Selen inson metabolizmida bir tomonlama ishlaydigan oziq moddasi emas. Yetarli darajada antioksidant himoya va lipid metabolizmiga hissa qo'shsa-da, yuqori darajalarda insulin qarshiligi va jigarda yog' sintezi bilan bog'liq jarayonlarga hamroh bo'lishi mumkin. Shu sababli, selen va jigar salomatligi o'rtasidagi munosabat chiziqli emas, balki past va yuqori darajalarda yomonlashadigan U shaklidagi egri chiziqni hosil qilishi biologik jihatdan mumkindir.

Ushbu preprint tadqiqotida tadqiqotchilar AQSh Milliy salomatlik va ovqatlanishni o'rganish tadqiqotining (NHANES) 2017 - 2020 yil mart davridagi 5.885 nafar kattalarga oid ma'lumotlaridan foydalanib, to'liq qon selen darajasi, oziq-ovqat orqali olinadigan selen, qo'rg'oshin, kadmiy, simob va marganets ta'sirlari hamda FibroScan tomonidan o'lchangan jigar yog'lanishi va qattiqligi o'rtasidagi bog'liqliklarni o'rganib chiqdilar. Asosiy tahlillar mustaqil 2021-2023 NHANES siklidagi 3.310 nafar kattalarda qayta qo'llanildi.

Tadqiqotning markaziy xulosasi shundan iboratki, to'liq qon seleni va jigar yog'lanishining tasviriy ko'rsatkichi bo'lgan boshqariladigan susayish parametri (CAP) o'rtasida U shaklidagi bog'liqlik mavjud. Asosiy kogortada model tomonidan taxmin qilingan eng past CAP qiymati taxminan 140 µg/L to'liq qon selenida yuzaga keldi; ushbu minimum uchun 95 foizlik ishonch oralig'i 138-158 µg/L deb hisoblandi va chiziqli bo'lmagan bog'liqlik uchun P qiymati 0,001 dan past edi. Shunga qaramay, 2021-2023 yilgi tasdiqlash kogortasida U shakli yana ko'rinsa-da, taxminiy minimum taxminan 80 µg/L ga ko'chdi. Shu sababli, tadqiqotning takrorlanuvchi topilmasi ma'lum bir "ideal 140 µg/L" qiymati emas, balki bog'liqlikning chiziqli emasligidir.

Selen, qo'rg'oshin, kadmiy va simobni birgalikda baholovchi Bayes yadrosi mashina regressiyasida (BKMR) ham U shakli yana paydo bo'ldi. Selenning modelga kiritilish ehtimoli 1,00, simobniki esa 0,94 deb hisoblandi. Biroq, bu qiymatlar metallning o'z-o'zidan qanchalik foydali yoki zararli ekanligini ko'rsatadigan ta'sir o'lchamlari emas; metallning aralashma modeli doirasida natija haqida ma'lumot tashish ehtimolini ifodalaydi.

Simob-selen o'zaro ta'siri jigar yog'lanishi yoki qattiqligiga bevosita ahamiyatli ta'sir ko'rsatganligini isbotlab bo'lmadi. Muhim o'zaro ta'sir tadqiqotda tizimli oksidativ stress va glutation metabolizmining ko'rsatkichi sifatida ko'rib chiqilgan gamma-glutamiltransferaza (GGT) balandligi uchun topildi: simob-selen nisbatining oshishi bilan bog'liq ehtimollik nisbati 1,58 edi. Ushbu natija simob-selen antagonizmi mumkin bo'lgan biologik tushuntirishni taklif qilishini ko'rsatsa-da, mexanizmni isbotlamaydi.

Tadqiqot kesma (ko'ndalang) bo'lgani uchun sabab-oqibat munosabatlarini o'rnatib bo'lmaydi. Jigar kasalligi selen metabolizmini va qondagi selen darajasini o'zgartirishi mumkin. Topilmalar selen qo'shimchalarini olishni, 140 µg/L ni shaxsiy maqsad sifatida ishlatishni yoki Hepamet Fibrozis Skorini ushbu populyatsiyada birinchi bosqich skrining vositasi sifatida qabul qilishni qo'llab-quvvatlamaydi.

Tadqiqotning asosiy muammosi nima?

Metabolik disfunksiya bilan bog'liq steatotik jigar kasalligi (MASLD) jigar hujayralarida ortiqcha yog' to'planishi bilan boshlanadigan va ba'zi odamlarda yallig'lanish, fibroz va ilg'or jigar shikastlanishiga olib kelishi mumkin bo'lgan keng kasallik spektridir. Tadqiqotda jigar yog'lanishi FibroScan apparati o'lchagan boshqariladigan susayish parametri (CAP) bilan; jigar qattiqligi esa yana FibroScan tomonidan o'lchangan jigar qattiqligi o'lchovi (LSM) bilan baholandi.

Tadqiqotda qo'llanilgan tasvirlash chegaralari quyidagilardir:

\[ \mathrm{Jigar\ yog'lanishi}=1 \quad \text{agar} \quad \mathrm{CAP} \geq 275\ \mathrm{dB/m} \]

Bu yerda CAP boshqariladigan susayish parametridir. Uning birligi detsibel/metrdir. Tadqiqotda 275 dB/m va undan yuqori o'lchovlar jigar yog'lanishi sifatida tasniflangan.

\[ \mathrm{Ahamiyatli\ fibroz}=1 \quad \text{agar} \quad \mathrm{LSM} \geq 8\ \mathrm{kPa} \]

Bu yerda LSM jigar qattiqligi o'lchovidir. Birligi kilopaskaldir. Tadqiqotda 8 kPa va undan yuqori qiymatlar klinik jihatdan ahamiyatli fibroz ko'rsatkichi sifatida qabul qilindi. Shuningdek, 12 kPa va undan yuqori qattiqlik darajasi ham tavsiflovchi sifatida xabar qilingan.

Tadqiqot javob izlayotgan asosiy savol - to'liq qon seleni ushbu tasvirlash natijalari bilan qanday bog'liqligi. Oldingi ba'zi NHANES tadqiqotlarida selen chiziqli o'zgaruvchi yoki to'rtta alohida toifa sifatida baholangan edi. Bunday yondashuv munosabat ma'lum bir darajaga tushib, keyin yana ko'tarilgan taqdirda egri chiziqning burilish nuqtasini ko'ra olmaydi. Masalan, agar past va yuqori selen darajalari xavf bilan bog'liq bo'lsa, bitta chiziqli koeffitsient bu ikki qarama-qarshi hududni bir-biriga aralashtirib yuborishi mumkin.

