Глиобластома, хызлы бүйүмеси, мээ тканыna йайгын бичимде сызмасы жана учурдагы дарылооlere диренч гелиштирмеси себебинен дарылооsi акыркы дереже гүч бир мээ шишигиdür. Cerrahi, радйотерапи жана темозоломид дарылооsine рагмен түмөрүн текрарлама риски жогоркуtir. Жаңы дарыların гелиштирилмесини зорлаштыран негизги сорунлардан бири, меркези синир системини долашымдаки мадделерден коруйан кан-мээ тосмосуdir. Бул тосмо, кичинекей молекүллерин чоң bөлүмünün жана цетуксимаб гиби чоң бийоложик дарыların бейне йетерли миктарда улашмасыны енгеллер.

цетуксимаб, эпидермалдык өсүү факторунун рецепторуne, йани EGFR’йе багланан болжол менен 150 kDa бүйүклүгүнде бир моноклоналдык антителоdur. EGFR, Глиобластомаların маанилүү бир bөлүмünde чогалмыш же ашыры ифаде едилмиш болушу мүмкүн. Муну менен бирге цетуксимабın молекулалык бүйүклүгү жана кан-мээ тосмосуni гечемемеси, илажын Глиобластомаda еткили йогунлуклара улашмасыны сынырлар.

Бул изилдөөдө изилдөөчүлөр цетуксимабı коруйарак ташыйабилежек, кан-мээ тосмосу клеткаleriyle еткилешебилежек жана Глиобластома клеткаlerine йөнленебилежек полимерик нанобөлүкчөлөр гелиштирмиштир. нанобөлүкчөлөрдүн темелини, китосан үзерине поли(метил метакрилат-ко-акрилик асит) зинжирлери ашыланарак олуштурулан CPMA кополимери менен содйум алжинат арасындаки електростатик комплекслешме олуштурмактадыр.

ташуу системасы системин йүзейи, α_вβ₃ жана α_вβ₅ интегринлерине багланабилен сиклик жRGDfV пептидийле ишлевселлештирилмиштир. Бул интегринлер хем кан-мээ тосмосу ендотелинде хем де Глиобластома клеткаlerinde булунабилдиги үчүн систем ики ашамалы бир бутага багыттоо мантыгына сахиптир. алгачкы ашамада пептит-интегрин еткилешими нанобөлүкчөнүн тосмо клеткаleri тарафындан алынмасыны жана клетка ичинден ташынмасыны дестеклемектедир. Икинжи ашамада ташынан цетуксимабın Глиобластома клеткаlerindeki EGFR синйалини баскыламасы амачланмактадыр.

нанобөлүкчөлөр T-баглантылы бир микроагымдык системде, сулу ортамда жана сүрекли акыш алтында кош өзүнөн-өзү уюшуу ыкмаiyle үретилмиштир. бутага багытталган жана цетуксимаб йүклү акыркы формүласйонун динамик ышык сачылымыйла өлчүлен орталама гидродинамикалык диаметрı 322 ± 24 нм, полидисперсите индекси 0,24 ± 0,02 жана зета потенциалы -15 ± 2 mV табылган. Kriyojenik електрон микроскобунда исе жогорку дережеде хидратланмыш полимер табакасынын булунмадыгы геометрик чап болжол менен 150 нм катары гөрүлмүштүр.

цетуксимаб капсулалоо натыйжалуулугу %99,0 ± 0,7, нанобөлүкчө агырлыгына гөре дары жүктөө катышы исе %16,2 ± 0,07 катары өлчүлмүштүр. SDS-PAGE жыйынтыктарı, антикорун нанобөлүкчө ичинде булундугуну жана карактеристик оор жана хафиф зинжирлеринин саптанабилдигини гөстермиштир.

цетуксимабın 48 саатlik салымы физиологиялык pH 7,4’те болжол менен %29, көбүрөөк асидик pH 6,5’те болжол менен %21 олмуштур. Asidik ортамда көбүрөөк хызлы салым бекленебилежеги hâlde бул системде салым йавашламыштыр. изилдөөчүлөр буну, асидик pH’да анйоник полимер бөлгелеринин ийонлашмасынын азалмасы, полимер агынын көбүрөөк аз су алмасы жана антикорун гечебилежеги еткин гөзенеклерин күчүлмесийле ачыкламактадыр.

кан-мээ тосмосуni таклит етмек үчүн кулланылан hCMEC/D3 адам мээ микроваскүлер ендотел клеткаlerinde, бүтүн нанобөлүкчө групларында клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү 4 жана 24 саат сонунда %70’ин үзеринде калган. Hedefleyici пептит булунан нанобөлүкчөлөрдүн клетка ичине алынышы, хедефленмемиш формүласйонларын болжол менен ики катына улашмыштыр. клеткаlerin 4 °C’де инкүбе едилмеси алымы чоң өлчүде дурдурмуш, 37 °C’де исе айкын алым гөрүлмүштүр. Бул жыйынтык, нанобөлүкчө гиришинин пасиф дифүзйондан көп енержи геректирен ендоситоз меканизмаларына дайandыгыны дестеклемектедир.

бутага багытталган цетуксимаб йүклү формүласйонун йапай кан-мээ тосмосу моделиндеки көрүнгөн өткөрүмдүүлүк коэффициенти 8,40 ± 0,16 × 10^-7 жм/с табылган. Hedefleyici пептит ичермейен цетуксимаб йүклү системде бул маани 5,83 ± 0,26 × 10^-7 жм/с’дир. Бөйлеже пептит ишлевселлештирмеси тосмо модели бойунжа ташынмайы болжол менен %25-45 артырмыштыр.

U87 Глиобластома клеткаlerinde бутага багытталган цетуксимаб йүклү нанобөлүкчөлөрдүн клетка ичине алынышы, 37 °C’де %17,37 ± 0,78 FITC-позитиф клетка дүзейине улашмыштыр. цетуксимаб ичермейен бутага багытталган нанобөлүкчөлөрda бул катыш %11,40 ± 1,10’дур. En жогорку нанобөлүкчө йогунлугунда жана 24 саат сонунда U87 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү %50’нин алтына дүшмүштүр.

