Яке аз роҳҳои умумии ниҳоии пешрафти бемории музмини гурда то норасоии гурда фибрози гурда мебошад. Ҳангоми фиброз бофтаи муқаррарии гурда тадриҷан бо коллаген ва дигар ҷузъҳои матритсаи берунҳуҷайравӣ иваз мешавад; меъмории функсионалии бофта вайрон мегардад ва қобилияти филтратсионии гурда коҳиш меёбад. Ин равандро танҳо бо фаъолияти аз ҳад зиёди фибробластҳо шарҳ додан мумкин нест. Метаболизми ҳуҷайра, ҳуҷайраҳои найчаҳои гурда, ҳуҷайраҳои масуният ва сигналҳои илтиҳобӣ микро муҳите ташкил медиҳанд, ки якдигарро тақвият мекунанд.

Таҳқиқи баррасишуда механизмеро пешниҳод мекунад, ки чӣ гуна тағйироти метаболикӣ дар осеби музмини гурда ба ҷавоби дарозмуддати масуният ва фиброз табдил меёбанд. Ба гуфтаи муҳаққиқон, дар гурдаи осебдида роҳи биосинтези гексозамин, яъне HBP, фаъол шуда, истеҳсоли UDP-GlcNAc-ро дар дохили ҳуҷайра зиёд мекунад. UDP-GlcNAc субстрати асосӣ барои илова кардани O-пайвасти N-ацетилглюкозамин ба сафедаҳо мебошад.

Механизми умумии пешниҳодшудаи таҳқиқро чунин ҷамъбаст кардан мумкин аст:

\[ \mathrm{HBP}\uparrow \rightarrow \mathrm{UDP\!-\!GlcNAc}\uparrow \rightarrow \mathrm{STAT3\!-\!T717\ O\!-\!GlcNAc}\uparrow \rightarrow \mathrm{SMURF1\ bağlanması}\downarrow \rightarrow \mathrm{STAT3\ yıkımı}\downarrow \]

\[ \mathrm{STAT3\ kararlılığı}\uparrow \rightarrow \mathrm{CXCL10}\uparrow \rightarrow \mathrm{CD4^+\ T\ hücresi\ göçü}\uparrow \rightarrow \mathrm{Th17/IL\!-\!17A}\uparrow \rightarrow \mathrm{böbrek\ fibrozisi}\uparrow \]

Дар маълумоти бемории музмини гурдаи инсон тағйири равшани экспрессияи OGT ва OGA мушоҳида нашудааст, аммо афзоиши ферментҳои асосии HBP — GFPT1, GNPNAT1, PGM3 ва UAP1 — гузориш шудааст. Дар биопсияҳои гурдаи инсон ва дар ду модели алоҳидаи муш O-GlcNAc-и умумии сафедаҳо зиёд буд.

Ду модели фиброз, ки дар мушҳо истифода шуданд, чунинанд:

• Модели обструксияи яктарафаи уретер, ки бо бастани уретер ба вуҷуд оварда шудааст — UUO
• Модели нефропатияи кислотаи фолат, ки бо тазриқи 250 mg/kg кислотаи фолат ба вуҷуд оварда шудааст — FA

DON, ки барои пахш кардани ферменти маҳдудкунандаи суръати HBP — GFPT1 — истифода шуд, сатҳи O-GlcNAc-ро дар гурдаи муш паст кард; нишондиҳандаҳои фиброз ба монанди коллаген I ва α-SMA, ҷамъшавии гистологии коллаген ва инфилтратсияи ҳуҷайраҳои илтиҳобиро кам намуд. Беҳбудӣ дар креатинини хуноба ва нитрогени мочевинаи хун низ гузориш шуд.

Дар таҳлили пайдарпайии RNA 97 ген муайян карда шуд, ки бо осеби гурда боло мерафтанд ва бо табобати DON боз коҳиш меёфтанд. Ин генҳо бо фаъолияти ретсепторҳои хемокин, муҳоҷирати ҳуҷайраҳои T ва ҷавобҳои масуният алоқаманд буданд. Махсусан меҳвари CXCL10–CXCR3 ҳамчун пайванди марказӣ барои ҷалби ҳуҷайраҳои CD4+ T ба гурда баромад.

Дар таҳқиқ баланд кардани сатҳи O-GlcNAc экспрессияи CXCL10-ро дар ҳуҷайраҳои найчаи гурда зиёд кард. Истифодаи антагонисти CXCR3 — AMG487 — инфилтратсияи ҳуҷайраҳои CD4+ T, нишондиҳандаҳои фиброз ва бадшавии фаъолияти гурдаро кам кард.

Зинаи дуюми масуният ҳуҷайраҳои Th17 мебошанд. Бо цитометрияи ҷараён ҳиссаи ҳуҷайраҳои Th17-и истеҳсолкунандаи IL-17A дар байни ҳуҷайраҳои зиндаи CD4+ T-и гурда чен карда шуд. Пахш кардани HBP бо DON ҳиссаи Th17 ва сатҳи IL-17A-ро дар гурда кам кард. Безараргардонии мустақими IL-17 бо секукинумаб низ дар модели ҳайвонот осеб ва фиброзро сабук намуд.

Таҷрибаҳои молекулавӣ сафедаи STAT3-ро дар маркази ин тағйироти метаболикӣ ва иммунологӣ қарор медиҳанд. Муҳаққиқон гузориш карданд, ки илова шудани O-GlcNAc ба мавқеи треонини 717, яъне T717-и STAT3, умри сафедаро дар ҳуҷайра дароз мекунад. Ин модификатсия сатҳи гении STAT3-ро зиёд накарда, аз вайроншавии сафеда пешгирӣ кардааст.

Пешниҳод мешавад, ки дар шароити муқаррарӣ E3-убиквитин-лигазаи SMURF1 ба STAT3 пайваста, убиквитиншавӣ ва таҷзияи онро дар протеасома осон мекунад. Вақте ки ба T717 O-GlcNAc илова мешавад, пайвастшавии SMURF1 ба STAT3 кам мешавад, STAT3 камтар убиквитин мешавад ва дар ҳуҷайра муддати дарозтар боқӣ мемонад.

\[ \mathrm{STAT3 + SMURF1} \rightarrow \mathrm{STAT3\!-\!Ub_n} \rightarrow \mathrm{proteazomal\ yıkım} \]

Модификатсияи O-GlcNAc зинаи аввали ин занҷирро манъ карда, STAT3-ро устувор мекунад. Дар мутанти STAT3-T717A, ки мавқеи T717 ба аланин иваз шудааст, кӯтоҳ шудани нимумри сафеда ва зиёд шудани убиквитиншавӣ гузориш шудааст.

Сипас муҳаққиқон барои моддаҳое, ки метавонанд мавқеи T717-и STAT3-ро ҳадаф гиранд, скрининги виртуалии сохторбунёд анҷом доданд. 3.158 модда аз китобхонае, ки ҳамчун “китобхонаи пайвастагиҳои тасдиқшудаи FDA” тавсиф шудааст, скрининг шуданд; 38 номзад интихоб шуда, инозитол никотинат, саквинавир ва рутин гидрат, ки баландтарин ҷойҳоро гирифта буданд, таҷрибавӣ санҷида шуданд.