Ikkinchi muammo shundaki, odamlar selenga alohida ta'sir qilmaydi. Xuddi shu shaxsda qo'rg'oshin, kadmiy, simob va marganets kabi boshqa metallar ham bo'lishi mumkin. Bu metallar umumiy oziq-ovqat manbalari, atrof-muhit ta'sir qilish yo'llari va o'xshash biologik maqsadlar tufayli bir-biri bilan bog'langan bo'lishi mumkin. Selenni boshqa metallarni hisobga olmasdan baholash, haqiqiy ta'sir qilish tuzilishini noto'g'ri ifodalashi mumkin.

Uchinchi muammo esa simob va selen o'rtasidagi antagonizmdir. Simob va selen bir-biriga bog'lanishi mumkin bo'lganligi sababli, bir elementning biologik mavjudligi boshqasining darajasiga ta'sir qilishi mumkin. Tadqiqotchilar ushbu muvozanat selen-jigar egri chizig'ining shaklini tushuntirib bera oladimi yoki yo'qligini sinab ko'rdilar.

Ishchi guruh qanday shakllantirildi?

Asosiy tahlil NHANES 2017-mart 2020 pandemiyadan oldingi ma'lumotlar fayllariga asoslangan. Xom birlashtirilgan ma'lumotlar to'plamida 24.814 ta yozuv mavjud edi. Pandemiyadan oldingi tegishli ma'lumotlar qismiga o'tish va takroriy yozuvlarni olib tashlash bilan bu son 15.560 ga, 20 yosh va undan katta ishtirokchilar tanlanganda 9.232 ga, homilador ayollarni olib tashlash bilan 9.145 ga tushdi.

Yaroqli FibroScan tekshiruviga ega bo'lgan 7.922 kishi orasidan ham to'liq qon, ham oziq-ovqat orqali olingan selen o'lchoviga ega bo'lgan 6.969 kishi aniqlandi. Biokimyo va to'liq qon tahlili o'lchovlari tugallangandan keyin 6.747 kishi qoldi. Yosh, jins, irq va etnik kelib chiqish, ta'lim, daromad darajasi, chekish, spirtli ichimliklarni iste'mol qilish va umumiy energiya iste'moli kabi asosiy o'zgaruvchilari to'liq bo'lgan 5.885 nafar kattalar asosiy tahlil kogortasini tashkil etdi.

Hepamet Fibrozis Skori och qoringa insulin va och qoringa glyukozani talab qilgani uchun, bu baholash 2.908 kishi bilan o'tkazildi. Skorning fibrozni farqlash faoliyatini baholagan tahlilga 2.810 kishi kiritilgan. Metabolik kasallik bilan o'rtacha spirtli ichimliklarni iste'mol qilishni ifodalovchi MetALD ostguruhida 576 kishi bor edi.

Asosiy kogortada:

• 1.725 kishi, ya'ni 29,3 foiz, MASLD tasnifiga mos keldi.
• 576 kishi, ya'ni 9,8 foiz, MetALD guruhida edi.
• 295 kishi, ya'ni 5,0 foiz, spirtli ichimliklar bilan bog'liq jigar kasalliklari guruhida edi.
• Vaznli jigar yog'lanishi tarqalishi 43,3 foizni tashkil etdi.
• LSM ≥ 8 kPa bilan aniqlangan muhim fibroz tarqalishi 10,7 foizni tashkil etdi.
• LSM ≥ 12 kPa darajasiga yetganlar nisbati 4,2 foiz edi.

Selen va boshqa metallar qanday o'lchandi?

To'liq qon seleni tadqiqotning asosiy selen biomarkeri edi. Qo'rg'oshin, kadmiy, umumiy simob, marganets va selen NHANES laboratoriyasida induktiv ravishda bog'langan plazma massa spektrometriyasi (ICP-MS) yordamida o'lchandi.

Oziq-ovqat bilan olingan selen esa faqat birinchi kungi 24 soatlik oziq-ovqat iste'molini eslashga asoslangan edi. Xuddi shu oziq-ovqat yozuvidan selen/rux va selen/mis nisbatlari hisoblab chiqildi. NHANES 2017 yildan keyin qondagi rux va mis o'lchovlarini davom ettirmagani uchun, bu nisbatlar qon qiymatlaridan emas, balki faqat xabar qilingan kunlik oziq-ovqat iste'molidan olingan.

Asosiy kogortada median to'liq qon seleni 184,12 µg/L, choraklar oralig'i esa 169,02-200,72 µg/L edi. Oziq-ovqat orqali median selen iste'moli kuniga 99,60 µg ni tashkil etdi. Kogorta medianasi modeldagi taxminan 140 µg/L minimumdan yuqori ekanligi ishtirokchilarning yarmidan ko'pi egri chiziqning yuqori selen tomonida joylashganligini ko'rsatadi. Biroq, bu taqqoslash klinik ma'lumotnoma (referans) oralig'ini yaratmaydi.

Nima uchun ham to'liq qon, ham oziq-ovqat seleni ishlatilgan?

Oziq-ovqat yozuvi insonning so'nggi 24 soat ichida nima iste'mol qilganini bildirsa, to'liq qon o'lchovi iste'mol qilish bilan birga yutilish, metabolizm, qo'shimchalardan foydalanish va boshqa biologik jarayonlarga ta'sir qiluvchi umumiy aylanib yuruvchi selen holatini ifodalaydi. Bu ikki o'lchov bir xil narsani o'lchamaydi.

Tadqiqotchilar har ikki selen manbasini bir xil umumlashtirilgan qo'shimcha modelda (GAM) baholab, alohida silliq egri chiziqlarni va ikkisi o'rtasidagi o'zaro ta'sir sirtini hisoblab chiqdilar. Model mantig'ini tushuntirish uchun umumiy tuzilmani quyidagicha ko'rsatish mumkin; bu tenglama maqolada aynan bosilgan tenglama emas, balki foydalanilgan GAM yondashuvining tushuntiruvchi ifodasidir:

\[ g\{E(Y)\}=\beta_0+s_1(\mathrm{Se}_{qon})+s_2(\mathrm{Se}_{dieta})+te(\mathrm{Se}_{qon},\mathrm{Se}_{dieta})+\sum_{k}\beta_kX_k \]

Ushbu ifodada:

• Y, CAP, LSM yoki Hepamet Fibrozis Skori kabi natija o'zgaruvchisi.
• g, natija turiga mos keluvchi bog'lanish funksiyasi.
• s₁ va s₂, qon va ovqatlanish selenining chiziqli bo'lishi shart bo'lmagan egri chiziqlari.
• te, ikki selen manbasining birgalikda hosil qilgan tenzor o'zaro ta'sir yuzasi.
• X_k, yosh, jins, ta'lim, chekish va boshqa moslashtirish o'zgaruvchilari.

