Selenium insan metabolizmində yalnız bir istiqamətdə fəaliyyət göstərən qida elementi deyil. Yetərli səviyyələrdə antioksidant müdafiəyə və lipid metabolizminə töhfə verdiyi halda, yüksək səviyyələrdə insulin müqaviməti və qaraciyərdə yağ sintezi ilə əlaqəli proseslərlə yanaşı gedə bilər. Buna görə selenium ilə qaraciyər sağlamlığı arasındakı əlaqənin xətti deyil, aşağı və yüksək səviyyələrdə mənfiləşən U formalı əyri yaratması bioloji baxımdan mümkündür.

Bu preprint tədqiqatında araşdırmaçılar ABŞ Milli Sağlamlıq və Qidalanma Müayinəsi Araşdırmasının 2017-Mart 2020 dövründəki 5.885 yetkinə aid məlumatlarından istifadə edərək tam qan selenium səviyyəsi, qidalanma ilə alınan selenium, qurğuşun, kadmium, civə və manqan məruz qalmaları ilə FibroScan tərəfindən ölçülən qaraciyər yağlanması və sərtliyi arasındakı əlaqələri araşdırdılar. Əsas analizlər müstəqil 2021-2023 NHANES dövründəki 3.310 yetkində yenidən tətbiq olundu.

Tədqiqatın mərkəzi tapıntısı tam qan seleniumu ilə qaraciyər yağlanmasının görüntüləmə göstəricisi olan nəzarətli atenüasiya parametri arasında U formalı əlaqənin olmasıdır. Əsas kohortda modelin proqnozlaşdırdığı ən aşağı CAP dəyəri təxminən 140 µg/L tam qan seleniumunda ortaya çıxdı; bu minimum üçün yüzdə 95 etibar intervalı 138-158 µg/L kimi hesablandı və qeyri-xətti əlaqə üçün P dəyəri 0,001-dən aşağı idi. Bununla birlikdə 2021-2023 doğrulama kohortunda U forması yenidən görülsə də, təxmin edilən minimum təxminən 80 µg/L-yə keçdi. Buna görə tədqiqatın təkrarlanan tapıntısı konkret “ideal 140 µg/L” dəyəri deyil, əlaqənin xətti olmamasıdır.

Selenium, qurğuşun, kadmium və civəni birlikdə qiymətləndirən Bayesçi nüvə maşın reqressiyasında da U forması yenidən ortaya çıxdı. Seleniumun modelə daxil edilmə ehtimalı 1,00, civəninki 0,94 kimi hesablandı. Lakin bu dəyərlər bir metalın təkbaşına nə qədər faydalı və ya zərərli olduğunu göstərən təsir ölçüləri deyil; metalın qarışıq model daxilində nəticə ilə bağlı məlumat daşıma ehtimalını ifadə edir.

Civə-selenium qarşılıqlı təsirinin qaraciyər yağlanması və ya sərtliyi üzərində birbaşa əhəmiyyətli qarşılıqlı təsir yaratdığı göstərilə bilmədi. Əhəmiyyətli qarşılıqlı təsir araşdırmada sistemik oksidləşdirici stress və qlutatyon metabolizmasının göstəricisi kimi götürülən qamma-qlutamiltransferaza yüksəkliyi üçün tapıldı: civə-selenium nisbətindəki artımla əlaqəli odds nisbəti 1,58 idi. Bu nəticə civə-selenium antaqonizminin mümkün bioloji izah verdiyini düşündürsə də, mexanizmi sübut etmir.

Tədqiqat kəsitsəl olduğu üçün səbəb-nəticə əlaqəsi qurula bilməz. Qaraciyər xəstəliyi selenium metabolizmini və dövr edən selenium səviyyəsini dəyişə bilər. Tapıntılar selenium əlavəsi qəbul edilməsini, 140 µg/L-nin şəxsi hədəf kimi istifadə olunmasını və ya Hepamet Fibrozis Skorunun bu populyasiyada birinci pillə skrininq vasitəsi kimi qəbul edilməsini dəstəkləmir.

Araşdırmanın əsas problemi nədir?