Бул жыйынтыктар, нанобөлүкчөлөрдүн цетуксимабı жогорку веримле капсүллейебилдигини, интегрин бутага багыттооnin йапай тосмо жана Глиобластома клеткаlerinde алымы артырдыгыны жана капсүлленмиш антикорун U87 клеткаlerinde бийоложик еткисини корудугуну дүшүндүрмектедир. Бирок изилдөө йалнызжа клетка күлтүрү дүзейиндедир. нанобөлүкчөлөрдүн жанлы бир организмада кан-мээ тосмосуni гечип гечмедиги, түмөрде бирикип бирикмедиги, саглыклы органлара дагылымы, гүвенлиги жана түмөр бүйүмеси үзериндеки таасири араштырылмамыштыр.

Глиобластомаnın дарылооsini зорлаштыран темел сорун

Глиобластома, еришкинлерде гөрүлен ен салдырган биринжил мээ түмөрлеринден биридир. изилдөөнүн гириш bөлүмünde актарылан верилере гөре малигн глиомаларын болжол менен йарысыны олуштурмакта жана хызлы клетка чогалмасы, чевредеки мээ тканыna йайгын сызма жана дарылооlere диренчле карактеризе едилмектедир.

Учурдагы стandарт йаклашым мүмкүн болгон ен гениш жеррахи чыкарымы, радйотерапийи жана темозоломид темелли кемотерапийи ичерир. Buna рагмен макаледе актарылан клиникалык литератүре гөре медйан аман калуу болжол менен 12-15 ай дүзейинде калмактадыр.

Глиобластомаnın дарылооye диренчли олмасында бирден ашыкча еткен булунмактадыр:

• Түмөр клеткаlerinin мээ тканыnun ичине микроскобик узантылар hâlinde йайылмасы,
• Ошол эле түмөр ичиндеки клеткаlerin генетик жана бийоложик катары бирбиринден ар башка олмасы,
• Glioma көк клеткаsi бензери клеткаlerin дарылоо сонрасында хайатта калабилмеси,
• Түмөрүн метаболик жана генетик уйум йетенеги,
• EGFR, PI3K/Akt/mTOR жана Ras/Raf/MEK/ERK гиби бүйүме синйаллеринин еткинлешмеси,
• кан-мээ тосмосуnin системик дарыların түмөре улашмасыны енгеллемеси.

Бул изилдөө түм бул сорунларын тамамыны чөзмейи амачламамактадыр. изилдөөнүн одак ноктасы, чоң бир бийоложик дары болгон цетуксимабın кан-мээ тосмосуyle каршылашан ташыма сорунуна йөнелик бир нанотехнология платформу гелиштирмектир.

кан-мээ тосмосу неден бул кадар күчтүү бир енгелдир?

кан-мээ тосмосу, мээ кылжал дамарларыны олуштуран ендотел клеткаlerinin сыкы баглантыларла бирбирине баглandыгы өзел бир бийоложик филтредир. Бул клеткаler, мадделерин кandан мээ тканыna гечишини акыркы дереже сыкы бичимде дүзенлер.

изилдөөнүн гиришинде актарылан литератүре гөре тосмо:

• Кичинекей молекүллерин болжол менен %98’ини,
• моноклоналдык антителоlar dâhil олмак үзере макромолекүллерин нередейсе тамамыны

меркези синир системинин тышында тутмактадыр.

Глиобластома китлесинин меркезиндеки дамарлар кысмен гечирген болушу мүмкүн. Buna каршын түмөрүн чевре мээ тканыna сызан кенарлары көбүрөөк саглам бир кан-мээ тосмосу тарафындан корунур. Түмөр текрарынын сыклыкла бул сызыжы клеткаlerin калдыгы бөлгелерде башламасы, йалнызжа түмөр чекирдегине улашабилен дарылооlerin йетерсиз калмасына неден болушу мүмкүн.

цетуксимаб неден сечилди?

цетуксимаб, EGFR’нин клетка дышы bөлүмüne багланан кимерик IgG1 сыныфы бир моноклоналдык антителоdur. болжол менен молекүл бүйүклүгү 150 kDa’дыр.

EGFR’нин еткинлешмеси клетка ичинде ики маанилүү синйал агына багланмактадыр:

• PI3K/Akt/mTOR йолу: клеткаnin хайатта калмасы, енержи колдонулушу, метаболик уйум жана апоптоздан качышла байланыштууdir.
• Ras/Raf/MEK/ERK йолу: клетка чогалмасы, гөч, дамар олушуму жана түмөр бүйүмесини дестеклейебилир.

изилдөөдө актарылан арка план билгисине гөре EGFR, Глиобластомаların болжол менен %40-45’инде чогалмыш же ашыры ифаде едилмиш болушу мүмкүн. EGFRvIII адлы сүрекли еткин мутант бичим де түмөр бүйүмесини дестеклейебилир.

цетуксимаб EGFR’йе багланарак лигandын ресептөрү уйармасыны жана ашагы акым бүйүме синйаллеринин еткинлешмесини азайтышы мүмкүн. Бирок Глиобластомаda асыл сорун антикорун молекулалык хедефинин булунмамасы эмес, антикорун хедефе улашамамасыдыр.

Бул изилдөөda цетуксимаб жаңы бир дары катары гелиштирилмемиштир. Учурдагы антикорун полимерик бир ташуу системасы ичинде капсүлленерек мээ тосмоi жана Глиобластома клеткаlerine ташынмасы араштырылмыштыр.

Ики ашамалы бутага багыттоо мантыгы

нанобөлүкчөнүн йүзейине багланан жRGDfV пептиди, α_вβ₃ жана α_вβ₅ интегринлерине жогорку багланма егилими гөстеребилен сиклик бир RGD пептидидир.

Бул интегринлерин ики ар башка бөлгеде булунмасы изилдөөнүн бутага багыттоо стратежисинин темелини олуштурур:

1. кан-мээ тосмосу ендотелинде бутага багыттоо: Peptit-интегрин еткилешиминин нанобөлүкчөнүн ендотел клеткаsi тарафындан алынмасыны жана трансситозла клеткаnin дигер тарафына ташынмасыны колайлаштырмасы амачланыр.
2. Глиобластома клеткаsinde бутага багыттоо: Ошол эле пептидин түмөр клеткаsindeki интегринлере багланарак нанобөлүкчө алымыны артырмасы бекленир.
3. EGFR’нин баскыланмасы: Ташынан цетуксимабın EGFR’йе багланарак түмөр клеткаsindeki бүйүме синйаллерини азалтмасы хедефленир.

Бул неденле систем йалнызжа бир “дары кабы” дегилдир. нанобөлүкчө йүзейиндеки пептит бийоложик бутага багыттоо функциясы гөрүркен, чекирдектеки цетуксимаб өзүнчө бир молекулалык хедефе йөнелмектедир.