Qon va oziq-ovqat seleni o'rtasidagi umumiy o'zaro ta'sir ham CAP, ham LSM uchun muhim edi; ikkala natijada ham P qiymati 0,001 dan past edi. Shunga qaramay, tushuntirilgan dispersiya (variatsiya) past edi. Ikkita selen o'lchovi birgalikda CAP o'zgaruvchanligining 2,3 foizini, LSM o'zgaruvchanligining 0,5 foizini va Hepamet Fibrozis Skori o'zgaruvchanligining 7,1 foizini tushuntirib berdi.

Ushbu ko'rsatkichlar muhim cheklovni qo'yadi: agar selen o'lchanadigan bog'liqlikni ko'rsatsa ham, u jigar yog'lanishini o'z-o'zidan tushuntiruvchi dominant omil emas. Jigar yog'lanishi - bu metabolik, xulq-atvor, genetik va ekologik ko'plab omillardan iborat bo'lgan ko'p omilli jarayon.

Markaziy xulosa: U shaklidagi to'liq qon seleni-CAP munosabati

Besh tugunli cheklangan kubik splin modellarida to'liq qon seleni va CAP o'rtasidagi bog'liqlik chiziqli emas edi. Chiziqli emaslik testi uchun P qiymati 0,001 dan past edi. Model tomonidan bashorat qilingan CAP minimumi taxminan 140 µg/L ni tashkil etdi va 1.000 marta bootstrap qayta namuna olish bilan hisoblangan 95 foizlik ishonch oralig'i 138-158 µg/L edi.

U shakli shuni anglatadiki: modelning past selen zonasidan taxminiy minimumga qarab harakatlanadigan qismida CAP pasayadi, minimumdan keyin esa yuqori selen zonasida yana ko'tariladi. Shu sababli, selenning ta'sirini "qanchalik ko'p bo'lsa, shuncha yaxshi" yoki "qanchalik ko'p bo'lsa, shuncha yomon" shaklidagi bir tomonlama ibora bilan izohlab bo'lmaydi.

2-rasmdagi egri chiziqning chetki qismlarida ishonch tasmalarining kengayishi ham muhimdir. Juda past yoki juda yuqori selen darajalarida ishtirokchilar kamroq bo'lgani uchun modelning noaniqligi ortadi. Egri chiziqning chekka nuqtalari zich kuzatishlarga ega bo'lgan o'rta hudud kabi aniq emas.

Qon seleni to'rt guruhga bo'linganda, jigar yog'lanishi tarqalishi birinchi chorakda 37,5 foiz, ikkinchi chorakda 39,7 foiz, uchinchi chorakda 46,9 foiz va to'rtinchi chorakda 47,2 foizni tashkil qildi. Ushbu qo'pol guruhlash yuqori selen hududidagi o'sishni ko'rsatishi mumkin bo'lsa-da, birinchi chorakdagi juda past darajalarni alohida ko'ra olmaydi. Uzluksiz va moslashuvchan egri modellar U shaklini aniqlash uchun ishlatilishining sababi ham shudir.

Taxminan 140 µg/L maqsadli qiymat sifatida ishlatilishi mumkinmi?

Yo'q. Tadqiqotda hisoblangan 140 µg/L qiymati asosiy kogortadagi statistik model CAP uchun bashorat qilgan minimal nuqtadir. Bu klinik chegara, tavsiya etilgan qon darajasi yoki qo'shimchalar (takviya) maqsadi emas.

Buning eng aniq dalili mustaqil tasdiqlash tahlilidir. 2021-2023 NHANES kogortasida U shaklidagi chiziqli bo'lmagan bog'liqlik yana topildi va P qiymati yana 0,001 dan past edi; ammo taxminiy minimum taxminan 80 µg/L ga ko'chdi. Bu qiymat asosiy kogortaning 138-158 µg/L ishonch oralig'idan tashqarida edi.

Shunday qilib, ikki kogorta o'rtasida takrorlangan topilma egri chiziqning U shaklida ekanligidir. Burilish nuqtasining aniq joylashuvi vaqt, namunalar tuzilishi, ovqatlanish xulq-atvori, qo'shimchalardan foydalanish, o'lchash taqsimoti va boshqa ta'sirlarga qarab o'zgarishi mumkin.

Bundan tashqari, tadqiqotda to'liq qon seleni o'lchangan. Zardob, plazma, soch, tirnoq yoki faqat oziq-ovqat iste'molidan olingan selen qiymatlari bir xil o'lchov emas. Asosiy kogortadagi 140 µg/L natijasini boshqa biologik namuna turlariga to'g'ridan-to'g'ri o'tkazish to'g'ri bo'lmaydi.

Oziq-ovqat orqali olinadigan selen/rux va selen/mis nisbatlari

Tadqiqotchilar kashfiyot maqsadi sifatida selenning oziq-ovqat darajasida rux va mis bilan muvozanatini baholadilar. Eng past uchdan bir qismi (tertial) guruhi bilan solishtirganda quyidagi bog'liqliklar aniqlandi:

Ushbu natijalarning barchasi asosiy kogortada jigar yog'lanishi ehtimoli ko'proq degan yo'nalishda edi. Biroq, E-qiymatlarining 1,47-1,65 oralig'ida bo'lishi o'lchanmagan va faqat o'rtacha kuchga ega bo'lgan chalkashtiruvchi omil (confounder) munosabatlarni tushuntirishi mumkinligini ko'rsatadi.

Eng muhimi, selen/rux nisbatining eng yuqori va eng past guruhlari o'rtasidagi bog'liqlik tasdiqlash kogortasida takrorlanmadi. Ehtimollik nisbati 1,08 ga tushdi; 95% ishonch oralig'i 0,78-1,49 va P qiymati 0,68 edi. Shu sababli, mualliflar oziqlanish nisbatlarini tasdiqlangan natijalar sifatida emas, balki yangi tadqiqot farazlarini keltirib chiqaradigan kashfiyot xulosalari sifatida ko'rib chiqishadi.

