Temporomandibulyar oynaq osteoartritində (TMJOA) mandibulyar kondilin səthi fibroqığırdağındakı təbii tip I kollagen şəbəkəsi oynaq səthinin zamandan asılı yükdaşıma və enerji paylama davranışına töhfə verən təşkilatlanmış ekstrasellulyar matriks arxitekturasıdır. Bu preprint tədqiqat MIA ilə yaradılmış siçovul TMJOA modelində erkən mexaniki pozulmanın kollagen miqdarındakı nəzərəçarpan fibrotik artımdan əvvəl başlaya bildiyini göstərir. Nanoindentasiya, polyarizasiya-həllolunmalı ikinci harmonik generasiya mikroskopiyası (pSHG), skanedici elektron mikroskopiyası (SEM), flüoresans fotobleçinqindən sonra bərpa (FRAP), immunboyama və gen ekspressiyası analizləri birlikdə tətbiq edildikdə xəstəliyin ilk həftəsində uzun zaman miqyaslı viskoelastik retardasiyanın azaldığı, kollagen fibrillərinin düzülüşünün pozulduğu, molekulyar qablaşdırma nizamının zəiflədiyi, kollagen dəstələrinin birləşərək nizamsızlaşdığı və matriks keçiriciliyinin artdığı müşahidə edilmişdir. Bunun əksinə, nəzərəçarpan patoloji COL1 toplanması daha gec mərhələdə meydana çıxmışdır. COL12A1 ekspressiyasının erkən azalması da fibril təşkilatlanmasının pozulması ilə əlaqəli namizəd molekulyar xüsusiyyət kimi müəyyən edilmişdir. Nəticələr erkən TMJOA zamanı “daha çox, yoxsa daha az kollagen” sualından əvvəl təbii kollagen şəbəkəsinin necə təşkil olunduğunun mexaniki baxımdan kritik ola biləcəyini düşündürür; lakin tədqiqat heyvan modelinə əsaslanır və COL12A1 üçün səbəbiyyət birbaşa genetik müdaxilə ilə göstərilməmişdir.

Temporomandibulyar oynaq qığırdağı niyə digər oynaq qığırdaqlarından fərqlənir?

Mandibulyar kondil qığırdağı (mandibular condylar cartilage, MCC) diz kimi bir çox sinovial oynaqdakı hialin qığırdaqdan struktur baxımından fərqlənir. MCC strukturunun oynaq səthinə baxan səthi fibroqığırdaq (superficial fibrocartilage, SF) təbəqəsi sıx şəkildə təşkil olunmuş tip I kollagen (COL1) ehtiva etdiyi halda, daha dərində yerləşən artikulyar qığırdaq təbəqəsi tip II kollagen və qlikozaminoqlikan baxımından daha zəngindir.

Mənbə tədqiqatında sağlam MCC dörd əsas struktur şəklində təsvir edilir: səthi fibroqığırdaq (SF), proliferativ təbəqə (PF), artikulyar qığırdaq (AC) və subxondral sümük. Histoloji və ikinci harmonik generasiya görüntüləri COL1 ilə zəngin səthi təbəqənin sıx və istiqamətlənmiş kollagen dəstələrindən ibarət olduğunu göstərir.

Bu səthi şəbəkə yalnız biokimyəvi struktur deyil. O, oynaq səthinin deformasiyaya müqavimət göstərməsinə, yükü paylamasına, sürtünməni azaltmasına və zamandan asılı mexaniki cavab yaratmasına töhfə verir. Buna görə COL1 miqdarı dəyişməsə belə, fibrillərin istiqaməti, aralıqları, qablaşdırılması və dəstə nizamı pozulduqda toxumanın funksiyası dəyişə bilər.

Erkən TMJOA Zamanı Əsas Dəyişən Kollagen Miqdarıdır, yoxsa Kollagen Arxitekturası?

