Темпоромандибулярдык муундун остеоартритинде (TMJOA) мандибулярдык кондилдин үстүңкү фиброкемирчегиндеги табигый I типтеги коллаген тармагы муун бетинин убакытка көз каранды жүк көтөрүү жана энергияны бөлүштүрүү жүрүм-турумуна салым кошкон уюшкан экстрацеллюлярдык матрикс архитектурасы болуп саналат. Бул препринт изилдөө MIA менен түзүлгөн келемиш TMJOA моделинде эрте механикалык бузулуу коллагендин көлөмүндөгү айкын фиброздук көбөйүүдөн мурда башталышы мүмкүн экенин көрсөтөт. Наноиндентация, поляризациялык-резолюциялуу экинчи гармониканы генерациялоо микроскопиясы (pSHG), сканерлөөчү электрондук микроскопия (SEM), флуоресценциялык фототүссүздөтүүдөн кийинки калыбына келүү (FRAP), иммундук боёо жана ген экспрессиясын талдоо ыкмалары бирге колдонулганда, оорунун биринчи жумасында узак убакыт масштабындагы вискоэластикалык ретардация азайганы, коллаген фибрилдеринин багытталуусу бузулганы, молекулалык таңгакталуу тартиби төмөндөгөнү, коллаген боолору биригип ирээтсизденгени жана матрикстин өткөрүмдүүлүгү жогорулаганы байкалган. Ал эми айкын патологиялык COL1 топтолушу кийинчерээк пайда болгон. COL12A1 экспрессиясынын эрте төмөндөшү да фибрилдердин уюшулушунун бузулушу менен байланышкан талапкер молекулалык өзгөчөлүк катары аныкталган. Натыйжалар эрте TMJOA учурунда “көбүрөөк же азыраак коллаген” деген суроодон мурда табигый коллаген тармагынын кандай уюшулганы механикалык жактан маанилүү болушу мүмкүн экенин көрсөтөт; бирок изилдөө жаныбар моделине негизделген жана COL12A1 үчүн себептүүлүк түз генетикалык кийлигишүү аркылуу көрсөтүлгөн эмес.

Темпоромандибулярдык муундун кемирчеги эмне үчүн башка муун кемирчектеринен айырмаланат?

Мандибулярдык кондил кемирчеги (mandibular condylar cartilage, MCC) тизе сыяктуу көптөгөн синовиалдык муундардагы гиалин кемирчектен түзүлүшү боюнча айырмаланат. MCC түзүлүшүнүн муун бетине караган үстүңкү фиброкемирчек (superficial fibrocartilage, SF) катмары тыгыз уюшкан I типтеги коллагенди (COL1) камтыйт, ал эми тереңирээк жайгашкан артикулярдык кемирчек катмары II типтеги коллагенге жана гликозаминогликандарга байыраак.

Булак изилдөөдө дени сак MCC төрт негизги түзүлүш катары сүрөттөлөт: үстүңкү фиброкемирчек (SF), пролиферативдик катмар (PF), артикулярдык кемирчек (AC) жана субхондралдык сөөк. Гистологиялык жана экинчи гармониканы генерациялоо сүрөттөрү COL1 көп болгон үстүңкү катмар тыгыз жана багытталган коллаген боолорунан турарын көрсөтөт.

Бул үстүңкү тармак биохимиялык түзүлүш гана эмес. Ал муун бетинин деформацияга туруштук беришине, жүктү бөлүштүрүшүнө, сүрүлүүнү азайтышына жана убакытка көз каранды механикалык жооп жаратышына салым кошот. Ошондуктан COL1 көлөмү өзгөрбөсө да, фибрилдердин багыты, аралыктары, таңгакталуусу жана боолордун тартиби бузулганда ткандын функциясы өзгөрүшү мүмкүн.

Эрте TMJOA Учурунда Негизинен Коллагендин Көлөмү Өзгөрөбү же Коллаген Архитектурасыбы?