Муну менен бирге изилдөө, жанлы мээde бул үч басамагын арт арда герчеклештигини гөстермемиштир. кан-мээ тосмосу жана Глиобластома клетка денейлери өзүнчө ин витро системлерде йүрүтүлмүштүр.

нанобөлүкчөнүн темел билешенлери

CPMA кополимери

ташуу системасыnın катйоник билешени, китосан омургасына метил метакрилат жана акрилик асит зинжирлери ашыланарак олуштурулмуштур. Бул кополимер макаледе CPMA катары кысалтылмыштыр.

Nicel протон NMR жыйынтыктарına гөре кополимерин билешими:

• Kitosan менен жалпы PMMA жана PAAc bөлүмü арасында 73:27 агырлык катышы,
• PMMA менен PAAc арасында 63:37 агырлык катышы

гөстермиштир.

Kitosan позитиф йүк ташыйан амин груплары саглар. PMMA хидрofобик өзелликлере, PAAc исе ийонлашабилир карбоксилик асит групларына каткыда булунур. Бул түзүлүш CPMA’нын кенди ичинде өз-дүзенленебилмесини жана алжинатла електростатик комплекс олуштурмасыны саглар.

Sodyum алжинат

Aljinat негатиф йүклү бир полисаккариттир. Pozitif йүклү китосан бөлгелерийле еткилешерек полиэлектролиттик комплексin олушмасына каткы саглар. цетуксимаб, нанобөлүкчө олуштурулмадан мурун алжинат фазына екленмиш жана полимерлер бирлеширкен йапынын ичинде капсүлленмиштир.

STPP чапраз баглайыжы

Sodyum триполифосфат, китосанын позитиф йүклү бөлгелерини ийоник катары чапраз багламак жана олушан нанобөлүкчөлөрдүн физиксел карарлылыгыны артырмак амажыйла колдонулган.

PEP бутага багыттоо билешени

изилдөөдө PEP ады верилен хедефлейижи түзүлүш:

• жRGDfV сиклик пептидини,
• Sekiz етилен гликол бириминден олушан PEG8 ара зинжирини,
• Kopolimere багланмайы саглайан терминал тийол грубуну

камтыйт.

PEG ара зинжири пептидин полимер йүзейинден дышары узанмасыны жана интегринлере багланабилежек еснек бир конум казанмасыны амачлар.

бутага багыттоочу пептид полимере насыл баглandы?

Peptidin CPMA’йа багланмасы ики химиялык басамакта герчеклештирилмиштир.

1. CPMA үзериндеки китосан амин групларына, EDC/NHS кимйасы кулланыларак 6-малеимидохексаноик асит багланмыштыр.
2. Tiyol учлу жRGDfV-PEG-SH түзүлүшү, малеимид-тийол Michael катылма реаксийонуйла бул ара баглайыжыйа екленмиштир.

Proton NMR анализинде малеимид синйалинин азалмасы жана пептитле уйумлу жаңы синйалин ортайа чыкмасы, багланмайы дестеклемиштир.

Nicel жыйынтыктар:

• CPMA үзериндеки MHA модификасйону: %3 агырлык/агырлык,
• Ellman тестийле тийол түкетими: %85 ± 2,
• Акыркы кополимерде PEP ичериги: %4,3 агырлык/агырлык.

микроагымдык үретим неден кулланылды?

Geleneksel кап ичи үретимде полимерлерин каршылашма ылдамдыгы, карышымын хер ноктасында ошол эле олмайабилир. Бул дурум ар башка бүйүклүкте жана йапыда нанобөлүкчөлөрдүн олушмасына йол ачабилир.

изилдөөчүлөр ики сывы акышыны контроллү бичимде бир арайа гетирен T-баглантылы бир микроагымдык жихаз кулланмыштыр. Sistemde:

• Bir гириштен %0,1 агырлык/хажим CPMA же CPMA-PEP чөзелтиси,
• Дигер гириштен %0,09 агырлык/хажим алжинат жана геректигинде цетуксимаб карышымы

верилмиштир.

Ики акышын ылдамдыгы өзүнчө өзүнчө 0,3 mL/дакика катары айарланмыш жана чөзелтилерин pH мааниси 6,0’а гетирилмиштир. Бул pH, катйоник жана анйоник полимерлерин йетерли мутлак йүзей йүкүне сахип болгону, факат чөзүнүрлүгүнү корудугу кошул катары сечилмиштир.

Акышлар бирлештигинде хызлы жана хоможен електростатик комплекслешме мейдана гелмиш, ардындан STPP екленерек түзүлүш чапраз багланмыштыр.

кош өзүнөн-өзү уюшуу не анлама гелийор?

изилдөөдөki “доубле селф-ассемблй”, йани кош өзүнөн-өзү уюшуу каврамы ики өзүнчө йапысал сүрежи анлатыр:

1. Amfifilik CPMA кополимеринин кенди ичиндеки хидрofобик жана хидрofилик бөлгелер себебинен наноөлчекте дүзенленмеси,
2. Pozitif йүклү CPMA менен негатиф йүклү алжинатын бирбирийле електростатик комплекс олуштурмасы.

Бул ики сүреч ошол эле үретим акышында герчеклешерек цетуксимабı чеврелейен чекирдек-кабук бензери бир полимерик түзүлүш олуштурмуштур.

цетуксимаб капсулалоо натыйжалуулугу

изилдөөдө капсулалоо натыйжалуулугу бул формүлле хесапланмыштыр:

\[ \%EE = \frac{\text{Toplam eklenen ilaç} - \text{Serbest ve kapsüllenmemiş ilaç}} {\text{Toplam eklenen ilaç}} \times 100 \]

Дегишкенлерин анламы:

• %EE: Eklenen цетуксимабın йүзде качынын нанобөлүкчө ичинде тутулдугуну гөстерен капсулалоо натыйжалуулугуdir.
• Жалпы екленен дары: Үретимин башлангыжында системе верилен цетуксимаб миктарыдыр.
• Serbest жана капсүлленмемиш дары: нанобөлүкчөлөр чөктүрүлдүктен кийин сывы үст фазда калан цетуксимаб миктарыдыр.

жыйынтык %99,0 ± 0,7 табылган. Бул маани, башлангычта екленен цетуксимабın нередейсе тамамынын нанобөлүкчө фраксийонуйла байланыштуу олдугуну көрсөтөт.

