uzluksizligidagi buzilishlar ham qayd etilgan.

Ushbu tuzilma buzilishlari pSHG bilan oʻlchangan fibril yoʻnalishining yoʻqolishi va molekulyar qadoqlanishning kamayishi bilan bir xil hududlarda moslik koʻrsatgan.

FRAP orqali matriks oʻtkazuvchanligi

FRAP tahlilida 70 kDa fluoresssein bilan belgilangan dekstran togʻay matriksi ichida muvozanatga keltirilgan, tanlangan hudud 488 nm lazer bilan fotobleaching qilingan va fluoressensiya tiklanishi vaqt davomida kuzatilgan.

Tiklanish yarim-vaqti \(t_{1/2}\) molekulalar matriks ichida qanchalik tez qayta taqsimlanishini koʻrsatuvchi oʻlchovdir. Birinchi haftada MIA guruhining \(t_{1/2}\) qiymati nazorat guruhidan sezilarli darajada qisqaroq boʻlgan (\(P=0{,}041\)). Bu natija matriks oʻtkazuvchanligining oshishi bilan mos keladi.

Toʻrtinchi haftada esa vaziyat teskari boʻlgan va MIA guruhida \(t_{1/2}\) nazorat guruhiga qaraganda uzunroq boʻlgan (\(P=0{,}042\)). Tadqiqotchilar ushbu kech davr natijasini fibrotik qayta tuzilish bilan birga kechuvchi kamaygan oʻtkazuvchanlik bilan bogʻlagan.

Kech Davrda Koʻproq COL1 Mexanik Funksiyani Qayta Tiklaydimi?

Ushbu tadqiqotda yoʻq. Toʻrtinchi haftadagi fibrotik qayta tuzilishda COL1 miqdori oshib, erta davrdagi yuqori oʻtkazuvchanlik tendensiyasi teskari tomonga oʻzgargan boʻlsa ham, uzoq vaqt masshtabidagi viskoelastik retardatsiya boshlangʻich sogʻlom darajaga qaytmagan. Bu topilma keyinroq toʻplangan patologik COL1 tabiiy kollagen tarmogʻining oʻziga xos fibril tashkilotini va vaqtga bogʻliq mexanik funksiyasini avtomatik ravishda qayta yaratmasligini koʻrsatadi.

Nega COL12A1 ajralib turdi?

Tadqiqotchilar kollagen fibril tashkiloti bilan bogʻliq genlarni turli hayvon turlaridagi TMJOA transkriptom ma’lumotlar toʻplamlarida taqqoslagan. Col12a1 kalamush va sichqon ma’lumotlar toʻplamlarida izchil kamaygan genlardan biri boʻlgan; qayd etilgan log2FC qiymatlari mos ravishda taxminan −0,31 va −0,32 ni tashkil qilgan.

Yuzaki qatlam alohida tahlil qilingan quyon ma’lumotlar toʻplamida Col12a1 oʻrganilgan genlar orasida kuchliroq oʻzgarish koʻrsatgan: log2FC taxminan −1,65 va \(P<0{,}05\).

Ularning oʻz MIA modelidagi RT-qPCR va immunofluoressensiya natijalari ham birinchi haftada Col12a1/COL12A1 kamayishini qoʻllab-quvvatlagan. COL12A1 oqsili kamayishining toʻrtinchi haftada ham davom etishi fibrilni tartibga soluvchi dasturdagi buzilish kech davrda ham saqlanishi mumkinligini koʻrsatadi.

COL12A1 Erta TMJOA uchun Isbotlangan Sababiy Marker Mi?

Yoʻq. Tadqiqot COL12A1 kamayishini erta yuzaki fibrotogʻay kollagen tarmogʻi buzilishi bilan mos molekulyar xususiyat va nomzod marker sifatida koʻrsatadi, biroq toʻgʻridan-toʻgʻri Col12a1 funksiyani yoʻqotish yoki funksiyani kuchaytirish tajribasi oʻtkazilmagan. Shuning uchun COL12A1 kamayishi TMJOA davridagi arxitekturaviy yoki mexanik buzilishni oʻzi boshlashi yoki uni tuzatish kasallikning oldini olishi ushbu tadqiqot tomonidan isbotlanmagan.

SLRP oilasidagi oʻzgarishlar

Kichik leytsinga boy proteoglikanlar (SLRP) fibril diametrini, lateral oʻsishni, oraliqlarni va kollagen qadoqlanishini tartibga solishi mumkin. Tadqiqotda Fmod va Lum birinchi haftada Col12a1 bilan birga kamaygan.

I sinf SLRP guruhida esa vaqtga bogʻliq boshqa bir naqsh kuzatilgan. Dcn birinchi haftada oshgan, ikkinchi haftada kamaygan; Bgn esa ham birinchi, ham ikkinchi haftada koʻtarilgan. Tadqiqotchilar ikkinchi haftadagi Dcn kamayishi bilan davom etuvchi Bgn ortishini fibrotik qayta tuzilishga oʻtish bilan bogʻliq molekulyar naqsh sifatida talqin qilgan.