Bu tədqiqatın məlumatları MIA ilə induksiya olunan erkən TMJOA modelinin ilk həftəsində nəzərəçarpan xalis COL1 toplanmasından əvvəl təbii COL1 şəbəkəsinin arxitekturasında pozulma yarandığını dəstəkləyir. İlk həftədə COL1 siqnalının orta flüoresans intensivliyində əhəmiyyətli artım və Col1a1/Col1a2 transkriptlərində yüksəlmə müşahidə edilmədiyi halda, fibril düzülüşü, molekulyar qablaşdırma, dəstə təşkilatlanması və matriks keçiriciliyi dəyişmişdir; nəzərəçarpan patoloji COL1 toplanması isə daha sonra, xüsusilə ikinci həftədən etibarən ortaya çıxmışdır.

Eksperimental xəstəlik modeli

Tədqiqatçılar səkkiz həftəlik erkək Sprague–Dawley siçovullarının hər iki temporomandibulyar oynağına 50 µL fizioloji məhlulda 0,5 mg monosodium yodoasetat (MIA) yeridərək TMJOA modeli yaratmışlar. Nəzarət heyvanlarına yalnız fizioloji məhlul tətbiq edilmişdir. Struktur, mexaniki və molekulyar dəyişikliklər birinci, ikinci və dördüncü həftələrdə qiymətləndirilmişdir.

Təcrübələr ARRIVE təlimatlarına uyğun aparılmış və Showa Medical University Animal Care and Use Committee tərəfindən 225080 istinad nömrəsi ilə təsdiqlənmişdir.

Histologiya və mikro-CT ilə xəstəliyin irəliləməsi

Mikro-CT müayinəsində MIA tətbiq edilən oynaqlarda proqressiv subxondral sümük eroziyası müşahidə edilmişdir. Histoloji analizlərdə isə modifikasiya olunmuş Mankin balı və TMJOA histoloji zədələnmə dərəcəsi birinci həftədən etibarən yüksəlmişdir.

Səthi fibroqığırdaq təbəqəsinin qalınlığı ilk həftədə artmış; hüceyrələrdə böyümə, yumrulaşma və səthdə qruplaşma müşahidə edilmişdir. İkinci və dördüncü həftələrdə SF təbəqəsi qalın qalmağa davam etmiş, lakin hüceyrə itkisinə görə hiposellulyar görünüş almışdır.

Nanoindentasiya ilə zamandan asılı mexaniki davranış

Təzə mandibulyar kondil səthləri 50 µm diametrli yastı uclu indentordan istifadə edən TI 950 TriboIndenter sistemi ilə sınaqdan keçirilmişdir. Nümunələr PBS daxilində 22 ± 1 °C-də hidratlaşdırılmış vəziyyətdə saxlanılmışdır. Hər nümunə üçün kondilin mərkəzi səthindən üçdən çox indentasiya ölçümü götürülmüş və hər heyvan üzrə orta dəyər təhlil edilmişdir.

Creep protokolunda yük sürətlə 5 µN-a qaldırılmış, 20 saniyə sabit saxlanmış və sonra sürətlə aradan qaldırılmışdır. Sabit yük dövründə zamandan asılı deformasiya iki elementli ümumiləşdirilmiş Kelvin–Voigt modeli ilə qiymətləndirilmişdir.

Modeldən iki retardasiya müddəti \(\tau_1\) və \(\tau_2\), iki özlülük əmsalı \(\eta_1\) və \(\eta_2\), həmçinin elastik komponentlər \(E_1\) və \(E_2\) əldə edilmişdir. Uzun zaman miqyaslı ikinci komponent üçün:

\[ \tau_2=\frac{\eta_2}{E_2} \]

əlaqəsindən istifadə olunur. Burada \(\eta_2\) toxuma matriksinin daha yavaş özlü enerji paylama davranışı ilə, \(E_2\) isə eyni mexaniki komponentin elastik müqaviməti ilə əlaqəlidir. \(\tau_2\)-nin azalması toxumanın yavaş zaman miqyaslı yük altında normal viskoelastik gecikmə davranışını daha tez itirdiyini göstərir.

Viskoelastik Retardasiya Müddəti Nəyi Göstərir?