Metabolik disfunksiya ilə əlaqəli steatotik qaraciyər xəstəliyi qaraciyər hüceyrələrində həddindən artıq yağ toplanması ilə başlayan və bəzi insanlarda iltihab, fibrozis və irəliləmiş qaraciyər zədəsinə keçə bilən geniş xəstəlik spektridir. Araşdırmada qaraciyər yağlanması FibroScan cihazının ölçdüyü nəzarətli atenüasiya parametri ilə, qaraciyər sərtliyi isə yenə FibroScan tərəfindən ölçülən qaraciyər sərtlik ölçümü ilə qiymətləndirildi.

Tədqiqatda istifadə olunan görüntüləmə hədləri bunlardır:

\[ \mathrm{Karaciğer\ yağlanması}=1 \quad \text{eğer} \quad \mathrm{CAP} \geq 275\ \mathrm{dB/m} \]

Burada CAP nəzarətli atenüasiya parametridir. Vahidi desibel/metrdir. Tədqiqatda 275 dB/m və yuxarı ölçmələr qaraciyər yağlanması kimi təsnif edilmişdir.

\[ \mathrm{Anlamlı\ fibrozis}=1 \quad \text{eğer} \quad \mathrm{LSM} \geq 8\ \mathrm{kPa} \]

Burada LSM qaraciyər sərtlik ölçümüdür. Vahidi kilopaskaldır. Tədqiqatda 8 kPa və yuxarı dəyərlər klinik baxımdan əhəmiyyətli fibrozis göstəricisi kimi qəbul edilmişdir. Bundan əlavə 12 kPa və yuxarı daha yüksək sərtlik səviyyəsi də təsviri olaraq bildirilmişdir.

Araşdırmanın cavab axtardığı əsas sual tam qan seleniumunun bu görüntüləmə nəticələri ilə necə əlaqəli olmasıdır. Əvvəlki bəzi NHANES tədqiqatlarında selenium xətti dəyişən və ya dörd ayrı kateqoriya kimi qiymətləndirilmişdi. Belə yanaşma əlaqənin müəyyən səviyyəyə qədər azalması və sonra yenidən yüksəlməsi halında əyrinin dönüş nöqtəsini görə bilməz. Məsələn, həm aşağı, həm də yüksək selenium səviyyələri risklə əlaqəlidirsə, tək xətti əmsal bu iki əks bölgəni bir-birinə qarışdıra bilər.

İkinci problem insanların seleniuma təkbaşına məruz qalmamasıdır. Eyni insanda qurğuşun, kadmium, civə və manqan kimi başqa metallar da ola bilər. Bu metallar ortaq qida mənbələri, ətraf mühitə məruz qalma yolları və oxşar bioloji hədəflər səbəbindən bir-biri ilə əlaqəli ola bilər. Seleniumu digər metalları nəzərə almadan qiymətləndirmək real məruz qalma quruluşunu natamam təqdim edə bilər.

Üçüncü problem isə civə ilə selenium arasındakı antaqonizmdir. Civə və selenium bir-birinə bağlana bildiyi üçün bir elementin bioloji əlçatanlığı digərinin səviyyəsindən təsirlənə bilər. Tədqiqatçılar bu tarazlığın selenium-qaraciyər əyrisinin formasını açıqlayıb-açıqlamayacağını yoxladılar.

Tədqiqat qrupu necə yaradıldı?

Əsas analiz NHANES 2017-Mart 2020 pandemiyadan əvvəlki məlumat fayllarına əsaslanır. Xam birləşdirilmiş məlumat dəstində 24.814 qeyd var idi. Pandemiyadan əvvəlki uyğun məlumat hissəsinə keçilməsi və təkrarlanan qeydlərin çıxarılması ilə say 15.560-a, 20 yaş və yuxarı iştirakçılar seçildikdə 9.232-yə, hamilələrin çıxarılması ilə 9.145-ə düşdü.

Etibarlı FibroScan müayinəsi olan 7.922 nəfər arasından həm tam qan, həm də qidalanma mənşəli selenium ölçümü olan 6.969 nəfər müəyyən edildi. Biokimya və tam qan sayımı ölçmələri tamamlandıqdan sonra 6.747 nəfər qaldı. Yaş, cins, irq və etnik mənşə, təhsil, gəlir səviyyəsi, siqaret, alkoqol istifadəsi və ümumi enerji qəbulu kimi əsas dəyişənləri tam olan 5.885 yetkin əsas analiz kohortunu təşkil etdi.