Erta va kech kasallik bosqichlari uchun taklif etilgan model

Manba taklif qilgan ish modeli uch bosqichni ajratadi:

1. Sogʻlom TMJ: Yuzaga parallel, yaxshi tashkil etilgan tabiiy COL1 tarmogʻi; normal fibril regulyatorlari; nazorat qilinadigan oʻtkazuvchanlik va normal viskoelastik energiya taqsimoti.
2. Erta TMJOA: COL1 miqdorida yaqqol fibrotik ortish boʻlmasdan fibril yoʻnalishining yoʻqolishi, molekulyar qadoqlanishning kamayishi, tutamlar tartibsizligi, oshgan oʻtkazuvchanlik va kamaygan viskoelastik retardatsiya.
3. Kech TMJOA: Patologik COL1 toʻplanishi va fibrotik qayta tuzilish; oʻtkazuvchanlikning kamayishi, biroq tabiiy matriksning normal viskoelastik funksiyasi toʻliq tiklanmasligi.

Tadqiqot Usuli va Natijalari

Qoʻllangan asosiy usullar

Gistologik namuna olish va boʻyash

Boʻgʻim namunalari %4 paraformaldegid bilan fiksatsiya qilingan va Kawamoto usuli yordamida 4 µm qalinlikdagi kriokesmalar tayyorlangan. Safranin O/Fast Green, toluidin koʻki va H&E boʻyoqlari morfologiya va matriks tuzilishini baholash uchun ishlatilgan. Degeneratsiya ikki koʻr tadqiqotchi tomonidan TMJOA gistologik shikastlanish balli va modifikatsiyalangan Mankin balli bilan baholangan.

pSHG tasvirlash tafsilotlari

pSHG tahlilida maxsus tayyorlangan koʻp-fotonli mikroskop ishlatilgan, qoʻzgʻatish toʻlqin uzunligi 810 nm qilib belgilangan. Chiziqli polarizatsiya 0° dan 180° gacha 12 teng qadamda aylantirilgan. Olingan polarizatsiyaga bogʻliq SHG intensivligidan kollagenning molekulyar qadoqlanish tartibi va asosiy fibril yoʻnalishi hisoblangan.

SEM tayyorlash

Kollagen tarmogʻini yanada aniq koʻrsatish uchun namunalar 100 mM Soerensen fosfat buferida; 1 mg/mL gialuronidaza, 1 mg/mL tripsin va %0,5 natriy azid saqlagan eritmada 37 °C da uch kun ishlov berilgan. Keyin %2,5 glutaraldegid va %1 osmiy tetroksid bilan fiksatsiya, bosqichma-bosqich etanol dehidratatsiyasi, kritik nuqtada quritish va osmiy bilan qoplash amalga oshirilgan. Yuzaki fibrillar SU8600 SEM yordamida 2 kV da tasvirlangan.

Statistik tahlil

Statistik tahlillar GraphPad Prism v11.0.2 yordamida bajarilgan. Mustaqil biologik takrorlar soni hayvonlar sonini anglatadi; bir hayvondagi takroriy oʻlchovlar taqqoslashdan oldin oʻrtachalashtirilgan. Koʻp vaqt nuqtasi va guruh taqqoslashlarida Tukey post hoc testli ikki yoʻnalishli ANOVA, ikki guruh taqqoslashlarida esa ikki dumli juftlanmagan t-test qoʻllangan. Boshqacha koʻrsatilmagan hollarda ma’lumotlar oʻrtacha ± %95 ishonch oraligʻi koʻrinishida taqdim etilgan va \(P<0{,}05\) ahamiyatli deb qabul qilingan.

Asosiy miqdoriy natijalar

Tadqiqot qoʻllab-quvvatlaydigan xulosalar

• MIA modelida yuzaki fibrotogʻayning viskoelastik funksiyasi kasallikning birinchi haftasida buziladi.
• Bu mexanik buzilish yaqqol fibrotik COL1 toʻplanishidan oldin yuzaga keladi.
• Erta davrda fibril yoʻnalishi, molekulyar qadoqlanish, kollagen tutam tuzilishi va matriks oʻtkazuvchanligi oʻzgaradi.
• COL12A1 va ayrim fibrilni tartibga soluvchi SLRP oilasi a’zolarining ekspressiyasi erta davrda kamayadi.
• Kech fibrotik COL1 toʻplanishi tabiiy tarmoqning normal viskoelastik funksiyasini toʻliq tiklamaydi.
• TMJ fibrotogʻayida erta kasallik mexanikasini baholashda kollagen miqdori kabi kollagen tashkiloti ham muhimdir.