Bir kunlik 24 soatlik oziq-ovqatni eslash insonning odatiy uzoq muddatli mikroelementlarni qabul qilishini yomon ifodalashi bu beqarorlikka hissa qo'shishi mumkin. Insonning atigi bir kunda nima yeyayotganiga qarash, uning oylab ovqatlanish tarzini o'lchash bilan bir xil emas.

Selen metall aralashmasida o'zini qanday tutdi?

Odamlar metallarga alohida emas, balki aralashmalar shaklida ta'sir qilganligi sababli, tadqiqotchilar uch xil aralashma usulidan foydalanganlar:

1. Miqdoriy g-hisoblash (quantile g-computation)
2. Vaznli miqdoriy yig'indi regressiyasi (weighted quantile sum regression, WQS)
3. Bayes yadroli mashina regressiyasi (Bayesian kernel machine regression, BKMR)

Bu usullar bitta savolga turlicha farazlar bilan yondashadi. Miqdoriy g-hisoblash butun metall aralashmasining bir vaqtning o'zida chorak qismga ko'tarilishining umumiy natijasini taxmin qiladi. WQS ma'lum bir yo'nalish bo'yicha umumiy indeksdagi metallarning nisbiy og'irligini hisoblaydi. BKMR esa chiziqli bo'lmagan egri chiziqlar va metallar orasidagi o'zaro ta'sirlarni yanada moslashuvchan modellash mumkin.

Miqdoriy g-hisoblashda qo'rg'oshin, kadmiy, simob, marganets va selendan tashkil topgan aralashmaning bir vaqtning o'zida chorak qismga ortishi quyidagi natijalar bilan bog'liq edi:

• CAP uchun umumiy ta'sir ψ = -5,38 dB/m; 95% ishonch oralig'i -8,34 dan -2,42 gacha; P < 0,001.
• LSM uchun ψ = -0,69 kPa; 95% ishonch oralig'i -0,97 dan -0,41 gacha; P < 0,001.
• CAP ≥ 275 dB/m bilan aniqlangan yog'lanish uchun ψ = -0,17; P = 0,001.
• LSM ≥ 8 kPa bilan aniqlangan fibroz uchun ψ = -0,35; P < 0,001.
• Yuqori GGT uchun ψ = +0,28; 95% ishonch oralig'i 0,16-0,41; P < 0,001.

Ushbu ko'rinib turganidek qarama-qarshi natija nega aralashma tahlillarini yagona metall ta'siri kabi o'qimaslik kerakligini ko'rsatadi. Aralashmaning CAP va LSM bilan aloqasi bir yo'nalishda bo'lsa-da, GGT anomaliyasi bilan aloqasi teskari yo'nalishda bo'ldi. Shuningdek, aralashmadagi ijobiy va salbiy og'irliklar har bir metallning alohida himoya qiluvchi yoki zaharli ekanligini anglatmaydi. Og'irliklar modelning umumiy indeksini tashkil etuvchi yo'nalishli hissalardir va metallar orasidagi korrelyatsiyadan ta'sirlanadi.

WQS tahlilida CAP ning ijobiy yo'nalishli indeksida koeffitsient +11,63 ni tashkil etdi va og'irliklarning qariyb 51 foizi marganetsga, 48,9 foizi selenga to'g'ri keldi. Salbiy yo'nalishli CAP indeksida koeffitsient -13,98 edi; og'irliklarning 67,3 foizi kadmiyga, 24,1 foizi qo'rg'oshinga tegishli edi. Ushbu ikki yo'nalish alohida modellardan olinganligi sababli ularni to'g'ridan-to'g'ri bir-biridan ajratib bo'lmaydi yoki bitta individual metall effektiga aylantirib bo'lmaydi.

6-rasmda miqdoriy g-hisoblash natijalari va WQS koeffitsientlari yonma-yon ko'rsatilgan. Ikkita panel har xil shkalalardan foydalanadi: birinchi panel umumiy chorak siljishning ψ ta'sirini, ikkinchi panel esa WQS indeksidagi bir birlik o'zgarishining β koeffitsientini ko'rsatadi. Rasmda raqamlarni panellar bo'ylab to'g'ridan-to'g'ri taqqoslash noto'g'ri.

Bayes aralashmasi modeli U shaklini tasdiqladimi?

Barcha beshta metallni o'z ichiga olgan birinchi BKMR modeli marganets giperparametrida birlashmadi (yaqinlashmadi). Shu sababli tadqiqotchilar qo'rg'oshin, kadmiy, simob va selendan iborat birlashtirilgan to'rtta metall modeli haqida xabar berishdi.

BKMR yondashuvining umumiy mantiqini izoh sifatida quyidagicha ifodalash mumkin:

\[ Y_i=h(\mathrm{Pb}_i,\mathrm{Cd}_i,\mathrm{Hg}_i,\mathrm{Se}_i)+\boldsymbol{\beta}^{T}\mathbf{Z}_i+\varepsilon_i \]

Bu yerda:

• Y_i - odamning jigar natijasi.
• h - to'rtta metallning chiziqli bo'lmagan birgalikdagi ta'sirini ifodalovchi moslashuvchan funksiya.
• Z - moslashtirish o'zgaruvchilari.
• ε - model tushuntira olmaydigan xato komponenti.

Keyinchalik modelga kiritilish ehtimoli qo'rg'oshin, kadmiy va selen uchun 1,00 edi; simob uchun 0,94. Selenning BKMR ta'sir-javob egri chizig'i, shuningdek, taxminan 140 µg/L atrofida aylanuvchi U shaklini takrorladi.

Bu kelishuv muhim, chunki cheklangan kubik splinlar va BKMR turli xil model taxminlariga tayanadi. Xuddi shu shaklning ikkala usulda ham ko'rinishi natijaning faqatgina o'ziga xos egri texnikasiga bog'liq bo'lgan statistik tasvir bo'lish ehtimolini kamaytiradi. Biroq, BKMR natijalari kuzatuv ma'lumotlarini ham sababchi dalilga aylantirmaydi.

Simob-selen antagonizmi qanday baholandi?