Аз ин се номзад танҳо рутин гидрат сатҳи O-GlcNAc-и STAT3 ва сатҳи сафедаи STAT3-ро коҳиш додааст. Рутин гидрат mRNA-и STAT3-ро тағйир надода, аммо экспрессияи CXCL10-ро кам кардааст. Набудани ҳамин таъсир дар STAT3-и дорои мутасияи T717 аз ҷониби муаллифон ҳамчун далели дастгирии механизми хоси T717 тафсир шудааст.

Дар мушҳои UUO додани 5 mg/kg/gün рутин гидрат аз роҳи даҳон сатҳи STAT3 ва STAT3-и фосфорилшуда, инфилтратсияи ҳуҷайраҳои CD4+ T, дифференсиатсияи Th17, нишондиҳандаҳои осеби гурда ва фибрози гистологиро коҳиш дод. Беҳбудӣ дар креатинини хуноба ва BUN низ гузориш шуд.

Ин натиҷаҳо нишон намедиҳанд, ки рутин гидрат дар одамон бемории музмини гурдаро табобат мекунад. Бозёфтҳо ба фарҳанги ҳуҷайра ва гурӯҳҳои хурди ҳайвонот асос ёфтаанд. Ҷаббиш, вояи мувофиқ, бехатарӣ дар беморони гурда, заҳролудии дарозмуддат ва самаранокии клиникии он дар одамон таҳқиқ нашудааст.

Мушкилоти асосии таҳқиқ чист?

Бемории музмини гурда метавонад сабабҳои ибтидоии гуногун дошта бошад: гипертония, бемориҳои метаболикӣ, осеби иммунологӣ, таъсири заҳрнок ё осебҳои такрории шадиди гурда. Бо вуҷуди фарқияти сабабҳои ибтидоӣ, дар бемории пешрафта як анҷоми умумии патологӣ пайдо мешавад: фибрози гурда.

Ҳангоми фиброз:

• бофтаи муқаррарии гурда осеб мебинад,
• ҳуҷайраҳои монанд ба миофибробласт фаъол мешаванд,
• коллаген ва матритсаи берунҳуҷайравӣ ҷамъ мешаванд,
• найчаҳои гурда ва атрофи рагҳо аз нав сохта мешаванд,
• шумораи нефронҳои функсионалӣ кам мешавад.

Механизмҳои маълуми илтиҳобӣ ва гемодинамикӣ танҳо қисми ин равандро шарҳ медиҳанд. Холигии асосие, ки таҳқиқ ба он равона шудааст, ин аст, ки тағйироти метаболикии ҳуҷайра чӣ гуна ба ҷавоби устувори масуният табдил меёбад ва ин ҷавоб чӣ гуна фиброзро идома медиҳад.

Роҳи биосинтези гексозамин чист?

Роҳи биосинтези гексозамин як шохаи хурд, вале аз нигоҳи танзимӣ муҳими метаболизми глюкоза мебошад. Он воридоти аз метаболизми глюкоза, глутамин, кислотаҳои равғанӣ ва нуклеотидҳо омадаро якҷо карда, UDP-GlcNAc истеҳсол мекунад.

Ҷараёни содашудаи роҳро барои шарҳи мантиқи таҳқиқ чунин нишон додан мумкин аст:

\[ \mathrm{Fruktoz\!-\!6\!-\!fosfat + Glutamin} \xrightarrow{\mathrm{GFPT1}} \mathrm{Glukozamin\!-\!6\!-\!fosfat} \]

\[ \mathrm{Glukozamin\!-\!6\!-\!fosfat} \xrightarrow{\mathrm{GNPNAT1,\ PGM3,\ UAP1}} \mathrm{UDP\!-\!GlcNAc} \]

Ин муодилаҳо дар мақола ҳамчун як силсилаи ягонаи реаксияҳо дода нашудаанд; онҳо барои фаҳмотар нишон додани тартиби функсионалии ферментҳои HBP оварда шудаанд.

Ферментҳои асосии HBP, ки дар таҳқиқ баррасӣ шуданд, чунинанд:

HBP танҳо роҳи истеҳсоли энергия нест. Он ҳолати ғизоӣ ва стрессии ҳуҷайраро ба сигнали кимиёвӣ табдил медиҳад, ки фаъолияти сафедаҳоро тағйир медиҳад.

Модификатсияи O-GlcNAc чист?

Модификатсияи O-GlcNAc илова шудани як гурӯҳи ягонаи N-ацетилглюкозамин ба пасмондаҳои серин ё треонини сафедаҳои дохилиҳуҷайравӣ мебошад. Монанди фосфорилатсия, ин роҳи зуд ва баргардони танзими сафеда аст.

O-GlcNAc transferase, яъне OGT, гурӯҳи шакарро ба сафеда илова мекунад:

\[ \mathrm{Protein\!-\!OH + UDP\!-\!GlcNAc} \xrightarrow{\mathrm{OGT}} \mathrm{Protein\!-\!O\!-\!GlcNAc + UDP} \]

O-GlcNAcase, яъне OGA, бошад ин гурӯҳро аз сафеда хориҷ мекунад:

\[ \mathrm{Protein\!-\!O\!-\!GlcNAc} \xrightarrow{\mathrm{OGA}} \mathrm{Protein\!-\!OH + GlcNAc} \]

Ин муодилаҳои асосӣ барои шарҳи мантиқи биохимиявии таҳқиқ оварда шудаанд.

Тағйири O-GlcNAc дар сафеда метавонад:

• ҷойгиршавии сафеда дар ҳуҷайра,
• ҳамкории он бо сафедаҳои дигар,
• фаъолият,
• фосфорилатсия,
• убиквитиншавӣ,
• нимумр

-ро тағйир диҳад.

Бозёфти аввалини асосӣ: Мушкилот метавонад бештар ҷараёни субстрат бошад, на миқдори OGT/OGA

Дар маълумоти Nephroseq-и бемории музмини гурдаи инсон гуфта шудааст, ки экспрессияи OGT ва OGA аз гурдаи солим ба таври маънодор фарқ намекунад. Баръакс, экспрессияи GFPT1, GNPNAT1, PGM3 ва UAP1 зиёд буд.

Дар биопсияҳои CKD-и инсон бо иммуногистохимия баланд шудани сатҳи умумии O-GlcNAc қайд шудааст. Дар шарҳи Шакли 1 барои ин таҳлил n = 20 дода шудааст; аммо тақсимоти намунаҳо аз рӯи марҳилаҳои CKD ё гурӯҳҳои назоратии солим дар матни асосӣ муфассал шарҳ дода нашудааст.

Дар моделҳои UUO ва нефропатияи кислотаи фолат низ:

• сатҳҳои mRNA-и ферментҳои HBP зиёд шуданд,
• сатҳҳои сафедаи ферментҳои HBP зиёд шуданд,
• модификатсияи умумии O-GlcNAc баланд шуд,
• тағйири равшани экспрессияи OGT мушоҳида нашуд.

Муаллифон ин намунаи натиҷаҳоро бо афзоиши ҷараёни HBP ва таъминоти субстрати UDP-GlcNAc шарҳ медиҳанд.