Муну менен бирге ыкма антикору түздөн-түз нанобөлүкчөнүн ичинде саймамыш, үст сывыда булунмайан миктары капсүлленмиш кабыл алуу етмиштир. SDS-PAGE анализи, нанобөлүкчө фраксийонундаки антикор бантларыны гөстеререк бул долайлы хесабы дестеклемиштир.

дары жүктөө катышы

дары жүктөө катышы бул илишкийле хесапланмыштыр:

\[ \%DL = \frac{\text{Nanoparçacık içinde bulunan toplam ilaç miktarı}} {\text{Toplam nanoparçacık ağırlığı}} \times 100 \]

Burada:

• %DL: нанобөлүкчө күтлесинин йүзде качынын цетуксимабdan олуштугуну гөстерир.
• Жалпы дары миктары: Капсүлленмиш катары хесапланан цетуксимаб миктарыдыр.
• Жалпы нанобөлүкчө агырлыгы: Polimerler, чапраз баглайыжы жана дары dâhil акыркы ташуу системасы системин агырлыгыдыр.

цетуксимаб йүклеме катышы %16,2 ± 0,07 агырлык/агырлык табылган.

нанобөлүкчөлөрдүн бүйүклүгү жана йүзей өзелликлери

PEC, бутага багыттоочу пептид жана цетуксимаб ичермейен темел полиэлектролиттик комплексidir. PEC-PEP, бутага багыттоочу пептид екленмиш бош ташуу системасыdır. PEC@CET, цетуксимаб йүклү факат бутага багыттоочу пептид булунмайан системдир. PEC-PEP@CET исе хем PEP бутага багыттоо лигandы хем де цетуксимаб ичерен акыркы формүласйондур.

цетуксимабın екленмеси гидродинамикалык диаметрı болжол менен 265-270 нм’ден 318-322 нм аралыгына йүкселтмиштир. PDI дегерлеринин 0,20-0,27 аралыгында калмасы, бүйүклүк дагылымынын тамамен тек тип олмаса да гөреже контроллү олдугуну көрсөтөт.

Бүтүн нанобөлүкчөлөрдүн йүзей йүкү негатифтир. Бул дурум, позитиф китосан бөлгелеринин алжинат жана STPP менен кысмен нөтрлешмеси жана дыш бөлгеде анйоник полимер билешенлерин булунмасыйла илишкилендирилмиштир.

DLS жана електрон микроскобу неден ар башка бүйүклүк гөстерди?

Dinamik ышык сачылымы, нанобөлүкчөнүн сывы ичиндеки хидратланмыш гидродинамикалык диаметрını өлчер. Polimer зинжирлеринин чевресинде булунан су табакасы да өлчүме dâhil олур.

Kriyojenik TEM гөрүнтүлеринде исе парчажыгын көбүрөөк түздөн-түз геометрик түзүлүшү гөрүлмүштүр. PEC-PEP жана PEC-PEP@CET системлеринде геометрик чап болжол менен 150 нм’дир.

Бул неденле 322 нм’лик DLS чапы менен болжол менен 150 нм’лик електрон микроскобу чапы бирбирийле зорунлу катары челишмемектедир. Aradaki айырма жогорку дережеде су алан полимерик кабугун хидродинамик өлчүме каткысыйла ачыкланмыштыр.

Чекирдек-кабук түзүлүшү

Kriyo-TEM гөрүнтүлеринде парчажыклар күресел гөрүнмүш; көбүрөөк йогун бир ич чекирдек жана көбүрөөк төмөн йогунлуклу, докулу дыш бөлге айырт едилмиштир.

HAADF-STEM жана елемент хариталамасы:

• Karbon жана азотун CPMA билешенлеринден,
• Sodyumun алжинаттан,
• Fosforun STPP чапраз баглайыжыдан,
• Oksijenin хер ики полимерден

гелдигини гөстермиштир.

Fosfor жана оксижен синйалинин дыш бөлгеде көбүрөөк йогун олмасы, алжинат жана STPP ачысындан зенгинлешмиш бир кабук йапысыйла уйумлу табылган.

нанобөлүкчө карарлылыгы

бутага багытталган цетуксимаб йүклү нанобөлүкчөлөр 4 °C’де 21 күн бойунжа изленмиш, гидродинамикалык диаметр жана PDI бакымындан айкын дегишим гөрүлмемиштир.

Бул жыйынтык кыса сүрели физиксел деполама карарлылыгыны дестеклер. Бирок узун сүрели раф өмрү, дондуруп чөзме, стерилизасйон, серум ортамы же клиникалык үрүн кошуллары бааланган эмес.

цетуксимаб салымы

нанобөлүкчөлөрdan цетуксимаб салымы 37 °C’де ики ар башка ортамда инжеленмиштир:

• кан айланууnı таклит еден pH 7,4,
• көбүрөөк асидик түмөр же enдозаomal ортамы кысмен таклит еден pH 6,5.

Кырк секиз саат сонунда:

• pH 7,4’те болжол менен %29 салым,
• pH 6,5’те болжол менен %21 салым

өлчүлмүштүр.

Asidik ортамда салымын көбүрөөк төмөн олмасы, бул системин аситле хызланан бир ташуу системасы олмадыгыны көрсөтөт. Makalede өнерилен меканизмайа гөре pH азалдыгында PAAc жана алжинат бөлгелеринин ийонлашмасы азалмакта, негатиф йүклер арасындаки итме зайыфламакта жана полимер матрикси көбүрөөк аз хидратланмактадыр. Агын еткин ачыклыгы күчүлдүгү үчүн чоң цетуксимаб молекүлүнүн дифүзйону йавашламактадыр.

Higuchi модели

Higuchi модели салынан дары миктарынын заманын карекөкүйле илишкисини ифаде едер:

\[ f_t = K_H t^{1/2} \]

Burada:

• ф_т: т заманына кадар салынан цетуксимаб йүздесидир.
• K_H: Higuchi салым ылдамдык сабитидир.
• т: Zamandыр.

изилдөөдө:

• pH 7,4 үчүн K_H = 4,233 %·саат^-1/2 жана R² = 0,98,
• pH 6,5 үчүн K_H = 2,962 %·саат^-1/2 жана R² = 0,80

табылган.

pH 7,4’теки көбүрөөк жогорку ылдамдык сабити жана көбүрөөк жогорку R² мааниси, физиологиялык pH’даки салымын Higuchi типи дифүзйон давранышына көбүрөөк ийи уйдугуну көрсөтөт.