Viskoelastik retardasiya müddəti viskoelastik toxumanın tətbiq olunan mexaniki yük altında zamandan asılı deformasiyasının xarakterik sürətini ifadə edir. Bu tədqiqatda xüsusilə \(\tau_2=\eta_2/E_2\) ilə müəyyən edilən uzun zaman miqyaslı komponentin azalması səthi fibroqığırdağın yük altında yavaş enerji paylama qabiliyyətinin erkən TMJOA zamanı pozulduğunu göstərir; tədqiqatçılar bu dəyişikliyin əsasən \(\eta_2\)-dəki proporsional olaraq daha böyük azalma ilə əlaqəli olduğunu bildirmişlər.

Birinci həftədəki mexaniki nəticə

Birinci həftədə azaldılmış elastik modul \(E_r\) MIA və fizioloji məhlul qrupları arasında oxşar qalmışdır. Birinci Kelvin–Voigt komponentinə aid \(\tau_1\), \(\eta_1\) və \(E_1\) parametrlərində də əhəmiyyətli fərq bildirilməmişdir.

Bunun əksinə, uzun zaman miqyaslı ikinci komponentin \(\tau_2\) dəyəri nəzərəçarpacaq dərəcədə azalmışdır. Orta \(\tau_2\) fizioloji məhlul qrupunda təxminən 44 saniyədən MIA qrupunda təxminən 23 saniyəyə düşmüş və fərq statistik baxımdan əhəmiyyətli olmuşdur (\(P=0{,}010\)).

Həm \(\eta_2\), həm də \(E_2\) azalmışdır, lakin \(\eta_2\)-dəki proporsional azalma daha böyük olduğuna görə \(\tau_2\)-dəki azalmanı əsasən özlü enerji paylama qabiliyyətinin itirilməsi istiqamətləndirmişdir. Oxşar azalma ikinci həftədə əhəmiyyətli şəkildə davam etmiş və dördüncü həftədə eyni istiqamətdə meyl qorunmuşdur.

COL1 miqdarı niyə ilk həftədə təkbaşına izah edici deyil?

İmmunflüoresans analizində sağlam oynaqda COL1 əsasən SF və PF–AC keçid zonasındakı, COL2 isə daha dərindəki artikulyar qığırdaq sahəsində müşahidə edilmişdir.

MIA tətbiqindən bir həftə sonra səthi təbəqənin genişlənməsinə bağlı olaraq COL1 siqnalının məkan üzrə paylanması dəyişmiş, lakin orta flüoresans intensivliyində əhəmiyyətli artım aşkar edilməmişdir. COL1 baxımından müsbət sahə azalma meyli göstərmişdir (\(P=0{,}13\)). Eyni dövrdə Col1a1 və Col1a2 gen ekspressiyalarında da artım müşahidə olunmamışdır.

İkinci və dördüncü həftələrdə isə COL1 baxımından müsbət sahə və orta flüoresans intensivliyi artmış, ikinci həftədə Col1a1 və Col1a2 ekspressiyaları da yüksəlmişdir. Beləliklə, nəzərəçarpan fibrotik COL1 toplanması mexaniki pozulmanın başladığı ilk həftədən sonra meydana çıxır.

LOX tapıntısı və klassik fibroz modeli ilə fərq

Hialin qığırdaq osteoartritində LOX vasitəli kollagen çarpaz bağlanması matriksin sərtləşməsi və fibrotik çevrilmə ilə əlaqələndirilə bilər. Lakin bu TMJOA modelində birinci həftədə LOX zülalında nəzərəçarpan artım müşahidə olunmamış, Lox transkript səviyyəsi MIA qrupunda azalmışdır.

Bu tapıntı erkən TMJ fibroqığırdaq pozulmasının klassik “LOX artımı → çarpaz bağlanma → matriks sərtləşməsi → fibroz” modeli ilə tam izah edilə bilməyəcəyini göstərir.

pSHG ilə kollagen fibril istiqamətlənməsi və molekulyar qablaşdırma

Polyarizasiya-həllolunmalı ikinci harmonik generasiya (pSHG) mikroskopiyası kollagen fibrillərinin istiqamətlənməsi və molekulyar nizamı haqqında optik məlumat vermişdir. Sağlam nəzarət qrupunda səthi təbəqədəki fibrillər əsasən oynaq səthinə paralel istiqamətlənmişdir.