Фарқи муҳим: Тағйир накардани экспрессияи OGT ва OGA исбот намекунад, ки фаъолияти каталитикии ин ферментҳо ҳатман бетағйир мондааст. Дар таҳқиқ миқдори OGT/OGA баррасӣ шудааст, аммо дар матни асосӣ ченаки мустақими фаъолияти фермент гузориш нашудааст. Аз ин рӯ, бозёфтҳо HBP-ро ҳамчун шарҳи қавӣ дастгирӣ мекунанд, аммо саҳми эҳтимолии фаъолияти OGT ё OGA-ро комилан рад намекунанд.

Робита бо фаъолияти гурда дар маълумоти инсон

Дар маълумоти инсон гузориш шудааст, ки экспрессияи GFPT1, PGM3 ва GNPNAT1 бо филтратсияи гломерулярии бештар вайроншуда алоқаманд аст. Барои OGT ва OGA ҳамин робита мушоҳида нашуд.

Дар маълумоти инсон баланд будани экспрессияи GFPT1, PGM3 ва GNPNAT1 бо филтратсияи гломерулярии бадтар алоқаманд буд. Барои OGT ва OGA чунин робита дида нашуд.

Дар шарҳи Шакли 2 фаъолияти вайроншудаи гурда чунин таъриф шудааст:

\[ \mathrm{GFR} < 60\ \mathrm{mL/dakika/1{,}73\ m^2} \]

Ин маълумоти инсон мушоҳидавӣ аст. Баланд будани ферментҳои HBP метавонад сабаби бадшавии фаъолияти гурда бошад; осеби гурда метавонад ферментҳои HBP-ро боло барад ё ҳар ду тағйирот аз раванди сеюм сарчашма гиранд. Сабабият бо таҷрибаҳои ҳайвонот ва ҳуҷайраҳо санҷида шудааст.

Модели аввалини ҳайвонот: Обструксияи яктарафаи уретер

Дар мушҳои наринаи BALB/c-и 8–10 ҳафта уретери чап дар ду нуқта баста шуда, байни онҳо бурида шуд. Дар ҳайвоноти назоратӣ ҳамин амали ҷарроҳӣ анҷом дода шуд, аммо уретер баста нашуд. Гурдаҳо ҳафт рӯз пас аз ҷарроҳӣ ҷамъоварӣ шуданд.

Модели UUO осеби босуръати тубулоинтерстисиалӣ, илтиҳоб ва фиброзро ба вуҷуд меорад. Ин модел ҳамаи сабабҳои CKD-и инсонро намояндагӣ намекунад; он модели таҷрибавӣ барои омӯзиши механизми фиброз дар муддати кӯтоҳ аст.

Модели дуюми ҳайвонот: Нефропатияи кислотаи фолат

Ба мушҳои наринаи BALB/c:

\[ 250\ \mathrm{mg/kg\ folik\ asit} \]

як воя ба таври интраперитонеалӣ дода шуд. Назоратҳо танҳо маҳлули интиқолдиҳанда гирифтанд. Ҳайвонот дар рӯзи 28 арзёбӣ шуданд.

Модели кислотаи фолат осеби найчавӣ, илтиҳоб ва фибрози тадриҷиро ба вуҷуд меорад. Истифодаи ду модели алоҳида дастгирӣ мекунад, ки механизм танҳо ба басташавии уретер хос нест. Бо вуҷуди ин, ҳар ду модел раванди мураккаби CKD-и инсонро, ки солҳои зиёд инкишоф меёбад, пурра тақлид намекунанд.

Пахш кардани HBP бо DON

Дар таҳқиқ барои пахш кардани GFPT1 ва ҷараёни HBP 6-diazo-5-oxo-L-norleucine, яъне DON, истифода шудааст:

\[ 20\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

Пас аз DON:

• сатҳи O-GlcNAc-и гурда паст шуд,
• сатҳи коллаген I коҳиш ёфт,
• сатҳи α-SMA коҳиш ёфт,
• ҷамъшавии коллаген дар рангкунии Masson кам шуд,
• осеби бофта ва инфилтратсияи илтиҳобӣ дар рангкунии PAS сабуктар гардид,
• афзоиши креатинини хуноба ва BUN кам шуд.

Азбаски ин натиҷаҳо ҳам дар UUO ва ҳам дар модели кислотаи фолат такрор шуданд, муаллифон хулоса карданд, ки афзоиши O-GlcNAc вобаста ба HBP ба фиброз ва аз даст рафтани функсия саҳм мегузорад.

Аммо дар матни асосӣ танҳо пахшкунии фармакологии HBP нишон дода шудааст. Таҷрибае, ки GFPT1 дар ҳуҷайраҳои гурда генетикӣ нест карда ё аз ҳад зиёд ифода шуда бошад, гузориш нашудааст. Аз ин рӯ, исбот нашудааст, ки ҳамаи таъсирҳои DON танҳо тавассути GFPT1 амал мекунанд.

Пайдарпайии RNA кадом роҳро нишон дод?

Дар гурдаҳои UUO, sham ва UUO-и табобатшуда бо DON таҳлили транскриптом анҷом дода шуд. 97 ген муайян шуд, ки бо осеби гурда боло рафта ва бо DON боз паст шуданд.

Дар таҳлили Gene Ontology:

• фаъолияти ретсептори хемокини C-X-C,
• ҷавобҳои масуният,
• сигналҳои вобаста ба ҳуҷайраҳои T

барҷаста буданд.

Cd4, Cxcr3 ва Cxcr6 аз генҳои асосӣ гузориш шуданд. Таҳлили KEGG бошад ғанигардонии роҳҳои вобаста ба дифференсиатсияи Th17-ро нишон дод.

Меҳвари CXCL10–CXCR3 чӣ кор мекунад?

CXCL10 хемокинест, ки баъзе ҳуҷайраҳои масуниятро аз рӯи градиенти химиявӣ ба бофтаи осебдида ҷалб мекунад. CXCR3 бошад яке аз ретсепторҳое мебошад, ки махсусан дар ҳуҷайраҳои T-и фаъол мавҷуданд.

Ҷараёни ҳуҷайравии пешниҳодшуда чунин аст:

\[ \mathrm{Böbrek\ tübül\ hücresi\ CXCL10}\uparrow \rightarrow \mathrm{CXCR3^+\ CD4^+\ T\ hücresi\ göçü}\uparrow \]

DON сатҳҳои Cxcl10 ва Cd4 mRNA ва инфилтратсияи ҳуҷайраҳои CD4+ T-ро дар гурда кам кард.

Дар ҳуҷайраҳои проксималии найчаи HK-2-и инсон, вақте ки бо ингибитори OGA — Thiamet G — сатҳи O-GlcNAc баланд карда шуд, экспрессияи CXCL10 зиёд гардид. Бо ин роҳ нишон додан хоста шудааст, ки O-GlcNAc на танҳо ба ҳуҷайраҳои масуният, балки ба ҳуҷайраҳои эпителиалии гурда, ки онҳоро даъват мекунанд, таъсир мерасонад.

Таҷрибаи AMG487 чиро санҷид?

Барои арзёбии нақши функсионалии CXCR3 ба мушҳои UUO:

\[ 5\ \mathrm{mg/kg/gün\ AMG487,\ intraperitoneal} \]

дода шуд.

Антагонизми CXCR3:

• воридшавии ҳуҷайраҳои CD4+ T ба гурда кам кард,
• сатҳи коллаген I ва α-SMA-ро паст кард,
• натиҷаҳои креатинин ва BUN-ро беҳтар намуд.