Бул изилдөөнүн маалыматтары MIA менен индукцияланган эрте TMJOA моделинин биринчи жумасында айкын таза COL1 топтолушуна чейин эле табигый COL1 тармагынын архитектурасы бузуларын колдойт. Биринчи жумада COL1 сигналынын орточо флуоресценция интенсивдүүлүгүндө олуттуу өсүү жана Col1a1/Col1a2 транскрипттеринде жогорулоо байкалбаганы менен, фибрилдердин багытталуусу, молекулалык таңгакталуу, боолордун уюшулушу жана матрикстин өткөрүмдүүлүгү өзгөргөн; айкын патологиялык COL1 топтолушу болсо кийинчерээк, өзгөчө экинчи жумадан тартып пайда болгон.

Эксперименттик оору модели

Изилдөөчүлөр сегиз жумалык эркек Sprague–Dawley келемиштеринин эки темпоромандибулярдык муунуна тең 50 µL туздуу эритмеде 0,5 mg мононатрий йодоацетатын (MIA) сайып, TMJOA моделин түзүшкөн. Контролдук жаныбарларга туздуу эритме гана берилген. Түзүлүштүк, механикалык жана молекулалык өзгөрүүлөр биринчи, экинчи жана төртүнчү жумаларда бааланган.

Эксперименттер ARRIVE көрсөтмөлөрүнө ылайык жүргүзүлүп, Showa Medical University Animal Care and Use Committee тарабынан 225080 шилтеме номери менен бекитилген.

Гистология жана микро-CT аркылуу оорунун өрчүшү

Микро-CT изилдөөсүндө MIA берилген муундарда прогрессивдүү субхондралдык сөөк эрозиясы байкалган. Гистологиялык талдоолордо модификацияланган Mankin баллы жана TMJOA гистологиялык зыян даражасы биринчи жумадан тартып жогорулаган.

Үстүңкү фиброкемирчек катмарынын калыңдыгы биринчи жумада көбөйгөн; клеткалардын чоңоюшу, тегеректениши жана бетинде топтолушу байкалган. Экинчи жана төртүнчү жумаларда SF катмары калың бойдон калган, бирок клеткалардын жоголушунан улам гипоцеллюлярдык көрүнүшкө ээ болгон.

Наноиндентация аркылуу убакытка көз каранды механикалык жүрүм-турум

Жаңы алынган мандибулярдык кондил беттери диаметри 50 µm болгон жалпак учтуу индентор колдонгон TI 950 TriboIndenter системасы менен сыналган. Үлгүлөр PBS ичинде 22 ± 1 °C температурада гидратацияланган абалда кармалган. Ар бир үлгү үчүн кондилдин борбордук бетинен үчтөн ашык индентация өлчөөсү алынып, ар бир жаныбар боюнча орточо маани талданган.

Creep протоколунда жүк тез 5 µNга чейин көтөрүлүп, 20 секунд туруктуу кармалып, андан кийин тез алынган. Туруктуу жүк мезгилиндеги убакытка көз каранды деформация эки элементтүү жалпыланган Kelvin–Voigt модели менен бааланган.

Моделден эки ретардация убактысы \(\tau_1\) жана \(\tau_2\), эки илешкектүүлүк коэффициенти \(\eta_1\) жана \(\eta_2\), ошондой эле ийкемдүү компоненттер \(E_1\) жана \(E_2\) алынган. Узак убакыт масштабындагы экинчи компонент үчүн:

\[ \tau_2=\frac{\eta_2}{E_2} \]

байланышы колдонулат. Бул жерде \(\eta_2\) ткань матриксинин жайыраак илешкек энергия бөлүштүрүү жүрүм-туруму менен, ал эми \(E_2\) ошол эле механикалык компоненттин ийкемдүү каршылыгы менен байланыштуу. \(\tau_2\)нин азайышы ткань жай убакыт масштабындагы жүк астында кадимки вискоэластикалык кечигүү жүрүм-турумун тезирээк жоготорун көрсөтөт.

Вискоэластикалык Ретардация Убактысы Эмнени Көрсөтөт?