MIA qrupunda fibrillərin 30°–60° və 60°–90° intervallarına keçdiyi, yəni səthdən yayınmanın artdığı müşahidə edilmişdir. Molekulyar qablaşdırma göstəricisi olan \(I_2\) paylanmasının pik dəyəri təxminən 0,275-dən 0,20-yə keçmişdir. Tədqiqatçılar bunu kollagen molekullarının nizamlı qablaşdırılmasının azalması kimi şərh edirlər.

SEM ilə fibril dəstələrinin birbaşa görünüşü

SEM görüntülərində fizioloji məhlul nəzarət qrupu sıx və nizamlı fibrilyar şəbəkə göstərdiyi halda, MIA nümunələrində daha kobud, qruplaşmış, dolaşıq və qıvrılmış fibril dəstələri müşahidə edilmişdir. Hüceyrə qrupları ilə əlaqəli olduğu düşünülən boşluğabənzər strukturlar və səth davamlılığındakı pozulmalar da bildirilmişdir.

Bu struktur pozuntuları pSHG ilə ölçülən fibril istiqamətinin itməsi və molekulyar qablaşdırmanın azalması ilə eyni bölgələrdə uyğunluq göstərmişdir.

FRAP ilə matriks keçiriciliyi

FRAP analizində 70 kDa flüoreseinlə işarələnmiş dekstran qığırdaq matriksində tarazlaşdırılmış, seçilmiş sahə 488 nm lazerlə fotobleçinqə məruz qoyulmuş və flüoresans bərpası zaman ərzində izlənilmişdir.

Bərpanın yarımzamanı \(t_{1/2}\), molekulların matriks daxilində nə qədər sürətlə yenidən paylandığını göstərən ölçüdür. İlk həftədə MIA qrupunun \(t_{1/2}\) dəyəri nəzarət qrupundan əhəmiyyətli dərəcədə daha qısa olmuşdur (\(P=0{,}041\)). Bu nəticə artmış matriks keçiriciliyi ilə uyğundur.

Dördüncü həftədə isə vəziyyət əksinə dönmüş və MIA qrupunda \(t_{1/2}\) nəzarət qrupu ilə müqayisədə daha uzun olmuşdur (\(P=0{,}042\)). Tədqiqatçılar bu gec mərhələ nəticəsini fibrotik yenidənqurma ilə müşayiət olunan azalmış keçiriciliklə əlaqələndirmişlər.

Gec Mərhələdə Daha Çox COL1 Mexaniki Funksiyanı Bərpa Edirmi?

Bu tədqiqatda xeyr. Dördüncü həftədəki fibrotik yenidənqurmada COL1 miqdarı artsa və erkən mərhələdəki yüksək keçiricilik meyli əksinə dönsə də, uzun zaman miqyaslı viskoelastik retardasiya başlanğıcdakı sağlam səviyyəyə qayıtmamışdır. Bu tapıntı sonradan toplanan patoloji COL1 toplanmasının təbii kollagen şəbəkəsinin özünəməxsus fibril təşkilatlanmasını və zamandan asılı mexaniki funksiyasını avtomatik olaraq yenidən yaratmadığını düşündürür.

COL12A1 niyə ön plana çıxdı?

Tədqiqatçılar kollagen fibril təşkilatlanması ilə əlaqəli genləri müxtəlif heyvan növlərindəki TMJOA transkriptom məlumat dəstlərində müqayisə etmişlər. Col12a1 siçovul və siçan məlumat dəstlərində ardıcıl şəkildə azalan genlərdən biri olmuşdur; bildirilən log2FC dəyərləri müvafiq olaraq təxminən −0,31 və −0,32-dir.