Hepamet Fibrozis Skoru üçün aclıq insulini və aclıq qlükozası tələb olunduğuna görə bu qiymətləndirmə 2.908 nəfərlə aparıldı. Skorun fibrozisi ayırdetmə performansını qiymətləndirən analizdə 2.810 nəfər iştirak etdi. Metabolik xəstəliklə birlikdə orta səviyyəli alkoqol istifadəsini ifadə edən MetALD alt qrupunda 576 nəfər var idi.

Əsas kohortda:

• 1.725 nəfər, yəni yüzdə 29,3, MASLD təsnifatına uyğun gəlirdi.
• 576 nəfər, yəni yüzdə 9,8, MetALD qrupunda idi.
• 295 nəfər, yəni yüzdə 5,0, alkoqolla əlaqəli qaraciyər xəstəliyi qrupunda idi.
• Çəkiləndirilmiş qaraciyər yağlanması prevalansı yüzdə 43,3 idi.
• LSM ≥ 8 kPa ilə təyin olunan əhəmiyyətli fibrozis prevalansı yüzdə 10,7 idi.
• LSM ≥ 12 kPa səviyyəsinə çatanların nisbəti yüzdə 4,2 idi.

Selenium və digər metallar necə ölçüldü?

Tam qan seleniumu tədqiqatın birincili selenium biomarkeri idi. Qurğuşun, kadmium, ümumi civə, manqan və selenium NHANES laboratoriyasında induktiv əlaqələndirilmiş plazma kütlə spektrometriyası ilə ölçüldü.

Qidalanma ilə alınan selenium isə birinci günə aid tək 24 saatlıq qida istehlakı xatırlamasına əsaslanırdı. Eyni qidalanma qeydindən selenium/sink və selenium/mis nisbətləri hesablandı. NHANES 2017-dən sonra qan sinki və mis ölçmələrini davam etdirmədiyinə görə bu nisbətlər qan dəyərlərindən deyil, yalnız bildirilən gündəlik qida qəbullarından yaradıldı.

Əsas kohortda median tam qan seleniumu 184,12 µg/L, kvartillərarası aralıq 169,02-200,72 µg/L idi. Median gündəlik selenium qəbulu 99,60 µg/gün idi. Kohort medianının modeldəki təxminən 140 µg/L minimumdan yuxarı olması iştirakçıların yarıdan çoxunun əyrinin yüksək selenium tərəfində yerləşdiyini göstərir. Lakin bu müqayisə klinik referens interval yaratmır.

Niyə həm tam qan, həm də qidalanma seleniumu istifadə edildi?

Qidalanma qeydi insanın son 24 saatda nə istehlak etdiyini göstərdiyi halda, tam qan ölçümü istehlakla yanaşı sorulma, metabolizm, əlavə istifadəsi və başqa bioloji proseslərdən təsirlənən dövr edən ümumi selenium vəziyyətini təmsil edir. Bu iki ölçüm eyni şeyi ölçmür.

Tədqiqatçılar hər iki selenium mənbəyini eyni ümumiləşdirilmiş additiv modeldə qiymətləndirərək ayrı hamar əyrilər və ikisi arasındakı qarşılıqlı təsir səthini hesabladılar. Modelin məntiqini izah etmək üçün ümumi quruluş aşağıdakı kimi göstərilə bilər; bu tənlik məqalədə sözbəsöz çap edilmiş tənlik deyil, istifadə olunan GAM yanaşmasının izahedici təsviridir:

\[ g\{E(Y)\}=\beta_0+s_1(\mathrm{Se}_{kan})+s_2(\mathrm{Se}_{diyet})+te(\mathrm{Se}_{kan},\mathrm{Se}_{diyet})+\sum_{k}\beta_kX_k \]

Bu göstərimdə:

• Y CAP, LSM və ya Hepamet Fibrozis Skoru kimi nəticə dəyişənidir.
• g nəticə növünə uyğun əlaqə funksiyasıdır.
• s₁ və s₂ qan və qidalanma seleniumunun xətti olmaq məcburiyyətində olmayan əyriləridir.
• te iki selenium mənbəyinin birlikdə yaratdığı tensor qarşılıqlı təsir səthidir.
• X_k yaş, cins, təhsil, siqaret və digər tənzimləmə dəyişənlərini təmsil edir.