Ин таҷриба дастгирӣ мекунад, ки меҳвари CXCL10–CXCR3 танҳо нишонаи RNA нест, балки ба фенотипи фиброз саҳми функсионалӣ дорад.

Чаро ҳуҷайраҳои Th17 муҳиманд?

Ҳуҷайраҳои Th17 ҳуҷайраҳои ёрирасони CD4+ T мебошанд, ки ситокинҳои илтиҳобӣ, махсусан IL-17A, истеҳсол мекунанд. Сигналҳои онҳо ҳангоми осеби гурда метавонанд:

• стресс ва осебро дар ҳуҷайраҳои эпителиалӣ зиёд кунанд,
• омилҳои профибротикӣ ба мисли TGF-β-ро боло баранд,
• тағйири хусусиятҳои эпителиалӣ-мезенхимиро дастгирӣ кунанд,
• ҷамъшавии матритсаи берунҳуҷайравиро тезонанд.

Дар цитометрияи ҷараён Th17 ҳамчун ҳуҷайраҳои IL-17A-мусбат дар дарвозаи лимфоситҳои зиндаи CD4+ T таъриф шуданд:

\[ \mathrm{Th17\ oranı} = \frac{\mathrm{IL\!-\!17A^+\ CD4^+\ T\ hücreleri}}{\mathrm{toplam\ canlı\ CD4^+\ T\ hücreleri}} \times 100 \]

DON ҳиссаи Th17, Il17a mRNA ва сафедаи IL-17A-ро кам кард.

Безараргардонии IL-17

Барои қатъи мустақими роҳи IL-17 секукинумаб:

\[ 20\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

истифода шуд. Мувофиқи шарҳи шакли иловагӣ безараргардонии IL-17 осеби гурда ва фиброзро кам кард.

Ин маълумот дастгирӣ мекунад, ки ҷузъи Th17/IL-17 танҳо тағйироти дуюмдараҷаи ҳамроҳ бо ингибитсияи HBP нест, балки метавонад ба натиҷаи фибротикӣ саҳм гузорад. Аммо тафсилоти таҷрибаи секукинумаб ба маводи иловагӣ гузошта шудааст, ки дар PDF-и асосӣ нест.

Чаро STAT3 ҳамчун молекулаи марказӣ интихоб шуд?

STAT3 омили транскрипсионист, ки сигналҳои ситокинҳо ва омилҳои афзоишро аз берун ба экспрессияи ген дар ядро табдил медиҳад. Он яке аз танзимкунандагони асосии дифференсиатсияи Th17 аст ва метавонад ба экспрессияи хемокинҳо ба мисли CXCL10 низ таъсир кунад.

Дар таҷрибаҳои иммунофлуоресентӣ гуфта шудааст, ки сигналҳои STAT3 ва O-GlcNAc дар ҳамон минтақаҳои ҳуҷайравӣ якҷо ҷойгир буданд.

DON:

• сафедаи STAT3-ро кам кард,
• STAT3-и фосфорилшударо кам кард,
• mRNA-и STAT3-ро тағйир надод.

Ин фарқ нишон медиҳад, ки танзим баъд аз транскрипсия, яъне дар сатҳи посттранслятсионӣ, сурат мегирад.

Ингибитсияи STAT3

Ингибитори STAT3 — Stattic:

\[ 10\ \mathrm{mg/kg/gün,\ intraperitoneal} \]

дар мушҳо истифода шуд ва дар таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ низ барои пахш кардани сигнали STAT3 татбиқ гардид.

Ингибитсияи STAT3:

• транскрипсияи CXCL10,
• инфилтратсияи ҳуҷайраҳои CD4+ T,
• дифференсиатсияи Th17,
• нишондиҳандаҳои фиброз

-ро кам кард. Ин натиҷаҳо дастгирӣ мекунанд, ки STAT3 гиреҳи функсионалии миёна байни сигнали HBP/O-GlcNAc ва фибрози иммунӣ аст.

Нимумри сафеда чӣ гуна чен шуд?

Дар ҳуҷайраҳои HK-2 барои қатъ кардани синтези нави сафеда сиклогексимид, яъне CHX, истифода шуд. Ҳуҷайраҳо дар 0, 3, 6, 9, 12 ва 24 соат санҷида шуда, суръати нопадид шудани STAT3-и мавҷуда арзёбӣ гардид.

Коҳиши сафедаро ба таври содда чунин шарҳ додан мумкин аст:

\[ P(t) = P_0 e^{-kt} \]

\[ t_{1/2} = \frac{\ln 2}{k} \]

Дар ин ҷо:

• P(t) — миқдори STAT3 дар вақти t,
• P₀ — миқдори ибтидоии STAT3,
• k — доимии суръати таҷзия,
• t_1/2 — нимумри сафеда

мебошанд.

Ин муодилаҳо дар мақола дода нашудаанд; барои шарҳи мантиқи математикии таҷрибаи нимумр бо CHX илова шудаанд.

Ҳангоми DON гузориш шуд, ки STAT3 тезтар нопадид мешавад ва нимумраш кӯтоҳ мегардад.

Мавқеи T717 чӣ гуна муайян шуд?

Муҳаққиқон дар STAT3 шаш мавқеи эҳтимолии O-GlcNAc-ро пешгӯӣ карда, мутантҳое сохтанд, ки дар ин ҷойҳо аминокислотаҳо иваз шудаанд.

Мутатсияҳои T717, S719, T721 ва S727 сатҳи O-GlcNAc-и STAT3-ро кам карданд. Аммо танҳо мутатсияи T717 нимумри STAT3-ро ба таври равшан кӯтоҳ кард.

Аз ин рӯ, таҳқиқ пешниҳод мекунад, ки:

• якчанд мавқеъ метавонанд O-GlcNAc гиранд,
• аммо мавқеи ҳалкунанда барои устувории сафеда T717 аст.

пешниҳод мекунад.

Системаи убиквитин–протеасома

Ҳуҷайра сафедаҳои осебдида ё анҷомдодаи вазифаро бо сафедаҳои хурди убиквитин нишонагузорӣ карда, ба протеасома мефиристад.

\[ \mathrm{STAT3} \xrightarrow{\mathrm{E3\ ligaz}} \mathrm{STAT3\!-\!Ub_n} \xrightarrow{\mathrm{proteazom}} \mathrm{parçalanmış\ ürünler} \]

Вақте ки протеасома бо MG132 пахш карда шуд, таъсири DON, ки STAT3-и муқаррариро кам мекард, баргардонда шуд. Дар мутанти T717A бошад MG132 ҳамон намунаи таъсирро нишон надод.

Мутатсияи T717 убиквитиншавии STAT3-ро зиёд кард. Убиквитиншавии мутанти T717A аз барномаҳои баланд ё паст кардани O-GlcNAc ба таври равшан таъсир нагирифт. Ин натиҷаҳо дастгирӣ мекунанд, ки T717 нуқтаи асосии танзим байни O-GlcNAc ва убиквитиншавӣ аст.

SMURF1 чӣ гуна ёфт шуд?

Барои муқоисаи сафедаҳои пайвастшаванда ба STAT3-и муқаррарӣ ва мутанти T717A ко-иммунопреципитатсия, SDS-PAGE ва масс-спектрометрия истифода шуданд.