Tadqiqotchilar simob-selen muvozanatini uch yo'l bilan sinab ko'rdilar:

1. Simob va selen orasidagi ko'paytma o'zaro ta'sir atamasi
2. Simob/selen molyar nisbatiga qo'llanilgan moslashuvchan egri
3. Molyar nisbatni medianadan past va yuqori sifatida taqqoslash

Tadqiqotda nisbat molyar shkalada ishlatilgan. Molyar nisbatning tavsifiy ko'rinishi quyidagicha; bu ifoda maqolada alohida tenglama sifatida berilmagan:

\[ R_{\mathrm{Hg/Se}}=\frac{C_{\mathrm{Hg}}/M_{\mathrm{Hg}}}{C_{\mathrm{Se}}/M_{\mathrm{Se}}} \]

Bu yerda:

• C_Hg va C_Se simob va selenning massa konsentratsiyasi.
• M_Hg va M_Se elementlarning molyar massalari.
• Bo'lish massaviy kontsentratsiyalarni molyar miqdorga aylantirib, ularni atomlar soni jihatidan taqqoslanadigan holatga keltiradi.

Asosiy kogortada median simob/selen molyar nisbati 0,001 edi. Barcha ishtirokchilar tadqiqotda havola qilingan va simob selenga nisbatan dominant bo'lgan deb hisoblangan 1,0 nisbatidan past edi. Boshqacha qilib aytganda, o'rganilgan populyatsiyada selen miqdori molyar jihatdan simobdan ancha yuqori bo'lgan.

Shunga qaramay, kogortaning o'zidagi nisbat farqlari GGT bo'yicha ma'lumot tashiydi. Logarifmik simob/selen nisbatining oshishining yuqori GGT bilan o'zaro ta'sir qilish ehtimoli nisbati (OR) 1,58 ni tashkil etdi; 95 foiz ishonch oralig'i 1,04-2,41 va P qiymati 0,033 edi.

Aynan o'sha o'zaro ta'sir:

• CAP bilan aniqlangan jigar yog'lanishi uchun ahamiyatli emas edi.
• LSM bilan aniqlangan fibroz uchun ahamiyatli emas edi.
• Hepamet Fibrozis Skori uchun ahamiyatli emas edi.

Bu farq juda muhimdir. Tadqiqot simob-selen antagonizmi bevosita jigar yog'lanishiga olib kelishini ko'rsatmadi. Muhim xulosa, oksidativ stress va glutation metabolizmi bilan bog'liq bo'lgan marker sifatida talqin qilingan GGT da olingan.

Molyar nisbatning moslashuvchan egri chizig'i logarifmik GGT uchun ko'p marta solishtirish to'g'rilanishidan keyin ham chiziqli emas edi; Benjamini-Xochberg tomonidan tuzatilgan q qiymati 0,018 edi. CAP uchun faqat marjinal tendentsiya kuzatilgan bo'lsa, LSM va Hepamet reytinglari chiziqli yoki ahamiyatsiz natijalar berdi.

Kattaroq nisbatga ega bo'lgan odamlarda yog'lanish va fibrozis ehtimoli pastligi, yuqori GGT anomaliyasi bilan ko'tarilish tendentsiyasi bir xil ta'sir balansi biologik o'qlarda turli yo'nalishlarni kuzatishi mumkinligini ko'rsatadi. Mualliflar ushbu holatni to'liq yoqiladigan yoki o'chadigan biologik kalit emas, balki dozaga bog'liq bosqichli antagonizm sifatida izohlaydilar.

GGT selenning jigarga ta'sirini etkazuvchi vositachimi edi?

GGT o't yo'llarida keng tarqalgan bo'lib, alkogol, xolestaz, glutation aylanishi va turli metabolik holatlar bilan o'zgarishi mumkin bo'lgan fermentdir. Tadqiqotchilar GGT ga jigarni fizik ravishda qattiqlashtiruvchi bevosita sabab sifatida emas, balki tizimli oksidativ stress va glutation metabolizmining ko'rsatkichi sifatida yondashdilar.

Uchinchi to'liq qon seleni choragi birinchi chorak bilan solishtirganda, sezilarli fibroz uchun umumiy nisbiy xavf (RR) 0,89 ni tashkil etdi; 95% ishonch oralig'i 0,79-0,97 va P qiymati 0,004 edi.

To'rt tomonlama parchalanishning umumiy munosabati quyidagicha:

\[ TE=CDE+INT_{\mathrm{ref}}+INT_{\mathrm{med}}+PIE \]

Bu yerda:

• TE - umumiy ta'sir.
• CDE - GGT o'zgarmas saqlanganda qoladigan boshqariladigan bevosita ta'sir.
• INT_ref - referens o'zaro ta'sir komponenti.
• INT_med - vositachilik qiluvchi o'zaro ta'sir komponenti.
• PIE - faqat GGT orqali o'tishi taxmin qilingan sof bilvosita ta'sir.

Umumiy ta'sirning parchalangan natijalari quyidagicha edi:

Salbiy bilvosita komponent tufayli foizlar arifmetik ravishda 100 foizdan oshishi mumkin. Bu shuni anglatmaydiki, parchalanish qo'shimcha ta'sir ko'rsatadi; bu tarkibiy qismlardan birining umumiy ta'sirga teskari yo'nalishda ekanligi bilan bog'liq.

Natijada, GGT selenning jigar qattiqligiga ta'sirini tashiydigan tasdiqlangan vositachi bo'lib ko'rinmadi. To'g'rirog'i izoh shuki, GGT bu ta'sirni o'zgartiruvchi va biomarker bo'lib, selen bilan bog'liq bo'lgan ta'sir qaysi oksidlanish muhitida ko'proq namoyon bo'lishini ko'rsatadi.

Hepamet Fibrozis Skori qanday ishladi?

Tadqiqotda Hepamet Fibrozis Skori NHANES ma'lumotlariga ko'ra qayta o'qitilmagan yoki koeffitsientlari o'zgartirilmagan. Ispaniya va Italiyada biopsiyaga asoslangan ishlab chiqish tadqiqotida chop etilgan koeffitsientlar to'g'ridan-to'g'ri LSM ≥ 8 kPa natijasiga qarshi sinovdan o'tkazildi.

Asosiy kogortadagi 2.810 kishilik farqlash namunasida:

• AUROC 0,731 edi.
• 95 foiz ishonch oralig'i 0,699-0,762 ni tashkil etdi.
• Bootstrap optimizmini to'g'rilashdan keyin AUROC 0,730 bo'lib qoldi.
• Skor FIB-4 dan 0,057 AUROC birliklariga ko'ra yaxshiroq ishladi.
• APRI dan 0,072 AUROC birliklari yaxshiroq ishladi.
• NAFLD Fibrozis Skoridan 0,029 AUROC birliklari yomonroq ishladi.