Korsmeyer-Peppas модели

Korsmeyer-Peppas илишкиси бул шекилде верилмиштир:

\[ f_t = K_{KP} t^n \]

Burada:

• ф_т: Belirli замана кадар салынан дары ораныдыр.
• K_KP: ташуу системасы йапысына байланыштуу салым сабитидир.
• т: Zamandыр.
• н: Салым меканизмасыны танымламайа йардымжы болгон дифүзйон үссүдүр.

жыйынтыктар:

pH 7,4’те н дегеринин болжол менен 0,5 олмасы Fick типи дифүзйонла уйумлудур. pH 6,5’те н дегеринин 0,293’е дүшмеси, антикор харекетинин полимер матрикси ичинде көбүрөөк ашыкча сынырлandыгыны дүшүндүрмектедир.

кан-мээ тосмосу модели насыл олуштурулду?

изилдөөчүлөр адам мээ микроваскүлер ендотелинден түретилмиш hCMEC/D3 клетка хаттыны кулланмыштыр. клеткаler йары гечирген мембранлы еклер үзеринде бүйүтүлерек үст жана алт сывы бөлмелери бирбиринден айыран бир клетка табакасы олуштурмуштур.

Deney кошуллары арасында:

• Ek башына 60.000 клетка,
• 3,0 µm гөзенекли мембран,
• тосмо сыкылыгыны артырмак үчүн денейден 24 саат мурун 100 nM ретиноик асит,
• Deney өнжесинде 150-180 Ω·cm² TEER кабыл алуу аралыгы

булунмактадыр.

TEER, клетка табакасынын електрик акымына каршы диренжидир. клеткаlerin арасындаки сыкы баглантылар гүчлендикче диренч йүкселир. изилдөөдө клетка табакалары болжол менен 160-170 Ω·cm² плато дегерлерине улашмыштыр.

көрүнгөн өткөрүмдүүлүк коэффициенти

нанобөлүкчөлөрдүн клетка табакасыны гечме ылдамдыгы бул формүлле хесапланмыштыр:

\[ P_{app} = \frac{dc}{dt} \times \frac{1}{A \times C_0} \]

Burada:

• P_апп: көрүнгөн өткөрүмдүүлүк коэффициентиdır жана жм/с биримийле ифаде едилмиштир.
• дж/дт: клетка табакасынын дигер тарафына гечен мадде миктарынын замана гөре дегишим хызыдыр.
• A: Гечишин герчеклештиги мембран йүзей аланыдыр.
• C₀: Verici бөлмедеки баштапкы нанобөлүкчө йогунлугудур.

P_апп мааниси бүйүдүкче деней системиндеки гечиш хызынын арттыгы кабыл алуу едилир. Бирок бул сайы жанлы инсandаки кан-мээ тосмосу гечиргенлигини түздөн-түз вермез.

кан-мээ тосмосу гечиргенлик жыйынтыктарı

Hedefleyici пептит ичерен системлер, пептит ичермейен ешлерине гөре болжол менен %25-45 көбүрөөк жогорку гечиргенлик гөстермиштир.

цетуксимаб йүкленмесинин бутага багыттоочу пептид булунмадыгында айкын бир ташыма авантажы сагламамасы маанилүүdir. Deneyde асыл гечиргенлик өсүшү антикор йүкүнден эмес, PEP-интегрин еткилешиминден кайнакланмыштыр.

Ташыма денейинден кийин TEER дегерлеринде хафиф азаюу гөзленмиштир. Бирок ошол эле азаюу ишлем йапылан контрол клеткаlerinde де ортайа чыкмыш жана нанобөлүкчө групларында ек бир тосмо бузулушу көрсөтүлгөн эмес. Бул булгу нанобөлүкчөлөрдүн клетка табакасыны йалнызжа физиксел катары парчалайарак гечмедиги йорумуну дестеклемектедир.

hCMEC/D3 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү

нанобөлүкчөлөрдүн тосмо клеткаlerine зарар верип вермедиги MTT ыкмаiyle бааланган. клеткаler:

• %0,01,
• %0,02,
• %0,03 агырлык/хажим

нанобөлүкчө йогунлукларына 4 же 24 саат маруз быракылмыштыр.

Бүтүн формүласйонларда клетка метаболик еткинлиги ISO 10993-5 стandардында ин витро ситотоксисите үчүн кулланылан %70 сынырынын үзеринде калган.

PEP ичерен базы групларда 24 саатte метаболик еткинликте хафиф өсүү гөрүлмүштүр. авторлор бул сонужу клетка чогалмасы катары йорумламамыш; RGD-интегрин еткилешиминин клетка йапышмасыны жана эрте митокондрийал еткинлиги гечижи катары дестеклейебилежегини белиртмиштир.

клетка алымынын сыжаклыга багымлылыгы

нанобөлүкчөлөрдүн клетка ичине алынышы 4 °C жана 37 °C’де каршылаштырылмыштыр.

4 °C’де клеткаsel енержийе байланыштуу ташыма меканизмалары йавашладыгы үчүн бүтүн групларда алым акыркы дереже төмөн калган. 37 °C’де клетка ичи йешил флоресан синйали айкын бичимде йүкселмиштир.

Бул сыжаклык айырмасы бул йоруму дестеклемектедир:

• нанобөлүкчөлөр йалнызжа клетка йүзейине йапышмамактадыр.
• клетка зарындан пасиф бичимде сүзүлмемектедир.
• Enerji геректирен ендоситоз меканизмаларыйла ичери алынмактадыр.

Endotel клеткаlerindeki нижел алым жыйынтыктарı

37 °C’де хедефленмемиш PEC жана PEC@CET формүласйонларында FITC-позитиф клетка катышы болжол менен %3,0-6,4 аралыгындадыр.

PEP ичерен PEC-PEP жана PEC-PEP@CET системлеринде катыш болжол менен %8,4-11,6’йа йүкселмиштир.

4 °C’де бүтүн групларда дегерлер %1’ин алтында калган.

Бөйлеже PEP ишлевселлештирмеси ендотел клетка алымыны болжол менен ики кат артырмыштыр. Konfokal гөрүнтүлерде нанобөлүкчө синйалинин чекирдек чевресинде йогунлашмасы да клетка ичи везикүлер ташынмайла уйумлу табылган.

U87 Глиобластома клеткаlerinde алым

U87 клетка хатты адам Глиобластомаsını темсил еден йайгын бир ин витро модель катары колдонулган. клеткаler бутага багытталган нанобөлүкчөлөрla 4 °C жана 37 °C’де инкүбе едилмиштир.