Qan və qidalanma seleniumu arasındakı birgə qarşılıqlı təsir həm CAP, həm də LSM üçün əhəmiyyətli idi; hər iki nəticədə də P dəyəri 0,001-dən aşağı idi. Bununla belə, izah olunan variasiya aşağı idi. İki selenium ölçümü birlikdə CAP dəyişkənliyinin yüzdə 2,3-ünü, LSM dəyişkənliyinin yüzdə 0,5-ini və Hepamet Fibrozis Skoru dəyişkənliyinin yüzdə 7,1-ini izah edirdi.

Bu nisbətlər mühüm sərhəd çəkir: selenium ölçülə bilən əlaqə daşısa belə, qaraciyər yağlanmasını təkbaşına izah edən dominant amil deyil. Qaraciyər yağlanması metabolik, davranış, genetik və ətraf mühit mənşəli çoxsaylı amillərdən ibarət çoxfaktorlu prosesdir.

Mərkəzi tapıntı: U formalı tam qan seleniumu-CAP əlaqəsi

Beş düyünlü məhdud kubik spline modellərində tam qan seleniumu ilə CAP arasındakı əlaqə xətti deyildi. Qeyri-xəttilik testi üçün P dəyəri 0,001-dən aşağı idi. Modelin proqnozlaşdırdığı CAP minimumu təxminən 140 µg/L-də idi və 1.000 bootstrap nümunələməsi ilə hesablanan yüzdə 95 etibar intervalı 138-158 µg/L idi.

U forması belə deməkdir: modelin aşağı selenium bölgəsindən təxminən minimuma doğru gedən hissəsində CAP azalır, minimumdan sonra yüksək selenium bölgəsində yenidən yüksəlir. Buna görə seleniumun təsiri “nə qədər çox, o qədər yaxşı” və ya “nə qədər çox, o qədər pis” kimi tək istiqamətli cümlə ilə izah edilə bilməz.

Şəkil 2-dəki əyrinin uclarında etibar zolaqlarının genişlənməsi də vacibdir. Çox aşağı və ya çox yüksək selenium səviyyələrində daha az iştirakçı olduğuna görə modelin qeyri-müəyyənliyi artır. Əyrinin uç nöqtələri müşahidələrin sıx olduğu orta hissə qədər dəqiq deyil.

Qan seleniumu dörd qrupa bölündükdə qaraciyər yağlanması prevalansı birinci kvartildə yüzdə 37,5, ikinci kvartildə yüzdə 39,7, üçüncü kvartildə yüzdə 46,9 və dördüncü kvartildə yüzdə 47,2 görünürdü. Bu kobud qruplaşdırma yuxarı selenium bölgəsindəki artımı göstərə bilsə də, birinci kvartilin içindəki çox aşağı səviyyələri ayrıca görə bilməz. U formasının müəyyənləşdirilməsi üçün davamlı və çevik əyri modellərindən istifadə edilməsinin səbəbi budur.

Təxminən 140 µg/L hədəf dəyər kimi istifadə edilə bilərmi?

Xeyr. Tədqiqatda hesablanan 140 µg/L dəyəri əsas kohortdakı statistik modelin CAP üçün təxmin etdiyi minimum nöqtədir. Klinik hədd, tövsiyə olunan qan səviyyəsi və ya əlavə hədəfi deyil.

Bunun ən açıq sübutu müstəqil doğrulama analizidir. 2021-2023 NHANES kohortunda U formalı qeyri-xətti əlaqə yenidən tapıldı və P dəyəri yenə 0,001-dən aşağı idi; lakin təxmin edilən minimum təxminən 80 µg/L-yə keçdi. Bu dəyər əsas kohortun 138-158 µg/L etibar intervalından kənarda idi.

Beləliklə, iki kohort arasında təkrarlanan tapıntı əyrinin U formalı olmasıdır. Dönüş nöqtəsinin dəqiq yeri zaman, nümunə quruluşu, qidalanma davranışları, əlavə istifadəsi, ölçmə paylanması və başqa məruz qalmalara görə dəyişə bilər.