Вискоэластикалык ретардация убактысы вискоэластикалык ткандын берилген механикалык жүк астындагы убакытка көз каранды деформациясынын мүнөздүү ылдамдыгын билдирет. Бул изилдөөдө айрыкча \(\tau_2=\eta_2/E_2\) менен аныкталган узак убакыт масштабындагы компоненттин азайышы үстүңкү фиброкемирчектин жүк астында энергияны жай бөлүштүрүү жөндөмү эрте TMJOA учурунда бузулганын көрсөтөт; изилдөөчүлөр бул өзгөрүү негизинен \(\eta_2\)деги пропорциялык жактан чоңураак төмөндөө менен байланыштуу экенин билдиришкен.

Биринчи жумадагы механикалык натыйжа

Биринчи жумада азайтылган ийкемдүү модуль \(E_r\) MIA жана туздуу эритме топторунун ортосунда окшош бойдон калган. Биринчи Kelvin–Voigt компонентине тиешелүү \(\tau_1\), \(\eta_1\) жана \(E_1\) параметрлеринде да олуттуу айырма билдирилген эмес.

Ал эми узак убакыт масштабындагы экинчи компоненттин \(\tau_2\) мааниси айкын азайган. Орточо \(\tau_2\) туздуу эритме тобунда болжол менен 44 секунддан MIA тобунда болжол менен 23 секундга чейин төмөндөп, айырма статистикалык жактан маанилүү болгон (\(P=0{,}010\)).

\(\eta_2\) да, \(E_2\) да азайган, бирок \(\eta_2\)деги пропорциялык төмөндөө чоңураак болгондуктан, \(\tau_2\)деги азайууну негизинен илешкек энергия бөлүштүрүү жөндөмүнүн жоголушу шарттаган. Ушуга окшош төмөндөө экинчи жумада олуттуу түрдө уланып, төртүнчү жумада ошол эле багыттагы тенденция сакталган.

Эмне үчүн COL1 көлөмү биринчи жумада жалгыз өзү жетиштүү түшүндүрмө бербейт?

Иммунофлуоресценциялык талдоодо дени сак муунда COL1 негизинен SF жана PF–AC өтмө аймагында, ал эми COL2 тереңирээк артикулярдык кемирчек аймагында байкалган.

MIA берилгенден бир жума өткөн соң үстүңкү катмардын кеңейишине байланыштуу COL1 сигналынын мейкиндиктик бөлүштүрүлүшү өзгөргөн, бирок орточо флуоресценция интенсивдүүлүгүндө олуттуу өсүү табылган эмес. COL1 боюнча оң аймак азайуу тенденциясын көрсөткөн (\(P=0{,}13\)). Ошол эле мезгилде Col1a1 жана Col1a2 ген экспрессияларында да өсүү байкалган эмес.

Экинчи жана төртүнчү жумаларда болсо COL1 боюнча оң аймак жана орточо флуоресценция интенсивдүүлүгү жогорулап, экинчи жумада Col1a1 жана Col1a2 экспрессиялары да көбөйгөн. Демек, айкын фиброздук COL1 топтолушу механикалык бузулуу башталган биринчи жумадан кийин пайда болот.

LOX табылгасы жана классикалык фиброз модели менен айырмасы

Гиалин кемирчек остеоартритинде LOX аркылуу жүргөн коллагендин кайчылаш байланыш түзүшү матрикстин катууланышы жана фиброздук өзгөрүү менен байланыштуу болушу мүмкүн. Бирок бул TMJOA моделинде биринчи жумада LOX белогунда айкын өсүү байкалган эмес, Lox транскриптинин деңгээли MIA тобунда азайган.