4 °C’де клетка ичи FITC-позитиф катышы %3,93 же алтында калган. 37 °C’де:

• PEC-PEP: %11,40 ± 1,10 FITC-позитиф клетка,
• PEC-PEP@CET: %17,37 ± 0,78 FITC-позитиф клетка

өлчүлмүштүр.

цетуксимаб йүклү бутага багытталган системин көбүрөөк жогорку клетка ичи синйали, интегрин аражылы алыма ек катары цетуксимаб-EGFR еткилешиминин нанобөлүкчө бирикимине каткыда булунабилежеги шеклинде йорумланмыштыр.

Z-йыгыны конфокал гөрүнтүлеме, йешил синйалин йалнызжа клетка йүзейинде эмес, клеткаnin ар башка деринликлеринде булундугуну гөстермиштир.

U87 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү

Глиобластома клеткаleri %0,01, %0,02 жана %0,03 агырлык/хажим нанобөлүкчө йогунлукларына 4 жана 24 саат маруз быракылмыштыр.

цетуксимаб йүклү формүласйонларда дозаa байланыштуу жанлылык азалмасы гөрүлмүштүр. En күчтүү азаюу PEC-PEP@CET формүласйонунда ортайа чыкмыштыр.

En жогорку консантрасйонда жана 24 саат сонунда U87 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү %50’нин алтына дүшмүштүр.

Бул жыйынтык цетуксимабın капсүллеме сонрасында бийоложик еткисини тамамен кайбетмедигини дүшүндүрмектедир. Муну менен бирге:

• клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү тести түмөр күчүлмесини өлчмез.
• изилдөөдө жанлы жаныбар түмөрү булунмамактадыр.
• Serbest цетуксимабla капсамлы бир түздөн-түз еткинлик салыштырууsı сунулган эмес.
• U87 клетка хатты герчек Глиобластомаdaki бүтүн клеткаsel чешитлилиги темсил етмез.

График өзет не анлатыйор?

изилдөөнүн алгачкы сайфасындаки график өзет, гелиштирме сүрежини дөрт баглантылы ашама hâlinde көрсөтөт:

1. CPMA кополимерине малеимид баглайыжы жана жRGDfV пептидинин екленмеси,
2. CPMA-PEP менен цетуксимаб ичерен алжинатын T-баглантылы микроагымдык чипте бирлештирилмеси,
3. нанобөлүкчөнүн интегрин аражылы ендоситоз жана трансситозла кан-мээ тосмосу клеткаsini гечмеси,
4. Глиобластома клеткаsinde интегрин бутага багыттооsi жана цетуксимаб аражылы EGFR баскыланмасы.

График өзет, изилдөөнүн өнердиги бүтүн меканизмайы тек бир шемада бирлештирмектедир. Бирок бул меканизманын баары тек жана бүтүнлешик бир жанлы моделде көрсөтүлгөн эмес. тосмо гечиши жана түмөр клеткаsi таасири өзүнчө клетка күлтүрү денейлерийле бааланган.

Сүрөт 1: Polimer сентез йолу

Сүрөт 1 үч химиялык ашамайы көрсөтөт:

• Kitosan үзерине MMA жана акрилик асит зинжирлеринин ашыланмасы,
• CPMA’йа малеимид ичерен MHA багланмасы,
• Tiyol учлу жRGDfV-PEG йапысынын малеимид грубуна екленмеси.

Бул схема нанобөлүкчөнүн кендисини эмес, хедефлейижи полимер билешенинин насыл олуштурулдугуну ачыкламактадыр.

Сүрөт 2: Fizikokimyasal карактеризасйон

Сүрөт 2’нин ар башка панеллери бул билгилери вермектедир:

• DLS егрилери: цетуксимаб йүклендигинде парчажык бүйүклүгү дагылымынын көбүрөөк чоң чапа кайдыгыны гөстерир.
• зета потенциалы графиги: Pozitif CPMA’дан негатиф алжината жана орта дережеде негатиф акыркы нанопарчажыга догру йүзей йүкү дөнүшүмүнү гөстерир.
• SDS-PAGE: цетуксимабın үст сывыда сербест калмадыгыны, нанобөлүкчө фраксийонунда булундугуну дестеклер.
• Kriyo-TEM: болжол менен 150 нм’лик күресел, чекирдек-кабук бензери түзүлүш гөстерир.
• Салым графиги: pH 7,4’те салымын pH 6,5’тен көбүрөөк жогорку олдугуну гөстерир.

Сүрөт 3: кан-мээ тосмосу клетка денейлери

Сүрөт 3’те:

• Endotel клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү,
• 4 °C жана 37 °C’де конфокал клетка гөрүнтүлери,
• Акыш гөрүнтүлеме ситометрисийле клетка ичи флоресан,
• FITC-позитиф клетка катышы,
• көрүнгөн өткөрүмдүүлүк коэффициенти

бирге сунулган.

Grafiklerin ортак месажы, PEP бутага багыттоо лигandынын клетка алымыны жана тосмо моделиндеки ташынмайы артырдыгы, бирок клетка табакасыны ек катары бозмадыгыдыр.

Сүрөт 4: Глиобластома клетка денейлери

Сүрөт 4, U87 клеткаlerindeki алым жана жанлылык жыйынтыктарını көрсөтөт. 37 °C’де айрыкча PEC-PEP@CET грубунда күчтүү клетка ичи йешил флоресан гөрүлмүштүр. Nicel анализ де ошол эле грубун ен жогорку FITC-позитиф клетка оранына сахип олдугуну гөстермиштир.

Жанлылык графигинде цетуксимаб ичермейен ташуу системасыlarla цетуксимаб йүклү системлер айрышмактадыр. Antikor йүклү груплар жанлылыгы көбүрөөк ашыкча азалтмыш, бутага багытталган цетуксимаб формүласйону ен күчтүү еткийи гөстермиштир.

Изилдөөнүн күчтүү жактары

• цетуксимаб гиби чоң бир моноклоналдык антитело %99’а йакын веримле капсүлленмиштир.
• Polimer сентези NMR, FTIR жана Ellman тести гиби тамамлайыжы ыкмаlerle догруланмыштыр.
• нанобөлүкчөлөр контроллү микроагымдык ортамда үретилмиштир.
• DLS, зета потенциалы, SDS-PAGE, крийо-TEM жана елемент хариталамасы бирге колдонулган.
• бутага багыттоочу пептидnin таасири, пептит ичермейен еш формүласйонларла каршылаштырылмыштыр.
• кан-мээ тосмосу клеткаlerinde хем жанлылык хем алым хем де гечиргенлик бааланган.
• U87 клеткаlerinde конфокал микроскопи, Z-йыгыны жана гөрүнтүлемели акыш ситометриси колдонулган.
• 4 °C жана 37 °C салыштырууsı енержийе байланыштуу клетка алымыны дестеклемиштир.
• цетуксимабın капсүллеме сонрасында бийоложик еткисини корудугуна йөнелик клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү вериси сунулган.
• Салым верилери ики ар башка математиксел моделле анализ едилмиштир.
• Истатистиклерде чоклу салыштыруу дүзелтмелери колдонулган.