Səthi təbəqənin ayrıca təhlil edildiyi dovşan məlumat dəstində Col12a1 araşdırılan genlər arasında daha güclü dəyişiklik göstərmişdir: log2FC təxminən −1,65 və \(P<0{,}05\).

Öz MIA modelindəki RT-qPCR və immunflüoresans nəticələri də birinci həftədə Col12a1/COL12A1 azalmasını dəstəkləmişdir. COL12A1 zülalının azalmasının dördüncü həftədə də davam etməsi fibril tənzimləyici proqramdakı pozulmanın gec mərhələdə sürə biləcəyini düşündürür.

COL12A1 Erkən TMJOA üçün Sübut Edilmiş Səbəbiyyət Markeri Dirmi?

Xeyr. Tədqiqat COL12A1 azalmasını erkən səthi fibroqığırdaq kollagen şəbəkəsinin pozulması ilə uyğun molekulyar xüsusiyyət və namizəd marker kimi göstərir, lakin birbaşa Col12a1 funksiya-itkisi və ya funksiya-qazanması təcrübəsi aparılmamışdır. Buna görə COL12A1 azalmasının TMJOA zamanı arxitektura və ya mexaniki pozulmanı təkbaşına başladığı, yaxud onun düzəldilməsinin xəstəliyin qarşısını alacağı bu tədqiqatla sübut edilməmişdir.

SLRP ailəsindəki dəyişikliklər

Kiçik leysinlə zəngin proteoqlikanlar (SLRP) fibril diametrini, lateral böyüməni, aralıqları və kollagen qablaşdırılmasını tənzimləyə bilər. Tədqiqatda Fmod və Lum birinci həftədə Col12a1 ilə birlikdə azalmışdır.

Sinif I SLRP qrupunda isə zamandan asılı fərqli bir nümunə müşahidə edilmişdir. Dcn birinci həftədə artmış, ikinci həftədə azalmışdır; Bgn isə həm birinci, həm də ikinci həftədə yüksəlmişdir. Tədqiqatçılar ikinci həftədə Dcn azalması ilə davam edən Bgn artımını fibrotik yenidənqurmaya keçidlə əlaqəli molekulyar nümunə kimi şərh edirlər.

Erkən və gec xəstəlik mərhələləri üçün təklif olunan model

Mənbənin təklif etdiyi iş modeli üç mərhələni ayırır:

1. Sağlam TMJ: Səthə paralel, yaxşı təşkil olunmuş təbii COL1 şəbəkəsi; normal fibril tənzimləyiciləri; nəzarətli keçiricilik və normal viskoelastik enerji paylanması.
2. Erkən TMJOA: COL1 miqdarında nəzərəçarpan fibrotik artım olmadan fibril istiqamətinin itməsi, molekulyar qablaşdırmanın azalması, dəstə nizamsızlığı, artmış keçiricilik və azalmış viskoelastik retardasiya.
3. Gec TMJOA: Patoloji COL1 toplanması və fibrotik yenidənqurma; keçiriciliyin azalması, lakin təbii matriksin normal viskoelastik funksiyasının tam bərpa olunmaması.

Tədqiqatın Metodu və Nəticələri

İstifadə olunan əsas metodlar

Histoloji nümunələmə və boyama

Oynaq nümunələri %4 paraformaldehidlə fiksasiya edilmiş və Kawamoto metodundan istifadə etməklə 4 µm qalınlığında kriyokəsiklər hazırlanmışdır. Safranin O/Fast Green, toluidin mavisi və H&E boyaları morfologiya və matriks quruluşu üçün istifadə edilmişdir. Degenerasiya iki kor tədqiqatçı tərəfindən TMJOA histoloji zədələnmə balı və modifikasiya olunmuş Mankin balı ilə qiymətləndirilmişdir.

pSHG görüntüləmə təfərrüatları

pSHG analizində xüsusi hazırlanmış çoxfotonlu mikroskop istifadə edilmiş, oyadılma dalğa uzunluğu 810 nm olaraq təyin edilmişdir. Xətti polyarizasiya 0° ilə 180° arasında 12 bərabər addımda fırladılmışdır. Əldə olunan polyarizasiyadan asılı SHG intensivliyindən kollagenin molekulyar qablaşdırma nizamı və əsas fibril istiqaməti hesablanmışdır.