Tadqiqot qoʻllab-quvvatlamaydigan xulosalar

• Natijalar odamlarda erta TMJOA tashxisi uchun klinik jihatdan tasdiqlangan biomarker taqdim etmaydi.
• COL12A1 TMJOA kasalligini boshlashi sababiy jihatdan isbotlanmagan.
• COL12A1 darajasini oshirish TMJOA kasalligini davolashi koʻrsatilmagan.
• MIA modeli odamlardagi TMJOA kasalligining barcha sabablarini ifodalamaydi.
• Erta arxitekturaviy buzilish har bir TMJOA bemorida bir xil vaqt jadvali boʻyicha rivojlanishi koʻrsatilmagan.
• Natijalar bevosita klinik davolash yoki tashxis protokoli emas.

Tadqiqotning cheklovlari

Birinchi cheklov shundaki, qoʻllangan MIA modeli kimyoviy yoʻl bilan induksiya qilingan, tez va boshqariladigan osteoartrit modelidir. Bu yondashuv erta hodisalarning vaqtini aniqlash uchun foydali boʻlsa-da, surunkali mexanik ortiqcha yuklanish, disk buzilishi va inson kasalligining uzoq muddatli tabiiy rivojlanishini toʻliq ifodalamasligi mumkin.

Ikkinchidan, tadqiqot asosan toʻqima va matriks darajasidagi oʻzgarishlarni aniqlaydi. Yuzaki fibrotogʻay qatlamidagi oqsil oʻzgarishlari tasdiqlangan boʻlsa-da, ayni modelda yuqori rezolyutsiyali hujayra turi yoki fazoviy transkriptom tahlilini oʻtkazish turli hujayra populyatsiyalarining hissasini yanada aniq koʻrsatishi mumkin.

Uchinchidan, Col12a1 uchun toʻgʻridan-toʻgʻri genetik funksiyani yoʻqotish yoki funksiyani kuchaytirish tajribasi bajarilmagan. Shuning uchun tuzilmaviy, mexanik va molekulyar natijalar oʻrtasidagi kuchli vaqt mosligiga qaramay, aniq molekulyar sababiylik hali oʻrnatilmagan.

Manba va Usul Haqida Izoh

Asl sarlavha:Native collagen architecture shapes viscoelastic function during early temporomandibular joint fibrocartilage degeneration

Mualliflar: Ruyu Han, Lu Chen, Jingrui Hu, Jingxiao Zhong, Li Zhou, Takashi Takaki, Chie Watanabe, Peter Winlove, Joo-Ri Kim-Kaneyama, Reina Tanaka, Junning Chen, Jun Zhou va Yo Shibata.

Teng hissa qoʻshgan mualliflar: Ruyu Han va Lu Chen.

Mas’ul mualliflar: Junning Chen, Jun Zhou va Yo Shibata.

Asosiy muassasalar: Showa Medical University Graduate School of Dentistry; Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital; University of Exeter; University of Sydney; Showa Medical University Center for Electron Microscopy; Showa Medical University Institute for Extracellular Matrix Research; University of New South Wales.

Manba turi: Tadqiqot preprinti.

Taqriz holati: Taqrizdan oʻtmagan. Manba PDF hujjatida “This preprint research paper has not been peer reviewed” degan ogohlantirish aniq koʻrsatilgan.

Platforma: SSRN.

SSRN roʻyxat raqami: 7086740.

DOI: Manba hujjatida DOI keltirilmagan.

Eksperimental model: Sakkiz haftalik erkak Sprague–Dawley kalamushlarida bilateral 0,5 mg MIA / 50 µL fiziologik eritma inyeksiyasi bilan hosil qilingan TMJOA modeli; nazorat guruhiga fiziologik eritma qoʻllangan.

Vaqt nuqtalari: 1., 2. va 4. haftalar.

Asosiy usullar: Gistologiya, immunofluoressensiya, immunogistokimyo, mikro-CT, nanoindentatsiya, ikki elementli umumlashtirilgan Kelvin–Voigt modellashtirish, RT-qPCR, pSHG mikroskopiyasi, FRAP va SEM.

Etika: Hayvon tajribalari ARRIVE tamoyillariga muvofiq oʻtkazilgan va Showa Medical University Animal Care and Use Committee tomonidan 225080 havola raqami bilan tasdiqlangan.

Moliyalashtirish: Japan Society for the Promotion of Science (JSPS) KAKENHI Early-Career Scientists grantlari 23K16036 va 26K20230; Engineering and Physical Sciences Research Council (EPSRC) New Investigator Award EP/T008059/1.

Manfaatlar toʻqnashuvi: Mualliflar manfaatlar toʻqnashuvi yoʻqligini bildirgan.

Ma’lumotlarning mavjudligi: Tadqiqotda tahlil qilingan transkriptom ma’lumotlar toʻplamlari Gene Expression Omnibusda GSE207463, GSE276088 va GSE232867 kirish raqamlari bilan ommaga ochiq.

Asosiy uslubiy cheklov: Tadqiqot odamlarda klinik tadqiqot emas, balki kimyoviy yoʻl bilan induksiya qilingan kalamush TMJOA modelidir. COL12A1 bilan erta kollagen tarmogʻi buzilishi oʻrtasida kuchli bogʻliqlik qayd etilgan boʻlsa-da, toʻgʻridan-toʻgʻri genetik sababiylik tajribasi oʻtkazilmagan.