Изилдөөнүн чектөөлөрү

• препринт болуп саналат: рецензиядан өтө элек.
• Йалнызжа ин витро изилдөөdır: Жанлы жаныбар же адам вериси жок.
• Герчек кан-мээ тосмосу бүтүнүйле моделленмемиштир: hCMEC/D3 тек катман модели перисит, астросит, микроглиа, кан акымы жана багышыклык системини ичермез.
• кан-мээ шишик тосмосу өзүнчө катары моделленмемиштир.
• тосмо жана түмөр денейлери бирбиринден айрыдыр: нанобөлүкчөнүн ошол эле денейде тосмоi гечип ардындан түмөр клеткаsini өлдүрдүгү көрсөтүлгөн эмес.
• U87 тек клетка хаттыдыр: Глиобластомаnın генетик хетероженлигини, көк клетка бензери клеткаlerini жана бейтап фарклылыкларыны темсил етмез.
• Үч бойутлу түмөр органоиди колдонулган эмес.
• Ин виво бийодагылым bilинсультmektedir: нанобөлүкчөнүн каражигер, далак, бөбрек же дигер докуларда бирикип бирикмейежеги бааланган эмес.
• Айлануу сүреси жана фармакокинетик өлчүлмемиштир.
• Багышыклык йаныты бааланган эмес.
• Serbest цетуксимабla капсамлы түздөн-түз салыштыруу чектелген.
• EGFR синйал йолундаки дегишим түздөн-түз өлчүлмемиштир: клетканын жашоого жөндөмдүүлүгү азалмасы EGFR баскыланмасыйла уйумлу олса да PI3K/Akt же ERK фосфориласйону рапорланмамыштыр.
• Түмөр бүйүмеси же жаныбар аман калууı өлчүлмемиштир.
• 48 саатte цетуксимабın чоң bөлүмü салынмамыштыр: Bunun узун дөнемде терапөтик кулланылабилирлиги bilинсультmektedir.
• Fiziksel карарлылык йалнызжа 21 күн жана 4 °C кошулунда бааланган.
• Deneylerin көпчүлүгү үч көз карандысыз текрарла йүрүтүлмүштүр: Истатистиксел тахминлер кичинекей лаборатувар текрарларына дайанмактадыр.
• P_апп өсүшү ин виво мээ гечиши далилı дегилдир.
• нанобөлүкчөлөрдүн клиникалык өлчекте үретилебилирлиги бааланган эмес.

Изилдөө эмнени айтат?

• CPMA жана алжинат темелли полиэлектролиттик комплекс нанобөлүкчөлөр цетуксимабı жогорку веримле капсүллейебилмиштир.
• бутага багытталган цетуксимаб йүклү формүласйонун гидродинамикалык диаметрı болжол менен 322 нм’дир.
• Kriyo-TEM гөрүнтүлеринде болжол менен 150 нм геометрик бүйүклүкте чекирдек-кабук бензери йапылар гөрүлмүштүр.
• нанобөлүкчөлөр 4 °C’де 21 күн бойунжа бүйүклүк бакымындан карарлы калган.
• цетуксимаб салымы pH 7,4’те pH 6,5’е гөре көбүрөөк хызлыдыр.
• PEP бутага багыттоочу пептид ендотел жана U87 клеткаlerindeki нанобөлүкчө алымыны артырмыштыр.
• клетка алымы енержийе багымлыдыр.
• PEP ишлевселлештирмеси йапай кан-мээ тосмосу моделиндеки P_апп дегерини артырмыштыр.
• нанобөлүкчөлөр hCMEC/D3 клеткаlerinde тест едилен кошулларда %70 жанлылык сынырынын үзеринде калган.
• бутага багытталган цетуксимаб йүклү систем U87 клеткаlerinde ен күчтүү жанлылык азалмасыны олуштурмуштур.

Изилдөө эмнени айтпайт?

• нанобөлүкчөлөрдүн адам кан-мээ тосмосуni гечтиги далилlanmamıştır.
• Глиобластома бейтаптарında түмөре улаштыгы көрсөтүлгөн эмес.
• цетуксимабın клиникалык Глиобластома дарылооsinde еткили hâle гелдиги далилlanmamıştır.
• нанобөлүкчөлөрдүн аман калууı узаттыгы көрсөтүлгөн эмес.
• Учурдагы жеррахи, радйотерапи же темозоломид дарылооsinin йерини алабилежеги сөйленемез.
• адамlarda гүвенли доза аныкталган эмес.
• Uzun дөнем токсисите же багышыклык гүвенлиги көрсөтүлгөн эмес.
• Түм Глиобластомаların EGFR же α_вβ₃/α_вβ₅ бутага багыттооsine йаныт вережеги далилlanmamıştır.
• U87 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгүndaki азаюу клиникалык түмөр йаныты дегилдир.
• P_апп маанилери түздөн-түз мээ тканыndaki дары йогунлугуну гөстермез.

Өткөн, бүгүнкү жана келечек жагынан мааниси

Гечмиште моноклоналдык антителоlar чогунлукла мээ дышындаки түмөрлерде дегерлендирилмиш, кан-мээ тосмосу себебинен Глиобластомаda колдонуу аланлары чектелген калган. Бул изилдөө, чоң бийоложик молекүллерин сулу ортамда полиэлектролиттик комплексler ичине йерлештирилебилежегини жана тосмо клеткаlerindeki ресептөрлер кулланыларак ташынмасынын артырылабилежегини көрсөтөт.

Buкүн ачысындан изилдөөнүн ен маанилүү каткысы, үч өзүнчө текноложик билешени ошол эле платформда бирлештирмесидир:

• микроагымдык жана контроллү нанобөлүкчө үретими,
• Интегрин хедефли тосмо жана түмөр клеткаsi алымы,
• EGFR хедефли моноклоналдык антитело ташынмасы.