Bundan əlavə tədqiqat tam qan seleniumunu ölçmüşdür. Serum, plazma, saç, dırnaq və ya yalnız qida istehlakından əldə olunan selenium dəyərləri eyni ölçü deyil. Əsas kohortdakı 140 µg/L nəticəsini başqa bioloji nümunə növlərinə birbaşa köçürmək düzgün olmaz.

Qidalanma mənşəli selenium/sink və selenium/mis nisbətləri

Tədqiqatçılar seleniumun sink və mislə qidalanma səviyyəsində balansını kəşfiyyat xarakterli olaraq qiymətləndirdilər. Ən aşağı üçdəbir qrupla müqayisədə aşağıdakı əlaqələr tapıldı:

Bu nəticələrin hamısı əsas kohortda daha yüksək qaraciyər yağlanması ehtimalı istiqamətində idi. Lakin E-dəyərlərinin 1,47-1,65 arasında olması ölçülməmiş və yalnız orta gücdə qarışdırıcının əlaqələri izah edə biləcəyini göstərir.

Daha vacibi, selenium/sink nisbətinin ən yüksək və ən aşağı qrupları arasındakı əlaqə doğrulama kohortunda təkrarlanmadı. Odds nisbəti 1,08-ə düşdü; yüzdə 95 etibar intervalı 0,78-1,49 və P dəyəri 0,68 idi. Buna görə müəlliflər qidalanma nisbətlərini doğrulanmış nəticələr deyil, yeni tədqiqat hipotezləri yaradan kəşfiyyat tapıntıları kimi qiymətləndirirlər.

Tək günlük 24 saatlıq qida xatırlamasının insanın adi uzunmüddətli mikroqida qəbulunu zəif təmsil etməsi bu qeyri-sabitliyə töhfə verə bilər. İnsanın yalnız bir gün nə yediyinə baxmaq aylarla davam etdirdiyi qidalanma tərzini ölçməklə eyni deyil.

Selenium metal qarışığı daxilində necə davrandı?

İnsanlar metallara ayrı-ayrılıqda deyil, qarışıqlar şəklində məruz qaldıqları üçün tədqiqatçılar üç müxtəlif qarışıq metodundan istifadə etdilər:

1. Kvantillərə əsaslanan g-hesablama (quantile g-computation)
2. Çəkili kvantil cəmi reqressiyası (weighted quantile sum regression, WQS)
3. Bayesçi nüvə maşın reqressiyası (Bayesian kernel machine regression, BKMR)

Bu metodlar eyni sualı fərqli fərziyyələrlə həll edir. Kvantillərə əsaslanan g-hesablama bütün metal qarışığının eyni anda bir kvartil yüksəlməsinin ümumi nəticəsini təxmin edir. WQS metalların müəyyən istiqamətdəki ümumi indeks daxilində nisbi çəkilərini hesablayır. BKMR isə qeyri-xətti əyriləri və metallar arasındakı qarşılıqlı təsirləri daha çevik şəkildə modelləşdirə bilir.

Kvantillərə əsaslanan g-hesablamada qurğuşun, kadmium, civə, manqan və seleniumdan ibarət qarışığın eyni anda bir kvartil yüksəlməsi aşağıdakı nəticələrlə əlaqəli idi:

• CAP üçün ümumi təsir ψ = -5,38 dB/m; yüzdə 95 etibar intervalı -8,34 ilə -2,42; P < 0,001.
• LSM üçün ψ = -0,69 kPa; yüzdə 95 etibar intervalı -0,97 ilə -0,41; P < 0,001.
• CAP ≥ 275 dB/m ilə təyin olunan yağlanma üçün ψ = -0,17; P = 0,001.
• LSM ≥ 8 kPa ilə təyin olunan fibrozis üçün ψ = -0,35; P < 0,001.
• Yüksək GGT üçün ψ = +0,28; yüzdə 95 etibar intervalı 0,16-0,41; P < 0,001.

Bu zahirən zidd nəticə qarışıq analizlərinin niyə ayrı-ayrı metal təsiri kimi oxunmamalı olduğunu göstərir. Qarışığın CAP və LSM ilə əlaqəsi bir istiqamətdə olduğu halda, GGT anormallığı ilə əlaqəsi əks istiqamətdə tapıldı. Bundan əlavə qarışıq daxilindəki müsbət və mənfi çəkilər hər metalın təkbaşına qoruyucu və ya toksik olması demək deyil. Çəkilər modelin ümumi indeksini yaradan istiqamətli töhfələrdir və metallar arasındakı korrelyasiyadan təsirlənir.