Яке аз сафедаҳо, ки дар мутанти T717A ба STAT3 бештар пайваст мешуд, E3-убиквитин-лигазаи SMURF1 буд.

Дар таҷрибаҳои баъдӣ:

• ҳамкории физикии STAT3 ва SMURF1 бо ко-иммунопреципитатсия тасдиқ шуд,
• аз ҳад зиёд ифода кардани SMURF1 сафедаи STAT3-ро кам кард,
• CXCL10 mRNA-ро паст кард,
• баланд кардани O-GlcNAc таъсири SMURF1-ро кам кард,
• мутатсияи T717A пайвастшавии SMURF1–STAT3-ро зиёд кард.

Модели молекулавии пешниҳодшуда чунин аст:

Устувор мондани STAT3 ба фиброз чӣ гуна таъсир мекунад?

STAT3, ки муддати дарозтар дар ҳуҷайра боқӣ мемонад, метавонад барномаи транскрипсионии профибротикиро дар ҳуҷайраи найчаи гурда идома диҳад. Ба гуфтаи таҳқиқ, ин ду натиҷаи асосӣ дорад:

1. Афзоиши CXCL10: Ҳуҷайраҳои CD4+ T-и дорои CXCR3 ба гурда ҷалб мешаванд.
2. Дифференсиатсияи Th17: Ҳуҷайраҳои CD4+ T, ки ба гурда меоянд, ба фенотипи Th17-и истеҳсолкунандаи IL-17A мегузаранд.

Ин ду механизм якдигарро пурра мекунанд. Якум ҳуҷайраи масуниятро ба гурдаи осебдида меорад; дуюм ҳуҷайраи омадаистодаро ба зернавъи иммунӣ табдил медиҳад, ки фиброзро тақвият мекунад.

Рутин гидрат чӣ гуна ёфт шуд?

Дар асоси сохтори сеченаи мавқеи T717-и STAT3 скрининги виртуалӣ гузаронида шуд. Китобхонаи пайвастагиҳои истифодашуда 3.158 моддаро дар бар мегирифт.

Дар охири марҳилаҳои скрининг:

• 38 номзад интихоб шуд,
• се номзади баландтарин ба санҷиши таҷрибавӣ гирифта шуданд.

Ин се модда чунинанд:

1. Инозитол никотинат
2. Саквинавир
3. Рутин гидрат

Рутин гидрат флавоноид аст. Иддаои асосии таҳқиқ ин аст, ки ин модда танҳо таъсири умумии антиоксидантӣ ё зиддиилтиҳобӣ надорад, балки O-GlcNAc-и мавқеи T717-и STAT3-ро ҳадаф мегирад.

Рутин гидрат як флавоноид аст. Иддаои асосии таҳқиқ ин аст, ки ин пайвастагӣ танҳо хосияти умумии антиоксидантӣ ё пасткунандаи илтиҳоб надорад, балки модификатсияи O-GlcNAc-и STAT3-ро дар мавқеи T717 ҳадаф мегирад.

Таъсири рутин гидрат дар таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ

Рутин гидрат:

• O-GlcNAc-и STAT3-и муқаррариро кам кард,
• сатҳи сафедаи STAT3-ро паст намуд,
• сатҳи mRNA-и STAT3-ро тағйир надод,
• экспрессияи CXCL10-ро коҳиш дод.

Набудани ҳамин таъсир дар STAT3-и дорои мутанти T717A аз ҷониби муаллифон ҳамчун далели хосият ба T717 тафсир шудааст.

Бо вуҷуди ин, дар матни асосӣ санҷиши мустақими миқдории пайвастшавии рутин гидрат ба STAT3, ба монанди surface plasmon resonance, isothermal titration calorimetry ё усули дигари биофизикӣ, гузориш нашудааст. Бозёфтҳо ба моделсозии виртуалӣ, вобастагӣ аз мутатсия, иммунопреципитатсия ва экспрессияи сафеда асос ёфтаанд.

Таъсири рутин гидрат дар таҷрибаи ҳайвонот

Ба мушҳои UUO аз роҳи даҳон:

\[ 5\ \mathrm{mg/kg/gün\ rutin\ hidrat} \]

дода шуд. Дар шарҳи Шакли 6 гуфта шудааст, ки табобат як ҳафта давом кард.

Пас аз рутин гидрат:

• сатҳи STAT3 ва p-STAT3 кам шуд,
• креатинини хуноба ва BUN беҳтар гардид,
• нишондиҳандаи осеби KIM-1 коҳиш ёфт,
• инфилтратсияи ҳуҷайраҳои CD4+ T кам шуд,
• ҳиссаи ҳуҷайраҳои Th17 паст шуд,
• осеби бофта ва ҷамъшавии коллаген дар рангкуниҳои HE, PAS, Sirius Red ва Masson коҳиш ёфт.

Ин бозёфтҳо рутин гидратро ба номзади нави таҳқиқотӣ табдил медиҳанд. Аммо таъсири як вояи кӯтоҳмуддат дар ҳайвон маънои онро надорад, ки мавод дар одамон бехатар ё самаранок хоҳад буд.

Шакли 1 кадом равандро нишон медиҳад?

Мувофиқи шарҳи Шакли 1 таҳқиқ:

• OGT, OGA ва ферментҳои HBP-ро дар пойгоҳҳои маълумоти инсон муқоиса кардааст,
• дар 20 биопсияи гурдаи CKD-и инсон иммуногистохимияи O-GlcNAc анҷом додааст,
• ҷараёни таҷрибавии UUO ва модели кислотаи фолатро нишон додааст,
• дар ҳар ду модел ферментҳои HBP-ро бо RT-qPCR, Western blot ва иммуногистохимия санҷидааст.

Дар PDF-и боршуда панелҳои воқеии тасвирии Шакли 1 мавҷуд нестанд; танҳо матни шарҳи шакл ҷой дорад. Аз ин рӯ, шиддати ранг, тасвирҳои бандҳо, графикҳои паҳншавӣ ва хатҳои хато мустақилона ба таври визуалӣ арзёбӣ шуда наметавонанд.

Шакли 2 кадом равандро нишон медиҳад?

Мувофиқи шарҳи Шакли 2:

• робитаи ферментҳои HBP бо GFR таҳқиқ шудааст,
• таъсири DON ба сатҳи O-GlcNAc чен шудааст,
• Western blot-и коллаген I ва α-SMA анҷом дода шудааст,
• BUN ва креатинин арзёбӣ шудаанд,
• тасвирҳои PAS, Masson ва иммуногистохимия истифода шудаанд.

Дар ченакҳои фаъолияти гурда барои баъзе гурӯҳҳои UUO ва FA n = 4 ва дар таҳлили бофтаҳо асосан n = 5 нишон дода шудааст.

Шакли 3 кадом равандро нишон медиҳад?

Шакли 3:

• таҳлили фарқии RNA-seq,
• 97 гене, ки бо DON баргардонида шуданд,
• ғанигардонии GO ва KEGG,
• ченкуниҳои CD4 ва CXCL10,
• таҷрибаҳои AMG487,
• цитометрияи ҷараёни Th17,
• натиҷаҳои mRNA ва сафедаи IL-17A

-ро якҷо мекунад.