SEM hazırlığı

Kollagen şəbəkəsini daha aydın göstərmək üçün nümunələr 100 mM Soerensen fosfat buferində; 1 mg/mL hialuronidaza, 1 mg/mL tripsin və %0,5 natrium azid ehtiva edən məhlulla 37 °C-də üç gün işlənmişdir. Daha sonra %2,5 qlutaraldehid və %1 osmium tetroksid fiksasiyası, pilləli etanol dehidratasiyası, kritik nöqtədə qurutma və osmium örtükləmə tətbiq edilmişdir. Səth fibrilləri SU8600 SEM ilə 2 kV-da görüntülənmişdir.

Statistik analiz

Statistik təhlillər GraphPad Prism v11.0.2 ilə aparılmışdır. Müstəqil bioloji təkrarların sayı heyvan sayını ifadə edir; eyni heyvandakı təkrarlanan ölçmələr müqayisədən əvvəl orta hesablanmışdır. Çoxsaylı zaman nöqtəsi və qrup müqayisələrində Tukey post hoc testli iki istiqamətli ANOVA, iki qrup müqayisələrində isə iki quyruqlu cütləşdirilməmiş t-testi istifadə edilmişdir. Əksi göstərilmədikdə məlumatlar orta ± %95 etibar intervalı şəklində təqdim edilmiş və \(P<0{,}05\) əhəmiyyətli qəbul edilmişdir.

Əsas kəmiyyət nəticələri

Tədqiqatın dəstəklədiyi

• MIA modelində səthi fibroqığırdağın viskoelastik funksiyası xəstəliyin ilk həftəsində pozulur.
• Bu mexaniki pozulma nəzərəçarpan fibrotik COL1 toplanmasından əvvəl meydana çıxır.
• Erkən mərhələdə fibril istiqamətlənməsi, molekulyar qablaşdırma, kollagen dəstə quruluşu və matriks keçiriciliyi dəyişir.
• COL12A1 və bəzi fibril tənzimləyici SLRP ailəsi üzvlərinin ekspressiyası erkən mərhələdə azalır.
• Gec fibrotik COL1 toplanması təbii şəbəkənin normal viskoelastik funksiyasını tam bərpa etmir.
• TMJ fibroqığırdağında erkən xəstəlik mexanikasını qiymətləndirərkən kollagen miqdarı qədər kollagen təşkilatlanması da vacibdir.

Tədqiqatın dəstəkləmədiyi

• Nəticələr insanlarda erkən TMJOA diaqnozu üçün klinik olaraq təsdiqlənmiş biomarker təqdim etmir.
• COL12A1 molekulunun TMJOA xəstəliyini başlatdığı səbəbiyyət baxımından sübut edilməmişdir.
• COL12A1 səviyyəsini artırmağın TMJOA xəstəliyini müalicə edəcəyi göstərilməmişdir.
• MIA modeli insanlarda TMJOA xəstəliyinin bütün səbəblərini təmsil etmir.
• Erkən arxitektura pozulmasının hər TMJOA xəstəsində eyni zaman xətti ilə irəlilədiyi göstərilməmişdir.
• Nəticələr birbaşa klinik müalicə və ya diaqnostika protokolu deyil.

Tədqiqatın məhdudiyyətləri

Birinci məhdudiyyət istifadə olunan MIA modelinin kimyəvi yolla induksiya edilmiş, sürətli və idarə oluna bilən osteoartrit modeli olmasıdır. Bu yanaşma erkən hadisələrin zamanlamasını aydınlaşdırmaq üçün faydalı olsa da, xroniki mexaniki həddindən artıq yüklənməni, disk pozğunluğunu və insan xəstəliyinin uzunmüddətli təbii inkişafını tam şəkildə təmsil etməyə bilər.