AUROC fibrozga chalingan va fibrozga chalinmagan odamlarni tartibga solish qobiliyatini ko'rsatadi. Ammo shaxsni to'g'ri reytinglaydigan skor, u beradigan mutlaq xavf foizlari to'g'ri ekanligini anglatmaydi. Ushbu ikkinchi xususiyat kalibrlash orqali baholanadi.

Asosiy kogortadagi Hepamet skorini kalibrlash yomon edi:

• Kalibrlash kesishmasi 2,738 edi; 95% ishonch oralig'i 2,038-3,437.
• Kalibrlash qiyaligi 0,532 edi; 95% ishonch oralig'i 0,452-0,612.
• Hosmer-Lemeshow testi P < 0,001 edi.

Ideal tashqi kalibrlashda kesishish nolga, qiyalik birga yaqinlashishi kutiladi. Bu erdagi og'ish biopsiya orqali ishlab chiqilgan Yevropa ballarini AQSh aholisining elastografiya natijalariga to'g'ridan-to'g'ri qo'llash mutlaq xavflarni to'g'ri bermasligini ko'rsatdi.

Oqim sxemasida chop etilgan 0,47 yuqori xavf chegarasidan oshib ketgan atigi besh kishi borligi ham ushbu populyatsiyaga ballni xuddi shu chegara bilan o'tkazish muammoli bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.

2021-2023 yilgi tekshirish kogortasida AUROC 0,656 gacha tushdi; 95% ishonch oralig'i 0,606-0,703 edi. Ishonch oralig'i asosiy kogorta hisob-kitoblariga to'g'ri kelmadi. Shunday qilib, tadqiqot ushbu populyatsiyada birinchi darajali skrining vositasi sifatida Hepamet reytingidan foydalanishni qo'llab-quvvatlamaydi.

Mustaqil tasdiqlash qanday natijalarni qo'llab-quvvatladi?

Tasdiqlash kogortasi 3.310 nafar kattalardan, fibroz shkalasi namunasi esa 1.835 kishidan iborat edi. Xuddi shu kompleks namuna og'irliklarini hisobga olgan holda tahlillar takrorlanib, asosiy topilmalar vaqt o'tishi bilan davom etayotganini ko'rdi.

8-rasmning asosiy xabari shundaki, xulosaning faqat statistik ahamiyatga ega bo'lishi yetarli emas. U shaklining umumiy shakli har ikki davrda ham ko'ringan bo'lsa-da, ovqatlanish nisbati, aniq burilish nuqtasi va bashorat qilish ko'rsatkichlari vaqtga bog'liq edi.

U shakli uchun tavsiya etilgan biologik tushuntirishlar

Tadqiqotchilar U-egrisining ikki shoxi turli biologik jarayonlardan kelib chiqishi mumkinligini muhokama qiladilar.

Pastki selen tomoni: Selen glutation peroksidazalar kabi selenoproteinlarning tuzilishida ishtirok etadi. Selen yetishmovchiligi bo'lsa, glutation peroksidaza 4 kabi lipid peroksidlarini tozalaydigan mudofaa tizimlarining samaradorligi pasayishi mumkin. Fosfolipid gidroperoksidlarining to'planishi yog'ga boy jigar hujayralarini temirga bog'liq hujayra o'limi - ferroptozga ko'proq moyil qilishi mumkin.

Yuqori selen tomoni: Ortiqcha selen jigardan kelib chiqqan selenoprotein P ajralishini oshirishi mumkin va selenoprotein P insulin signalini susaytirib, jigar yog'i sintezini qo'llab-quvvatlashi mumkin.

Bu tushuntirishlar tadqiqotning o'lchangan mexanizmi natijalari emas. Glutation peroksidaza 4, lipid peroksidlari, ferroptoz ko'rsatkichlari yoki selenoprotein P tadqiqotda o'lchanmagan. Shuning uchun, bu mexanizmlar kuzatilgan epidemiologik egri chiziqqa mos keladigan biologik talqinlardir; ushbu ma'lumotlar to'plamida isbotlangan vositachi yo'llar emas.

Tadqiqotning kundalik hayotdagi ma'nosi

Tadqiqot shuni ko'rsatadiki, selenni oddiygina "yaxshi antioksidant" yoki "zararli metall" sifatida bir tomonlama tasniflash mumkin emas. Oziq moddalarning etarli darajasi va yuqori darajasi bir xil biologik natijani bermasligi mumkin. Bundan tashqari, elementning ta'siri insonning boshqa metallarga bo'lgan ta'siridan va uning metabolik holatidan mustaqil bo'lmasligi mumkin.

Biroq, bu natijalar odamlar qondagi selenni 140 mkg / L ga etkazishga harakat qilishlari kerak degani emas. Minimalning taxminan 80 mikrogram/l ga o'tishi tasdiqlash kogortasida ushbu qiymatdan shaxsiy maqsad sifatida foydalanib bo'lmasligini aniq ko'rsatmoqda.

Shuningdek, tadqiqot:

• Selen qo'shimchasining jigar yog'lanishining oldini olishini ko'rsatmaydi.
• Yuqori selen to'g'ridan-to'g'ri jigar kasalligini keltirib chiqarishini isbotlamaydi.
• Simobning jigar uchun himoya vositasi ekanligini ko'rsatmaydi.
• Ratsiondagi selen/rux yoki selen/mis nisbati uchun klinik maqsadlarni taklif qilmaydi.
• Hepamet Fibrozis Skori klinik qarorlar qabul qilish uchun o'z-o'zidan yetarli ekanligini ko'rsatmaydi.

Amaliy ma'noda eng mas'uliyatli talqin shundaki, ortiqcha selen qo'shimchasi "ko'proq antioksidantlar yaxshi" degan fikr bilan ishlatilmasligi kerak va har qanday biomarker natijasi klinik nuqtai nazardan baholanishi kerak. Biroq, ushbu tadqiqotning o'zi joriy oziq-ovqat yoki davolash bo'yicha tavsiyalarni o'zgartirish uchun sababchi dalillarni taqdim etmaydi.