Шакли 4 кадом равандро нишон медиҳад?

Дар Шакли 4:

• ҳамҷойгиршавии STAT3–O-GlcNAc,
• муқоисаи сафеда ва mRNA-и STAT3,
• таҷрибаи нимумри CHX,
• мутатсияҳои мавқеи STAT3,
• таҷрибаи протеасомии MG132,
• убиквитиншавии STAT3

санҷида шудаанд.

Шакли 5 кадом равандро нишон медиҳад?

Шакли 5 муайян кардани SMURF1 ва ҳамкории онро бо STAT3 нишон медиҳад, аз ҷумла:

• масс-спектрометрия,
• ко-иммунопреципитатсия,
• аз ҳад зиёд ифода кардани SMURF1,
• ченкунии CXCL10,
• таҷрибаҳои убиквитиншавии STAT3-и муқаррарӣ ва мутанти T717A.

дар бар мегирад.

Шакли 6 кадом равандро нишон медиҳад?

Шакли 6 таъсири рутин гидрат ба:

• O-GlcNAc-и STAT3,
• мутанти T717A,
• экспрессияи CXCL10 ва CXCR3,
• арзишҳои креатинин ва BUN,
• экспрессияи KIM-1 ва CD4,
• гистологияи гурда,
• ҳиссаи ҳуҷайраҳои Th17

ҷамъбаст мекунад.

Аммо панелҳои воқеии таҷрибавии Шаклҳои 1–6 дар PDF-и 36 саҳифаи боршуда нестанд. PDF баъд аз матни натиҷаҳо бо шарҳҳои шаклҳо анҷом меёбад. Аз ин рӯ, бузургии визуалии натиҷаҳо, паҳншавӣ ва сифати тасвирҳои хом танҳо аз рӯи шарҳҳо арзёбӣ шудаанд.

Ҷиҳатҳои қавии таҳқиқ

• Тарҳи бисёрқабатаи таҷриба: Маълумоти инсон, бофтаи гурдаи инсон, ду модели ҳайвонот ва ду хатти ҳуҷайравӣ якҷо истифода шудаанд.
• Ду модели гуногуни фиброз: Бозёфтҳо танҳо ба модели обструксияи уретер вобаста нестанд.
• Мудохилаҳои сершумор дар тамоми роҳ: HBP, CXCR3, STAT3 ва IL-17 бо воситаҳои фармакологии алоҳида ҳадаф гирифта шудаанд.
• Таҳлили транскриптом: Ба ҷои чанд гени пешакӣ интихобшуда намунаи васеътари масуният санҷида шудааст.
• Таҷрибаҳои мутатсия: Мавқеи махсуси T717 дар STAT3 санҷида шудааст.
• Механизми таҷзияи сафеда: CHX, MG132 ва таҷрибаҳои убиквитин якҷо истифода шудаанд.
• Муайян кардани E3-лигаза: Пайванди SMURF1 бо масс-спектрометрия ва ко-иммунопреципитатсия баррасӣ шудааст.
• Гузариш аз механизм ба номзади модда: Пас аз скрининги сохторбунёд рутин гидрат дар ҳуҷайра ва ҳайвон санҷида шуд.
• Тасдиқ дар бофтаи гурдаи инсон: Механизм танҳо ба фарҳанги ҳуҷайра ё маълумоти муш асос наёфтааст.
• Нақшаи мубодилаи маълумот: RNA-seq бо рақами дастрасии BioProject PRJNA14422936 гузориш шудааст.

Маҳдудиятҳои таҳқиқ

• Баррасии ҳамсолон нест: Таҳқиқ preprint аст.
• Таҳқиқи клиникӣ нест: Ба ягон бемори CKD DON, AMG487, Stattic, секукинумаб ё рутин гидрат дода нашудааст.
• Гурӯҳҳои хурди ҳайвонот: Дар аксари гурӯҳҳо n = 5 ва дар баъзе таҳлилҳои фаъолияти гурда n = 4 истифода шудааст.
• Танҳо мушҳои нарина: Тафовутҳои биологии вобаста ба ҷинс арзёбӣ нашудаанд.
• Моделҳои кӯтоҳмуддат: UUO ҳафт рӯз ва модели кислотаи фолат 28 рӯз пайгирӣ шудаанд.
• CKD-и инсонро пурра намояндагӣ намекунанд: Бемории инсон одатан дар тӯли солҳо ва бо омилҳои ҳамроҳи зиёд инкишоф меёбад.
• Тасдиқи генетикии HBP маҳдуд аст: Нест кардан ё аз ҳад зиёд ифода кардани GFPT1-и хоси гурда дар матни асосӣ нишон дода нашудааст.
• Мушкилоти хосияти фармакологӣ: Исбот нашудааст, ки ҳамаи таъсирҳои DON танҳо тавассути GFPT1/HBP сурат мегиранд.
• Фаъолияти OGT/OGA чен нашудааст: Тағйир накардани экспрессия исбот намекунад, ки фаъолияти фермент бетағйир аст.
• Хусусиятҳои намунаҳои инсон нопурраанд: Синну сол, ҷинс, сабаби CKD, марҳила, диабет ва табобатҳои беморон муфассал дода нашудаанд.
• Шаклҳо дар PDF нестанд: Танҳо шарҳҳои шаклҳо ҷой доранд.
• Усулҳои иловагӣ дастрас нестанд: Матн мегӯяд, ки боқимондаи усулҳо дар маводи иловагӣ ҳастанд, аммо ин мавод дар файли боршуда нест.
• Тасодуфисозӣ ва кӯркунӣ шарҳ дода нашудаанд: Тақсимоти ҳайвонот ба гурӯҳҳо ва кӯр будани арзёбии гистологӣ нишон дода нашудааст.
• Ҳисоби андозаи намуна дода нашудааст: Асоси омории шумораи ҳайвонот пешниҳод нашудааст.
• Такрорҳои таҷриба маҳдуд гузориш шудаанд: Гуфта шудааст, ки таҷрибаҳо ҳадди ақал ду бор такрор шуданд, аммо тафсилоти такрори биологӣ ва техникӣ дода нашудааст.
• Гузориши оморӣ маҳдуд аст: Асосан ANOVA-и яксамта, миёна ± SEM ва ҳудудҳои p бо ситорача истифода шудаанд.
• Андозаи таъсир ва фосилаҳои эътимод намерасанд: Барои бисёр натиҷаҳо фарқҳои дақиқ, фосилаҳои эътимод ва маълумоти хом дар матни асосӣ нестанд.
• Ислоҳи муқоисаҳои сершумор шарҳ дода нашудааст: Генҳо, сафедаҳо ва гурӯҳҳои табобатии зиёд арзёбӣ шудаанд.
• Таҳлили воя–ҷавоб барои рутин гидрат нест: Вояҳои гуногун барои самаранокӣ ва заҳролудӣ муқоиса нашудаанд.
• Маълумоти фармакокинетикӣ нест: Ҷаббиш, сатҳи хун, гузариш ба бофтаи гурда ва нимумр таҳқиқ нашудаанд.
• Бехатарии дарозмуддат номаълум аст: Истифодаи музмин, таъсири ҷигар, ҳамкории доруҳо ва таъсирҳои иммунологӣ таҳқиқ нашудаанд.
• Санҷиши мустақими пайвастшавӣ маҳдуд аст: Пайвастшавии рутин гидрат–STAT3 дар матни асосӣ бо усули миқдории биофизикӣ нишон дода нашудааст.
• Муқоиса бо табобати стандартӣ нест: Рутин гидрат бо табобатҳои мавҷудаи CKD ё антифибротикӣ муқоиса нашудааст.
• Масъалаҳои таҳрирӣ дар рақамгузории шакл ва маводи иловагӣ: Дар баъзе шарҳҳо ҳарфҳои панел такрор шудаанд ва тафсилоти таҷрибавӣ нопурраанд.