Gelecekte араштырылмасы герекен басамаклар шунлардыр:

• Astrosit жана перисит ичерен көбүрөөк гелишмиш кан-мээ тосмосу моделлери,
• кан-мээ тосмосу менен Глиобластома клеткаlerinin ошол эле системде булундугу ортак күлтүрлер,
• Үч бойутлу Глиобластома органоидлери,
• Ар башка EGFR жана интегрин дүзейлерине сахип Глиобластома клеткаleri,
• Түмөр ташыйан жаныбарlarda мээ дагылымы,
• нанобөлүкчөлөрдүн кandа калма сүреси жана орган дагылымы,
• Багышыклык жана узун дөнем гүвенлик баалооleri,
• Serbest цетуксимаб жана стandарт дарылооlerle түздөн-түз салыштыруу,
• Temozolomid жана радйотерапийле комбинасйон денейлери,
• Үретимин бүйүтүлмеси жана сери үретим текрарланабилирлиги.

Күнүмдүк жашоо жана клиникалык гележек ачысындан анламы

Глиобластомаda дары гелиштирме соруну йалнызжа күчтүү бир кансер илажы булмак дегилдир. Илажын бейнин догру бөлгесине, йетерли йогунлукта жана саглыклы докуйа ен аз зарар вережек бичимде улаштырылмасы керек.

Бул изилдөө, “дары еткили ми?” сорусуна ек катары “дары хедефе улашабилийор му?” сорусунун да дарылооnin темел парчасы олдугуну көрсөтөт.

нанобөлүкчө йаклашымы гележекте башарылы олурса чоң антикорларын же башка бийоложик дарыların мээ түмөрлерине ташынмасы үчүн жаңы сеченеклер саглайабилир. Бирок учурдагы изилдөө лаборатувар өлчегиндедир. Глиобластома бейтаптарının дарылооsini buкүн дегиштирен бир жыйынтык же уйгуланабилир клиникалык үрүн сунмамактадыр.

изилдөөнүн ыкмасы жана жыйынтыктары

изилдөө тасарымынын техникалык өзети

Үретим кошуллары

Polimer ишлевселлештирме жыйынтыктарı

цетуксимаб йүклеме жана физиксел өзгөчөлүктөр

цетуксимаб салым жыйынтыктарı

hCMEC/D3 кан-мээ тосмосу модели жыйынтыктарı

Гөрүнүр гечиргенлик жыйынтыктарı

U87 Глиобластома клеткаsi жыйынтыктарı

Истатистиксел ыкма

Deneylerin көпчүлүгү ен аз үч көз карандысыз текрарла герчеклештирилмиш жана жыйынтыктар орталама ± стandарт сапма катары билдирилмиштир.

Топ салыштырууlarında деней тасарымына гөре тек йөнлү же ики йөнлү ANOVA колдонулган. Чоклу салыштырууlar:

• Benjamini-Krieger-Yekutieli йанлыш кешиф катышы дүзелтмеси же
• Tukey чоклу салыштыруу тести

менен бааланган.

Дүзелтилмиш п дегеринин 0,05’ин алтында олмасы статистикалык маанилүүlık сыныры катары кабыл алуу едилмиштир.

булак жана ыкма жөнүндө эскертүү

Бул мазмун, Dhiraj Mishra, Marcelo Calderón, Ana Beloqui жана Alejandro Sosnik тарафындан хазырланан “Cetuximab-Loaded Self-Assembled Polymeric Nanoparticles for the Integrin-Targeted Therapy of Glioblastoma” башлыклы изилдөөya дайанмактадыр.

авторлор Technion – Israel Institute of Technology, University of the Basque Country UPV/EHU, POLYMAT жана IKERBASQUE бүнйесиндеки изилдөө биримлерийле байланыштууdir.

изилдөө адамlarda йүрүтүлмүш клиникалык изилдөө дегилдир. жаныбар денейи же тирүү организмda түмөр дарылооsi де камтыбайт. hCMEC/D3 адам мээ микроваскүлер ендотел клеткаleri менен U87 адам Глиобластома клетка хаттында йүрүтүлен preклиникалык, ин витро денейсел нанотехнология изилдөөsıdır.

изилдөө SSRN’де йайымланмыш бир препринт болуп саналат. Metinde ачыкча “This preprint research paper has not been peer reviewed” ифадеси булунмактадыр. Долайысыйла изилдөө рецензиядан өтө элек.

изилдөө TheraTools, “Innovative Tools то Treat and Модель Complex Cancer Environments” прожеси капсамында HORIZON-MSCA-2021-DN-01 програмы тарафындан дестекленмиштир. авторлор билинен бир чыкар чатышмасы же изилдөөyı еткилейебилежек кишисел илишки билдирмемиштир.

нанобөлүкчө шемаларынын хазырланмасында BioRender, маалымат анализи жана графиклер үчүн GraphPad Prism, химиялык түзүлүш чизимлери үчүн ChemDraw кулланылдыгы белиртилмиштир.

цетуксимаб капсулалоо натыйжалуулугу, нанобөлүкчө үст сывысында өлчүлен сербест антикор миктарындан долайлы катары хесапланмыш; SDS-PAGE анализи антикорун нанобөлүкчө фраксийонунда булундугуну дестеклемиштир.

кан-мээ тосмосу гечиши, йары гечирген мембран үзеринде бүйүтүлен hCMEC/D3 клеткаlerinin кулланылдыгы ин витро моделде хесапланмыштыр. Elde едилен P_апп маанилери герчек адам бейнине гечен цетуксимаб миктары катары йорумланмамалыдыр.

U87 клетканын жашоого жөндөмдүүлүгүndaki азаюу, ин витро антитүмөр еткинлик синйали сунат. Бул жыйынтык клиникалык түмөр күчүлмеси, бейтапlık контролү, аман калуу йарары же дарылоо башарысы анламына гелмемектедир.

изилдөөдө нанобөлүкчөлөрдүн тирүү организмdaki айлануу сүреси, мээ дагылымы, түмөр бирикими, орган токсиситеси, багышыклык йаныты же узун дөнем гүвенлиги бааланган эмес.

Бул макала йалнызжа йүкленен PDF’де сунулан сентез ыкмаi, формүллер, физикокимйасал өлчүмлер, електрон микроскобу гөрүнтүлери, клетка денейлери, гечиргенлик анализлери, сайысал жыйынтыктар жана авторлорın йорумлары темел алынарак хазырланмыштыр. PDF’де булунмайан клиникалык дарылоо өнериси, адамlarda еткинлик иддиасы, аман калуу гарантиси же Глиобластома үчүн кулланыма хазыр дары булундугу йөнүнде бир жыйынтык екленмемиштир.