Tadqiqotning kuchli tomonlari

• Jigar yog'lanishi nafaqat diagnostika kodi yoki insonning o'zini o'zi e'lon qilishi, balki FibroScan o'lchovlari bilan baholandi.
• NHANES ning kompleks namuna og'irliklari yordamida AQSh kattalar aholisini ifodalovchi taxminlar tuzildi.
• Selen to'liq qon biomarkeri hamda ovqatlanish jurnali yordamida baholandi.
• Chiziqlilikni dastlabdan faraz qilishning o'rniga, GAM va cheklangan kubik splinlar ishlatildi.
• Aralashmalar uchta xil usul, ya'ni miqdoriy g-hisoblash, WQS va BKMR orqali o'rganildi.
• U shakli mustaqil 2021-2023 NHANES kogortasida sinab ko'rildi.
• Tahlil rejasi kogorta yopilishidan oldin OSF-da oldindan yozib qo'yildi.
• Noto'g'ri kashfiyot darajasi asosiy va ostguruh test oilalarida alohida nazorat qilindi.
• Chegara (ekstremal) qiymatlarni kesish, bir necha bor to'ldirish, FibroScan bajarilishi uchun teskari ehtimollik og'irligi, E-qiymatlari va bootstrap minimumi tahlili kabi oldindan rejalashtirilgan sezgirlik tahlillari qo'llanildi.

Tadqiqotning cheklovlari

Kesma (ko'ndalang) dizayn: Selen va jigar o'lchovlari bir vaqtning o'zida olingan. Shu sababli, birinchi navbatda yuqori yoki past selenmi yoxud jigar kasalligimi yuzaga kelganini aniqlab bo'lmaydi. Mavjud jigar kasalligi selenoprotein P va aylanib yuruvchi selen darajasini o'zgartirishi mumkin. Teskari sababiylik kuzatilgan egri chiziqning bir qismini tashkil qilishi mumkin.

Bir kunlik oziq-ovqat yozuvi: Ovqat bilan qabul qilingan selen, rux va mis faqat bitta 24 soatlik eslashga asoslangan. Kundalik o'zgaruvchanlik mikronutrient nisbatlarini beqarorlashtirishi va haqiqiy uzoq muddatli munosabatlarni zaiflashtirishi mumkin.

Umumiy selen o'lchovi: NHANES umumiy to'liq qon selenini o'lchadi; selenoprotein P, GPx3, GPx4 yoki turli xil kimyoviy selen turlari alohida o'lchanmadi. Shuning uchun egri chiziqning ikki tomoni turli selenoprotein yo'llaridan kelib chiqqanligi bevosita ko'rsatilmadi.

GGT ning o'ziga xos emasligi: GGT oksidlanish stressi hamda spirtli ichimliklar iste'moli, o't yo'llari jarayonlari va xolestaz kabi omillardan ta'sirlanishi mumkin. GGT o'zaro ta'siri faqatgina glutation holatining toza o'lchovi sifatida ko'rilmasligi kerak.

Model yaqinlashishidagi muammo: Besh metalli BKMR modeli marganets giperparametriga yaqinlashmadi. BKMR ning so'nggi natijalari marganets chiqarib tashlanganidan keyin yaratilgan to'rt metal modeliga asoslangan.

Tanlash va yetishmayotgan ma'lumotlar: Yaroqli FibroScan tekshiruvi mos keluvchi odamlarning faqat bir qismidagina yakunlangan va uni yakunlaganlar odatda ozg'inroq bo'lishi aytilgan. To'liq ma'lumotni talab qiluvchi asosiy tahlil yetishmayotgan o'lchovli ishtirokchilarni hisobga olmadi.

Kichik kichik guruhlar: MetALD ostguruhi va ba'zi yuqori xavfli sinflar kichik edi. Ushbu kichik tahlillarning noaniqligi yuqoriroqdir.

Minimal nuqtaning beqarorligi: Egri chiziqning U shakli tasdiqlangan bo'lsa-da, minimum 140 µg/L dan taxminan 80 µg/L ga siljigan. Bu bitta biologik maqbul qiymatni taklif qilishga to'sqinlik qiladi.

Klinik tasdiqlashning yo'qligi: Tadqiqot jigar biopsiyasiga, istiqbolli kuzatuvga yoki boshqariladigan selen aralashuviga asoslanmagan. Topilmalar klinik davolash effekti yoki qo'shimchalar xavfsizligining dalili emas.

Tadqiqot nima deydi, nima demaydi?

Tadqiqot Usullari va Natijalari

Tadqiqot dizayni

Moslashtirish o'zgaruvchilari

Birlamchi moslashtirish guruhi oldindan tuzilgan yo'naltirilgan asiklik grafga asoslangan edi. Modelga yosh, jins, irq va etnik kelib chiqish, ta'lim, qashshoqlik-daromad nisbati, chekish tarixi, hozirgi alkogol iste'moli va jami energiya qabul qilinishi kiritildi.

Tana massasi indeksi, glikozillangan gemoglobin, LDL xolesterin, qon bosimi va diabet selendan keyin kelishi mumkin bo'lgan vositachi-chalkashtiruvchi o'zgaruvchilar sifatida baholandi. Bular birlamchi jami ta'sir modeliga qo'shilmagan; ular nazorat qilinadigan bevosita ta'sir sezuvchanlik modelida ishlatilgan. Ushbu tanlov selenning metabolik yo'llar orqali davom etishi mumkin bo'lgan jami bog'liqligini ortiqcha moslashuv bilan yo'q qilmaslik maqsadi bilan qilingan.

Chiziqli bo'lmagan tahlillar

• Qon va parhez seleni uchun umumlashtirilgan qo'shimcha modellar (GAM) ishlatilgan.
• Ikkala manbaning umumiy ta'siri tenzor ko'paytmasi o'zaro ta'siri yordamida o'rganildi.
• Yakallangan selen o'lchovlari besh tugunli cheklangan kubik splaynlar (RCS) yordamida modellashtirilgan.
• Tugunlar (uzellar) 5-, 27,5-, 50-, 72,5- va 95-persentillarga joylashtirilgan.
• Chiziqli bo'lmagan model ichiga kiritilgan chiziqli model bilan taqqoslangan.
• CAP minimumi bootstrap usuli bilan qayta namuna olinib, ishonch oralig'i aniqlangan.

Aralash tahlillarning texnik ma'nosi

Miqdoriy (quantile) g-hisoblashdagi ψ, barcha metall komponentlari bir vaqtning o'zida bitta chorakga (quantile) ko'tarilganida kutilgan umumiy o'zgarishni ifodalaydi. Uzluksiz natijalar uchun tushuntirish taqdimoti shunday:

\[ \Delta E(Y)=\psi \quad \text{barcha metall ko'rsatkichlari bir daraja birgalikda oshganda} \]

ψ bu alohida bir metallning koeffitsienti emas. U barcha aralashmaning umumiy yo'nalishini umumlashtiradi.