Таҳқиқ чӣ мегӯяд?

• Дар бофтаҳои CKD-и инсон ва ду модели муш сатҳи умумии O-GlcNAc-и сафедаҳо баланд шудааст.
• Ин баландшавӣ бо афзоиши ферментҳои HBP ҳамроҳ буд.
• Тағйири равшани экспрессияи OGT ва OGA гузориш нашудааст.
• Пахш кардани HBP бо DON дар мушҳо фиброз ва вайроншавии фаъолияти гурдаро кам кардааст.
• Сигнали HBP/O-GlcNAc тавассути роҳи CXCL10–CXCR3 ҳуҷайраҳои CD4+ T-ро ба гурда ҷалб мекунад.
• Ин сигнал бо дифференсиатсияи Th17 ва истеҳсоли IL-17A алоқаманд аст.
• STAT3 ҳамчун молекулаи марказӣ байни сигнали метаболикӣ ва ҷавоби масуният муайян шудааст.
• O-GlcNAc-и мавқеи T717-и STAT3 нимумри сафедаро дароз кардааст.
• O-GlcNAc пайвастшавии SMURF1 ба STAT3 ва убиквитиншавии STAT3-ро кам кардааст.
• Рутин гидрат дар таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ O-GlcNAc-и STAT3-ро кам кардааст.
• Рутин гидрат дар модели кӯтоҳмуддати UUO фиброз ва инфилтратсияи иммунӣ кам кардааст.

Таҳқиқ чӣ намегӯяд?

• Нишон намедиҳад, ки рутин гидрат дар одамон CKD-ро табобат мекунад.
• Нишон намедиҳад, ки ғизо ё иловаҳои дорои рутин фибрози гурдаро пешгирӣ мекунанд.
• Вояи самаранок ё бехатарро барои одамон муайян намекунад.
• Нишон намедиҳад, ки рутин гидрат ниёз ба диализ ё норасоии гурдаро пешгирӣ мекунад.
• Нишон намедиҳад, ки HBP дар ҳамаи намудҳои CKD бо ҳамон дараҷа фаъол аст.
• Исбот намекунад, ки OGT ва OGA дар CKD ҳеҷ нақш надоранд.
• Нишон намедиҳад, ки STAT3 ягона ҳадафи O-GlcNAc дар фиброз аст.
• Нишон намедиҳад, ки Th17 ягона ҳуҷайраи масуният дар фибрози гурда аст.
• Нишон намедиҳад, ки DON дар одамон ҳамчун табобати антифибротикӣ бехатар истифода мешавад.
• Бо танҳо ин маълумот қатъӣ исбот намекунад, ки рутин гидрат мустақим ва хеле интихобӣ ба STAT3 T717 мепайвандад.
• Исбот намекунад, ки беҳбудии кӯтоҳмуддати муш пешрафти дарозмуддати CKD-ро бозмедорад.

Аҳамият аз нигоҳи гузашта

Таҳқиқи фибрози гурда муддати дароз ба TGF-β, фаъолшавии фибробласт, стресси гемодинамикӣ ва ситокинҳои илтиҳобӣ таваҷҷуҳ дошт. Дар солҳои охир равшантар шудааст, ки барномаҳои метаболикии ҳуҷайраҳои осебдидаи гурда низ метавонанд фиброзро роҳбарӣ кунанд.

Ин таҳқиқ кӯшиш мекунад нишон диҳад, ки бозбарномарезии метаболикӣ танҳо бо истифодаи энергия алоқаманд нест; ҷараёни метаболикӣ метавонад тавассути модификатсияи сафеда ба рафтори ҳуҷайраҳои масуният табдил дода шавад.

Аҳамият барои имрӯз

Саҳми асосии консептуалии таҳқиқ ин аст, ки фибрози гурдаро на ҳамчун “бемории метаболикӣ” ё “бемории илтиҳобӣ” ҷудогона, балки ҳамчун ихтилоли муттаҳидаи иммунометаболикӣ мебинад.

HBP:

• ҳолати ғизоии ҳуҷайраро ҳис мекунад,
• истеҳсоли UDP-GlcNAc-ро тағйир медиҳад,
• устувории сафедаи STAT3-ро танзим мекунад,
• истеҳсоли хемокин ва муҳоҷирати ҳуҷайраҳои T-ро таъсир медиҳад,
• ҷавоби Th17 ва фиброзро тақвият мекунад.

Чунин роҳ метавонад имкони ҳадаф гирифтани на танҳо як навъи ҳуҷайра, балки иртиботи байни ҳуҷайраи найчаи гурда, лимфосити T ва микро муҳити фибротикиро фароҳам оварад.

Аҳамият барои оянда

Таҳқиқҳои минбаъда бояд ба саволҳои зерин ҷавоб диҳанд:

• Сигнали болоӣ, ки HBP-ро дар CKD оғоз мекунад, чист?
• Гипоксия, стресси ретикулуми эндоплазмӣ ё ситокинҳои мушаххас HBP-ро чӣ гуна фаъол мекунанд?
• Ғайр аз STAT3 кадом сафедаҳои профибротикӣ бо O-GlcNAc устувор мешаванд?
• Оё модификатсияи T717 дар бофтаи гурдаи инсон мустақим ва миқдорӣ тасдиқ мешавад?
• Оё пахшкунии генетикии HBP-и хоси ҳуҷайраҳои гурда фиброзро кам мекунад?
• Консентратсияи воқеии рутин гидрат дар бофтаи гурда чӣ қадар аст?
• Оё рутин гидрат дар моделҳои дарозмуддат ва сусттаринкишофёбандаи CKD самаранок аст?
• Таъсирҳои дарозмуддати мавод ба масуният, ҷигар ва дигар узвҳо кадоманд?
• Оё ҳосилаҳои интихобитар ва қавитари ҳадафгири T717 таҳия мешаванд?
• Оё доираи вояи бехатар барои одамон пайдо мешавад?

Барои ҳаёти ҳаррӯза ва бемор чӣ маъно дорад?

Таҳқиқ тавсия намедиҳад, ки беморони гурда ғизо ё иловаҳои дорои рутинро барои табобат истифода кунанд. Рутин гидрат танҳо дар фарҳанги ҳуҷайра ва моделҳои таҷрибавии муш санҷида шудааст.

Дар беморони CKD иловаҳои ғизоӣ ва маҳсулоти гиёҳӣ метавонанд:

• вобаста ба фаъолияти гурда дар бадан ҷамъ шаванд,
• бо доруҳои таъиншуда ҳамкорӣ кунанд,
• вобаста ба покӣ ва вояи маҳсулот таъсири гуногун дошта бошанд,
• калий ё моддаҳои дигар дошта бошанд.