Бул табылга эрте TMJ фиброкемирчек бузулушун классикалык “LOX көбөйүшү → кайчылаш байланыш → матрикстин катууланышы → фиброз” модели менен толук түшүндүрүү мүмкүн эмес экенин көрсөтөт.

pSHG аркылуу коллаген фибрилдеринин багытталуусу жана молекулалык таңгакталуу

Поляризациялык-резолюциялуу экинчи гармониканы генерациялоо (pSHG) микроскопиясы коллаген фибрилдеринин багытталуусу жана молекулалык тартиби жөнүндө оптикалык маалымат берген. Дени сак контролдук топто үстүңкү катмардагы фибрилдер негизинен муун бетине параллель багытталган.

MIA тобунда фибрилдер 30°–60° жана 60°–90° аралыктарына жылганы, башкача айтканда беттен четтөө көбөйгөнү байкалган. Молекулалык таңгакталуунун көрсөткүчү болгон \(I_2\) бөлүштүрүлүшүнүн чоку мааниси болжол менен 0,275 маанисинен 0,20 маанисине жылган. Изилдөөчүлөр муну коллаген молекулаларынын иреттүү таңгакталуусунун азайышы деп чечмелешет.

SEM аркылуу фибрил боолорунун түз көрүнүшү

SEM сүрөттөрүндө туздуу эритме контролдук тобу тыгыз жана иреттүү фибриллярдык тармакты көрсөткөн, ал эми MIA үлгүлөрүндө одоноураак, топтолгон, чырмалышкан жана ийилген фибрил боолору байкалган. Клетка топтору менен байланыштуу деп эсептелген боштук сымал түзүлүштөр жана беттин үзгүлтүксүздүгүнүн бузулушу да билдирилген.

Бул түзүлүштүк бузулуулар pSHG менен өлчөнгөн фибрил багытынын жоголушу жана молекулалык таңгакталуунун азайышы менен бир эле аймактарда шайкеш келген.

FRAP аркылуу матрикстин өткөрүмдүүлүгү

FRAP талдоосунда 70 kDa флуоресцеин менен белгиленген декстран кемирчек матриксинде тең салмакка келтирилип, тандалган аймак 488 nm лазер менен фототүссүздөтүлүп, флуоресценциянын калыбына келиши убакыт ичинде көзөмөлдөнгөн.

Калыбына келүүнүн жарым убактысы \(t_{1/2}\) молекулалардын матрикс ичинде канчалык тез кайра бөлүштүрүлөрүн көрсөткөн өлчөм. Биринчи жумада MIA тобунун \(t_{1/2}\) мааниси контролдук топко караганда олуттуу кыскараак болгон (\(P=0{,}041\)). Бул натыйжа матрикстин өткөрүмдүүлүгүнүн жогорулашы менен шайкеш келет.

Төртүнчү жумада болсо абал тескери болуп, MIA тобунда \(t_{1/2}\) контролдук топко караганда узагыраак болгон (\(P=0{,}042\)). Изилдөөчүлөр бул кеч мезгилдеги натыйжаны фиброздук кайра түзүлүү менен коштолгон өткөрүмдүүлүктүн азайышы менен байланыштырышкан.

Кеч Мезгилде Көбүрөөк COL1 Механикалык Функцияны Калыбына Келтиреби?

Бул изилдөөдө жок. Төртүнчү жумадагы фиброздук кайра түзүлүүдө COL1 көлөмү көбөйүп, эрте мезгилдеги жогорку өткөрүмдүүлүк тенденциясы тескери өзгөргөнүнө карабастан, узак убакыт масштабындагы вискоэластикалык ретардация баштапкы дени сак деңгээлге кайтып келген эмес. Бул табылга кийин топтолгон патологиялык COL1 табигый коллаген тармагынын өзгөчө фибрил уюшулушун жана убакытка көз каранды механикалык функциясын автоматтык түрдө кайра түзбөй турганын көрсөтөт.

COL12A1 эмне үчүн өзгөчө көңүл бурду?

Изилдөөчүлөр коллаген фибрилдеринин уюшулушу менен байланышкан гендерди ар түрдүү жаныбар түрлөрүндөгү TMJOA транскриптом маалымат топтомдорунда салыштырышкан. Col12a1 келемиш жана чычкан маалымат топтомдорунда туруктуу азайган гендердин бири болгон; билдирилген log2FC маанилери тиешелүүлүгүнө жараша болжол менен −0,31 жана −0,32 болгон.