İkincisi, tədqiqat əsasən toxuma və matriks səviyyəsindəki dəyişiklikləri aydınlaşdırır. Səthi fibroqığırdaq təbəqəsindəki zülal dəyişiklikləri təsdiqlənsə də, eyni modeldə daha yüksək ayırdetməli hüceyrə tipi və ya məkan transkriptomu analizinin aparılması müxtəlif hüceyrə populyasiyalarının töhfəsini daha aydın göstərə bilər.

Üçüncüsü, Col12a1 üçün birbaşa genetik funksiya-itkisi və ya funksiya-qazanması təcrübəsi aparılmamışdır. Buna görə struktur, mexaniki və molekulyar nəticələr arasındakı güclü zaman uyğunluğuna baxmayaraq, dəqiq molekulyar səbəbiyyət hələ müəyyən edilməmişdir.

Mənbə və Metod Qeydi

Özgün başlıq:Native collagen architecture shapes viscoelastic function during early temporomandibular joint fibrocartilage degeneration

Müəlliflər: Ruyu Han, Lu Chen, Jingrui Hu, Jingxiao Zhong, Li Zhou, Takashi Takaki, Chie Watanabe, Peter Winlove, Joo-Ri Kim-Kaneyama, Reina Tanaka, Junning Chen, Jun Zhou və Yo Shibata.

Bərabər töhfəli müəlliflər: Ruyu Han və Lu Chen.

Məsul müəlliflər: Junning Chen, Jun Zhou və Yo Shibata.

Əsas qurumlar: Showa Medical University Graduate School of Dentistry; Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital; University of Exeter; University of Sydney; Showa Medical University Center for Electron Microscopy; Showa Medical University Institute for Extracellular Matrix Research; University of New South Wales.

Mənbə növü: Tədqiqat preprinti.

Resenziya statusu: Resenziyadan keçməmişdir. Mənbə PDF açıq şəkildə “This preprint research paper has not been peer reviewed” xəbərdarlığını daşıyır.

Platforma: SSRN.

SSRN qeydiyyat nömrəsi: 7086740.

DOI: Mənbə sənəddə DOI bildirilməmişdir.

Eksperimental model: Səkkiz həftəlik erkək Sprague–Dawley siçovullarında bilateral 0,5 mg MIA / 50 µL fizioloji məhlul inyeksiyası ilə yaradılmış TMJOA modeli; nəzarət qrupuna fizioloji məhlul tətbiq edilmişdir.

Zaman nöqtələri: 1., 2. və 4. həftələr.

Əsas metodlar: Histologiya, immunflüoresans, immunhistokimya, mikro-CT, nanoindentasiya, iki elementli ümumiləşdirilmiş Kelvin–Voigt modelləşdirilməsi, RT-qPCR, pSHG mikroskopiyası, FRAP və SEM.

Etika: Heyvan təcrübələri ARRIVE prinsiplərinə uyğun aparılmış və Showa Medical University Animal Care and Use Committee tərəfindən 225080 istinadı ilə təsdiqlənmişdir.

Maliyyələşdirmə: Japan Society for the Promotion of Science (JSPS) KAKENHI Early-Career Scientists qrantları 23K16036 və 26K20230; Engineering and Physical Sciences Research Council (EPSRC) New Investigator Award EP/T008059/1.

Maraqların toqquşması: Müəlliflər maraqların toqquşmasının olmadığını bildirmişlər.

Məlumatların əlçatanlığı: Tədqiqatda təhlil edilən transkriptom məlumat dəstləri Gene Expression Omnibus-da GSE207463, GSE276088 və GSE232867 giriş nömrələri ilə ictimaiyyət üçün açıqdır.

Əsas metodoloji məhdudiyyət: Tədqiqat insanlarda klinik tədqiqat deyil, kimyəvi yolla induksiya edilmiş siçovul TMJOA modelidir. COL12A1 ilə erkən kollagen şəbəkəsinin pozulması arasında güclü əlaqə bildirilsə də, birbaşa genetik səbəbiyyət təcrübəsi aparılmamışdır.