WQS og'irliklari, aniq yo'nalishdagi indeks ichida metallarning nisbiy hissasidir. Yuqori og'irlik - bu bevosita sababiy ta'sir, zaharli (toksik) yoki himoya qiluvchi xususiyatlarning isboti emas.

BKMR ning posterior kirgizish ehtimoli (posterior inclusion probability) ham ta'sir kattaligi hisoblanmaydi. U boshqa ta'sirlarni va model noaniqligini hisobga olgan holda, o'zgaruvchining natija bilan bog'liq funksiyada qolish ehtimolini ko'rsatadi.

Asosiy raqamli xulosalar

Ko'pkarra (multiple) testlash, sezgirlik va oldindan ro'yxatdan o'tkazish

Noto'g'ri kashfiyotlar darajasi (False discovery rate - FDR) birlamchi va kichik guruh (subguruh) test oilalarida 0,05 darajasida alohida nazorat qilingan. Tadqiqotda o'nta oldindan rejalashtirilgan sezgirlik tahlillari qo'llanilgan bo'lib, bular qatoriga: bitta manbali selen modellari, ekstremal (outlier) qiymatlarni qirqish, yetishmayotgan ma'lumotlar uchun ko'pkarra kiritish (multiple imputation), FibroScan tekshiruvini tugatish ehtimoliga ko'ra teskari ehtimollik og'irliklari, o'lchanmagan chalkashtiruvchi (confounder) omillar uchun E-qiymatlari va minimum nuqtasining bootstrap tahlili kiradi. Tahlillarda sobit (fixed) tasodifiy son zarrasi (random seed) ishlatilgan.

Tadqiqot farazlari va tahlil rejasi kogorta yopilishidan oldin Open Science Framework (OSF) da ro'yxatdan o'tkazilgan. Matnda, oldindan ro'yxatga olishdan chetga chiqish holatlari loyiha yozuvlarida ro'yxatga olinganligi ko'rsatilgan. Xabar berish uchun STROBE, TRIPOD-AI, AGReMA va STROBE-MR tamoyillaridan foydalanilgan.

Manba va uslub haqida eslatma

Bu matn Jie Li, Xiubo Sun, Jing Zhang, Lijie Zhai va Ling Yu tomonidan tayyorlangan “Whole-blood selenium, mercury–selenium antagonism, and a multi-metal mixture in steatotic liver disease: a U-shaped association in NHANES with FibroScan” nomli tadqiqotga asoslangan.

Manba SSRN-da elektron nusxasi mavjud bo'lgan taqrizdan o'tmagan (preprint) tadqiqot maqolasidir. Matnda “This preprint research paper has not been peer reviewed” degan aniq ogohlantirish bor. Shuning uchun, bu ish ilmiy taqrizchilar (peer-review) tomonidan ko'rib chiqilmagan. Matnda maqolani jurnal qabul qilgani haqidagi ma'lumot yoki maqolaning DOI raqami keltirilmagan. 10.17605/OSF.IO/2FWN5 raqami tadqiqotning OSF oldindan ro'yxatdan o'tkazilgan (pre-registration) DOI raqamidir.

Tadqiqot yangi klinik sinov, laboratoriya yoki hayvonlar ustida o'tkazilgan tajriba emas. Bu AQSh NHANES ma'lumotlariga asoslangan kesma (ko'ndalang) va kuzatuvchi ikkilamchi tahlildir. Jigar bilan bog'liq natijalar FibroScan CAP va LSM o'lchovlariga tayanadi; jigar biopsiyasi, uzoq muddatli kuzatuv yoki selen terapiyasi qo'llanilmagan.

Tadqiqotning kesma (ko'ndalang) dizayni tufayli selen va jigar yog'lanishi o'rtasidagi bog'liqlik yo'nalishini aniqlab bo'lmaydi. Xulosalar sabab-oqibat (nedensellik), davolash ta'siri, qo'shimchaning (takviya) foydasi, qo'shimchaning xavfsizligi yoki qondagi selen miqdori bo'yicha shaxsiy maqsadlarni belgilab bermaydi.

Mualliflar o'z tadqiqotlari oxirida bu natijalar selen qo'shimchalarini (takviya) qabul qilishni oqlamasligini, bu populyatsiyada birinchi bosqich skrining vositasi sifatida Hepamet Fibrozis Skorini tavsiya etmasligini hamda aniq yo'nalish faqat istiqbolli (prospektiv) kogortalar, turli selenoproteinlarni alohida o'lchash, takroriy ovqatlanish qaydlari (dieta yozuvlari) va biopsiya orqali tasdiqlangan jigar natijalari bilan hal etilishi mumkinligini ochiq aytganlar.

Mualliflarning aytishicha, sun'iy intellekt (AI) vositalari tadqiqot dizaynini yoki ilmiy talqinni (interpretatsiyani) belgilash uchun ishlatilmagan. Tadqiqotchilar analitik rejani tugatgandan so'ng, u faqat topshirishdan oldingi (pre-submission) ba'zi sezgirlik tahlillarida kodlarni qo'llashda va jumla darajasida til tahriri (tahrirlash) uchun cheklangan tarzda ishlatilgan. Mualliflar barcha raqamli xulosalarni statistik natijalar bilan tekshirib, tasdiqlaganliklarini va tadqiqot uchun mas'uliyatni o'z zimmalariga olganliklarini ma'lum qilganlar.

Tadqiqotda manfaatlar to'qnashuvi bildirilmagan. NHANES ning asosiy protokoli tegishli etika qo'mitasi tomonidan ma'qullangani va ishtirokchilardan yozma rozilik olingani aytilgan. Mavjud tadqiqot anonimlashtirilgan, ommaviy ma'lumotlarning ikkilamchi tahlili bo'lganligi sababli, qo'shimcha etika qo'mitasi ruxsatini talab qilmadi.

Ushbu maqola faqatgina yuklangan ilmiy tadqiqotning usullari, natijalari, jadvallari, rasm va sxemalari, cheklovlari (limitations) va muallifning izohlariga asoslanib tayyorlangan. Tadqiqotda yo'q bo'lgan klinik, tijorat yoxud sababiy iddaolar kiritilmagan. Izoh tushuntirish maqsadida taqdim etilgan umumiy GAM, BKMR, molyar nisbat va to'rt tomonlama dekompozitsiya formulalari tegishli usullarning mantiqini tushunishni osonlashtirish uchun foydalanilgan va ular asl maqoladagi bosilgan tenglamalar emasligi aniq ko'rsatilgan.[cite: 2]