Үстүңкү катмар өзүнчө талданган коён маалымат топтомунда Col12a1 изилденген гендердин арасында күчтүүрөөк өзгөрүүнү көрсөткөн: log2FC болжол менен −1,65 жана \(P<0{,}05\).

Өздөрүнүн MIA моделиндеги RT-qPCR жана иммунофлуоресценция натыйжалары да биринчи жумада Col12a1/COL12A1 азайышын колдогон. COL12A1 белогунун азайышы төртүнчү жумада да уланышы фибрилди жөнгө салуучу программадагы бузулуу кеч мезгилде да сакталышы мүмкүн экенин көрсөтөт.

COL12A1 Эрте TMJOA үчүн Далилденген Себептик Белги болуп саналабы?

Жок. Изилдөө COL12A1 азайышын эрте үстүңкү фиброкемирчектеги коллаген тармагынын бузулушуна шайкеш молекулалык өзгөчөлүк жана талапкер белги катары көрсөтөт, бирок түздөн-түз Col12a1 функциясын жоготуу же функциясын күчөтүү эксперименти жүргүзүлгөн эмес. Ошондуктан COL12A1 азайышы TMJOA учурундагы архитектуралык же механикалык бузулууну өзү баштай турганы же аны оңдоо оорунун алдын алары бул изилдөө менен далилденген эмес.

SLRP үй-бүлөсүндөгү өзгөрүүлөр

Лейцинге бай майда протеогликандар (SLRP) фибрилдин диаметрин, капталдык өсүшүн, аралыктарын жана коллагендин таңгакталуусун жөнгө салышы мүмкүн. Изилдөөдө Fmod жана Lum биринчи жумада Col12a1 менен кошо азайган.

I класстагы SLRP тобунда убакытка көз каранды башка үлгү байкалган. Dcn биринчи жумада көбөйүп, экинчи жумада азайган; Bgn болсо биринчи да, экинчи да жумада жогорулаган. Изилдөөчүлөр экинчи жумадагы Dcn азайышы менен уланып жаткан Bgn көбөйүшүн фиброздук кайра түзүлүүгө өтүү менен байланышкан молекулалык үлгү катары чечмелешет.

Оорунун эрте жана кеч баскычтары үчүн сунушталган модель

Булак сунуштаган иш модели үч баскычты айырмалайт:

1. Дени сак TMJ: Бетке параллель, жакшы уюшкан табигый COL1 тармагы; кадимки фибрил жөнгө салгычтары; көзөмөлдөнгөн өткөрүмдүүлүк жана кадимки вискоэластикалык энергия бөлүштүрүү.
2. Эрте TMJOA: COL1 көлөмүндө айкын фиброздук өсүү болбостон фибрил багытынын жоголушу, молекулалык таңгакталуунун азайышы, боолордун ирээтсиздиги, өткөрүмдүүлүктүн жогорулашы жана вискоэластикалык ретардациянын азайышы.
3. Кеч TMJOA: Патологиялык COL1 топтолушу жана фиброздук кайра түзүлүү; өткөрүмдүүлүктүн азайышы, бирок табигый матрикстин кадимки вискоэластикалык функциясынын толук калыбына келбеши.

Изилдөөнүн Ыкмасы жана Жыйынтыктары

Колдонулган негизги ыкмалар

Гистологиялык үлгү алуу жана боёо

Муун үлгүлөрү %4 параформальдегид менен фиксацияланып, Kawamoto ыкмасы менен 4 µm калыңдыктагы криокесиндилер даярдалган. Safranin O/Fast Green, толуидин көгү жана H&E боёктору морфология жана матрикс түзүлүшү үчүн колдонулган. Дегенерация эки сокур изилдөөчү тарабынан TMJOA гистологиялык зыян баллы жана модификацияланган Mankin баллы менен бааланган.

pSHG сүрөттөө деталдары

pSHG талдоосунда атайын жасалган көп-фотондуу микроскоп колдонулуп, козгоо толкун узундугу 810 nm болуп коюлган. Сызыктуу поляризация 0° менен 180° арасында 12 тең кадамда айландырылган. Алынган поляризацияга көз каранды SHG интенсивдүүлүгүнөн коллагендин молекулалык таңгакталуу тартиби жана негизги фибрил багыты эсептелген.