Аз ин рӯ, таҳқиқ далели клиникӣ барои оғози худсаронаи иловаи рутин нест. Барои гузариш ба табобати инсон санҷишҳои заҳролудӣ, фармакокинетика, муайян кардани воя ва озмоишҳои назоратшудаи клиникӣ заруранд.

Усул ва натиҷаҳои таҳқиқ

Хулосаи техникии равиши таҳқиқ

Мудохилаҳои фармакологии истифодашуда

Воситаҳои асосии таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ

Мантиқи техникии занҷири таҷрибавӣ

1. Афзоиши HBP ва O-GlcNAc дар гурдаи инсон ва муш нишон дода шуд.
2. Бо пахш кардани HBP фиброз ва натиҷаҳои фаъолияти гурда арзёбӣ шуданд.
3. Бо RNA-seq ҷавоби масуният ва меҳвари хемокин муайян шуд.
4. CXCR3, STAT3 ва IL-17 бо мудохилаҳои алоҳида санҷида шуданд.
5. Вобастагии нимумри сафедаи STAT3 аз ҳолати O-GlcNAc нишон дода шуд.
6. Бо мутатсияҳо мавқеи T717 ҳамчун минтақаи функсионалӣ муайян гардид.
7. SMURF1 ҳамчун E3-лигазае пешниҳод шуд, ки таҷзияи STAT3-ро таъмин мекунад.
8. Бо скрининги виртуалӣ номзадҳое интихоб шуданд, ки метавонанд T717-ро ҳадаф гиранд.
9. Рутин гидрат дар таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ ва муш тасдиқ шуд.

Модели асосии молекулавӣ

Хулосаи техникии натиҷаҳои мудохила

Хулосаи скрининги рутин гидрат

Аз ҷиҳати техникӣ муҳимтарин натиҷа

Муҳимтарин пешниҳоди илмии таҳқиқ ин аст, ки дар фибрози гурда сигнали метаболикӣ ва ҷавоби масуният метавонанд тавассути як занҷири молекулавӣ пайваст шаванд.

Баланд шудани HBP танҳо метаболизми шакарро дар ҳуҷайра тағйир намедиҳад. Он бо зиёд кардани UDP-GlcNAc ба сафедаи STAT3 дар мавқеи T717 нишонаи кимиёвӣ илова мекунад, ки STAT3-ро аз таҷзияи ҳуҷайравӣ муҳофизат карда, фаъол мондани онро дароз мекунад.

STAT3-и устувор истеҳсоли бештари CXCL10, муҳоҷирати ҳуҷайраҳои CD4+ T ва ҷавоби Th17-ро дастгирӣ мекунад. Ба ин тартиб, тағйироти кӯтоҳмуддати метаболикӣ метавонад ба микро муҳити иммунӣ-фибротикии худидомадиҳанда табдил ёбад.

Рутин гидрат ҳамчун воситаи таҳқиқотӣ ва пайвастагии номзад пешниҳод шудааст, ки нишон медиҳад ин занҷир метавонад дар сатҳи модификатсияи T717 қатъ шавад. Аммо ҳанӯз набояд ҳамчун доруи CKD арзёбӣ шавад.

Эзоҳи манбаъ ва усул

Ин муҳтаво ба таҳқиқи Hongxia Yang, Bin Liu, Guangtao Li, Dan Zhang, Shangguo Wang, Zehua Zhang, Xiaodong Zhao, Jiaxin Liu, Qianhui Li, Yifan Song, Yang Tan, Shuyue Ma, Honglan Zhou, Yishu Wang ва Yanghe Zhang бо унвони “Hexosamine Biosynthesis Pathway Driven O-GlcNAcylation of STAT3 Orchestrates Renal Fibrosis via a T cell Mediated Immune Pathway in CKD” асос ёфтааст.

Таҳқиқ preprint-и механизми пешклиникӣ ва кашфи номзади дору мебошад, ки бофтаи гурдаи инсон, маълумоти оммавии экспрессияи инсон, моделҳои UUO ва нефропатияи кислотаи фолат дар мушҳои наринаи BALB/c, ҳуҷайраҳои HK-2 ва 293T, RNA-seq, мутатсия, иммунопреципитатсия, убиквитиншавӣ ва скрининги виртуалии сохторбунёдро якҷо мекунад.

Дар матн ошкоро “This preprint research paper has not been peer reviewed” ва “Preprint not peer reviewed” гуфта шудааст. Аз ин рӯ, таҳқиқ аз баррасии ҳамсолон нагузаштааст. Дар PDF қабул ба маҷаллаи ниҳоӣ ё мақоми нашри баррасишуда тасдиқ намешавад.

Гуфта шудааст, ки таҷрибаҳои ҳайвонот аз ҷониби IACUC-и College of Basic Medical Sciences-и Jilin University бо протоколи 2025-530 тасдиқ шудаанд. Барои таҳқиқи бофтаи гурдаи инсон аз кумитаи ахлоқии First Hospital of Jilin University тасдиқи 2024-1151 гирифта шуда, аз иштирокчиён ризоияти хаттии огоҳона гирифта шудааст.

Гуфта шудааст, ки маълумоти RNA-seq дар NCBI Sequence Read Archive бо рақами BioProject PRJNA14422936 мубодила шудааст. Маълумоти дигар дар мақола, файлҳои иловагӣ ё бо дархости асоснок аз муаллифи масъул дастрас аст.

Таҳқиқ аз ҷониби National Natural Science Foundation of China, Jilin Province Natural Science Foundation ва дигар фондҳои институтсионалии дар матн номбаршуда дастгирӣ шудааст. Муаллифон бархӯрди манфиатҳоро гузориш накардаанд.

Дар PDF-и 36 саҳифаи боршуда тасвирҳо ва панелҳои графикии Шаклҳои 1–6 мавҷуд нестанд; танҳо шарҳҳои шаклҳо ҷой доранд. Дар бахши асосии усулҳо гуфта шудааст, ки боқимондаи усулҳои таҷрибавӣ дар маводи иловагӣ пешниҳод мешаванд, аммо он мавод дар файли боршуда нест.

Рутин гидрат танҳо дар фарҳанги ҳуҷайра ва таҷрибаҳои кӯтоҳмуддати муш арзёбӣ шудааст. Барои одамон маълумоти воя, фармакокинетика, бехатарӣ, самаранокӣ ё натиҷаҳои клиникӣ вуҷуд надорад. Таҳқиқ истифодаи иловаи рутин, қатъи табобатҳои мавҷудаи CKD ё истифодаи рутин гидрат барои табобатро дастгирӣ намекунад.

Ифодаи “first-in-class targeted inhibitor” дар таҳқиқ таърифи худи муаллифон бар асоси маълумоти пешклиникӣ мебошад. Ин маънои доруи клиникӣ тасдиқшуда, табобати исботшуда ё хосияти ҳадаф дар одамонро надорад.

Ин мақола танҳо бар асоси усулҳо, шарҳҳои шаклҳо, натиҷаҳои таҷрибавӣ ва тафсирҳои муаллифон дар PDF-и боршуда таҳия шудааст. Ягон иддаои самаранокии клиникӣ, вояи инсон, бартарии табобат, кафолати бехатарӣ ё шифо додани бемории гурда, ки дар PDF набуд, илова нашудааст.