SEM даярдоо

Коллаген тармагын айкыныраак көрсөтүү үчүн үлгүлөр 100 mM Soerensen фосфат буферинде; 1 mg/mL гиалуронидаза, 1 mg/mL трипсин жана %0,5 натрий азиди бар эритмеде 37 °Cде үч күн иштетилген. Андан кийин %2,5 глутаральдегид жана %1 осмий тетроксиди менен фиксация, баскычтуу этанол дегидратациясы, критикалык чекитте кургатуу жана осмий менен каптоо жүргүзүлгөн. Беттик фибрилдер SU8600 SEM менен 2 kVда сүрөттөлгөн.

Статистикалык талдоо

Статистикалык талдоолор GraphPad Prism v11.0.2 менен жүргүзүлгөн. Көз карандысыз биологиялык кайталоолордун саны жаныбарлардын санын билдирет; бир эле жаныбардагы кайталанма өлчөөлөр салыштыруудан мурда орточолонгон. Көп убакыт чекиттери жана топторду салыштырууда Tukey post hoc тесттүү эки факторлуу ANOVA, эки топту салыштырууда эки куйруктуу жупташтырылбаган t-тест колдонулган. Башкача көрсөтүлбөсө, маалыматтар орточо ± %95 ишеним интервалы түрүндө берилген жана \(P<0{,}05\) маанилүү деп кабыл алынган.

Негизги сандык натыйжалар

Изилдөө колдогон жыйынтыктар

• MIA моделинде үстүңкү фиброкемирчектин вискоэластикалык функциясы оорунун биринчи жумасында бузулат.
• Бул механикалык бузулуу айкын фиброздук COL1 топтолушунан мурда пайда болот.
• Эрте мезгилде фибрилдердин багытталуусу, молекулалык таңгакталуу, коллаген боолорунун түзүлүшү жана матрикстин өткөрүмдүүлүгү өзгөрөт.
• COL12A1 жана айрым фибрил жөнгө салуучу SLRP үй-бүлө мүчөлөрүнүн экспрессиясы эрте мезгилде азаят.
• Кеч фиброздук COL1 топтолушу табигый тармактын кадимки вискоэластикалык функциясын толук калыбына келтирбейт.
• TMJ фиброкемирчегинде эрте оорунун механикасын баалоодо коллагендин көлөмү сыяктуу эле коллагендин уюшулушу да маанилүү.

Изилдөө колдобогон жыйынтыктар

• Натыйжалар адамдарда эрте TMJOA диагнозу үчүн клиникалык жактан тастыкталган биомаркер сунуштабайт.
• COL12A1 TMJOA оорусун баштай турганы себептик жактан далилденген эмес.
• COL12A1 деңгээлин көбөйтүү TMJOA оорусун дарылары көрсөтүлгөн эмес.
• MIA модели адамдардагы TMJOA оорусунун бардык себептерин чагылдырбайт.
• Эрте архитектуралык бузулуу ар бир TMJOA бейтабында бирдей убакыт графиги менен өрчүй турганы көрсөтүлгөн эмес.
• Натыйжалар түздөн-түз клиникалык дарылоо же диагноз протоколу эмес.

Изилдөөнүн чектөөлөрү

Биринчи чектөө — колдонулган MIA модели химиялык жол менен индукцияланган, тез жана башкарылуучу остеоартрит модели. Бул ыкма эрте окуялардын убактысын аныктоо үчүн пайдалуу болгону менен, өнөкөт механикалык ашыкча жүктөөнү, диск бузулушун жана адам оорусунун узак мөөнөттүү табигый өнүгүшүн толук чагылдырбашы мүмкүн.

Экинчиден, изилдөө негизинен ткань жана матрикс деңгээлиндеги өзгөрүүлөрдү чечмелейт. Үстүңкү фиброкемирчек катмарындагы белок өзгөрүүлөрү тастыкталганы менен, ошол эле моделде жогорку резолюциялуу клетка тиби же мейкиндиктик транскриптом талдоосун жүргүзүү ар түрдүү клетка популяцияларынын салымын дагы так көрсөтүшү мүмкүн.

Үчүнчүдөн, Col12a1 үчүн түз генетикалык функцияны жоготуу же функцияны күчөтүү эксперименти жүргүзүлгөн эмес. Ошондуктан түзүлүштүк, механикалык жана молекулалык натыйжалардын ортосундагы күчтүү убакыт шайкештигине карабастан, так молекулалык себептүүлүк али аныктала элек.

Булак жана Ыкма Жөнүндө Эскертүү

Түпнуска аталыш:Native collagen architecture shapes viscoelastic function during early temporomandibular joint fibrocartilage degeneration

Авторлор: Ruyu Han, Lu Chen, Jingrui Hu, Jingxiao Zhong, Li Zhou, Takashi Takaki, Chie Watanabe, Peter Winlove, Joo-Ri Kim-Kaneyama, Reina Tanaka, Junning Chen, Jun Zhou жана Yo Shibata.

Тең салым кошкон авторлор: Ruyu Han жана Lu Chen.

Жооптуу авторлор: Junning Chen, Jun Zhou жана Yo Shibata.

Негизги мекемелер: Showa Medical University Graduate School of Dentistry; Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital; University of Exeter; University of Sydney; Showa Medical University Center for Electron Microscopy; Showa Medical University Institute for Extracellular Matrix Research; University of New South Wales.

Булактын түрү: Изилдөө препринти.

Рецензия абалы: Рецензиядан өткөн эмес. Булак PDF документинде “This preprint research paper has not been peer reviewed” деген эскертүү ачык көрсөтүлгөн.

Платформа: SSRN.

SSRN каттоо номери: 7086740.

DOI: Булак документинде DOI билдирилген эмес.

Эксперименттик модель: Сегиз жумалык эркек Sprague–Dawley келемиштеринде эки тараптуу 0,5 mg MIA / 50 µL туздуу эритме инъекциясы менен түзүлгөн TMJOA модели; контролдук топко туздуу эритме берилген.

Убакыт чекиттери: 1., 2. жана 4. жумалар.

Негизги ыкмалар: Гистология, иммунофлуоресценция, иммуногистохимия, микро-CT, наноиндентация, эки элементтүү жалпыланган Kelvin–Voigt моделдөөсү, RT-qPCR, pSHG микроскопиясы, FRAP жана SEM.

Этика: Жаныбар эксперименттери ARRIVE принциптерине ылайык жүргүзүлүп, Showa Medical University Animal Care and Use Committee тарабынан 225080 шилтемеси менен бекитилген.

Каржылоо: Japan Society for the Promotion of Science (JSPS) KAKENHI Early-Career Scientists гранттары 23K16036 жана 26K20230; Engineering and Physical Sciences Research Council (EPSRC) New Investigator Award EP/T008059/1.

Кызыкчылыктардын кагылышы: Авторлор кызыкчылыктардын кагылышы жок экенин билдиришкен.

Маалыматтардын жеткиликтүүлүгү: Изилдөөдө талданган транскриптом маалымат топтомдору Gene Expression Omnibusта GSE207463, GSE276088 жана GSE232867 кирүү номерлери менен коомчулукка ачык.

Негизги методологиялык чектөө: Изилдөө адамдардагы клиникалык изилдөө эмес, химиялык жол менен индукцияланган келемиш TMJOA модели. COL12A1 менен эрте коллаген тармагынын бузулушунун ортосунда күчтүү байланыш билдирилгени менен, түз генетикалык себептүүлүк эксперименти жүргүзүлгөн эмес.