WQS analizində CAP-ın müsbət istiqamətli indeksində əmsal +11,63 idi və çəkilərin təxminən yüzdə 51-i manqana, yüzdə 48,9-u seleniuma aid idi. Mənfi istiqamətli CAP indeksində əmsal -13,98 idi; çəkilərin yüzdə 67,3-ü kadmiuma və yüzdə 24,1-i qurğuşuna aid idi. Bu iki istiqamət ayrı modellərdən gəldiyi üçün bir-birindən birbaşa çıxıla bilməz və ya tək fərdi metal təsirinə çevrilə bilməz.

Şəkil 6-da kvantillərə əsaslanan g-hesablama nəticələri ilə WQS əmsalları yan-yana göstərilmişdir. İki panel fərqli miqyası istifadə edir: birinci panel ümumi kvartil dəyişməsinin ψ təsirini, ikinci panel isə WQS indeksindəki bir vahidlik dəyişimin β əmsalını göstərir. Şəkildəki rəqəmləri panellər arasında birbaşa müqayisə etmək düzgün deyil.

Bayesçi qarışıq modeli U formasını təsdiqlədimi?

Beş metalın hamısını ehtiva edən ilk BKMR modeli manqan hiperparametrində yaxınlaşmadı. Buna görə tədqiqatçılar qurğuşun, kadmium, civə və seleniumdan ibarət yaxınlaşmış dörd metal modelini bildirdilər.

BKMR yanaşmasının ümumi məntiqi izah məqsədilə aşağıdakı kimi göstərilə bilər:

\[ Y_i=h(\mathrm{Pb}_i,\mathrm{Cd}_i,\mathrm{Hg}_i,\mathrm{Se}_i)+\boldsymbol{\beta}^{T}\mathbf{Z}_i+\varepsilon_i \]

Burada:

• Y_i insanın qaraciyər nəticəsidir.
• h dörd metalın qeyri-xətti ümumi təsirini təmsil edən çevik funksiyadır.
• Z tənzimləmə dəyişənləridir.
• ε modelin izah edə bilmədiyi xəta komponentidir.

Modelə sonradan daxil edilmə ehtimalları qurğuşun, kadmium və selenium üçün 1,00; civə üçün 0,94 idi. Seleniumun BKMR məruz qalma-cavab əyrisi də təxminən 140 µg/L ətrafında dönüş göstərən U formasını yenidən yaratdı.

Bu uyğunluq vacibdir, çünki məhdud kubik spline-lar və BKMR fərqli model fərziyyələrinə əsaslanır. Eyni formanın iki metodda görünməsi nəticənin yalnız müəyyən əyri texnikasından yaranan statistik görüntü olma ehtimalını azaldır. Buna baxmayaraq BKMR nəticələri də müşahidə məlumatını səbəbsəl sübuta çevirmir.

Civə-selenium antaqonizmi necə qiymətləndirildi?

Tədqiqatçılar civə-selenium balansını üç yolla yoxladılar:

1. Civə ilə selenium arasında multiplikativ qarşılıqlı təsir termini
2. Civə/selenium molyar nisbətinə tətbiq edilən çevik əyri
3. Molyar nisbətin medianın aşağısı və yuxarısı kimi müqayisəsi

Tədqiqatda nisbət molyar miqyasda istifadə edilmişdir. Molyar nisbətin tərif üzrə göstərimi aşağıdakı kimidir; bu ifadə məqalədə ayrıca tənlik kimi çap edilməmişdir:

\[ R_{\mathrm{Hg/Se}}=\frac{C_{\mathrm{Hg}}/M_{\mathrm{Hg}}}{C_{\mathrm{Se}}/M_{\mathrm{Se}}} \]

Burada:

• C_Hg və C_Se civə və seleniumun kütlə konsentrasiyalarıdır.
• M_Hg və M_Se elementlərin molyar kütlələridir.
• Bölmə əməliyyatı kütlə konsentrasiyalarını molyar miqdarlara çevirərək atom sayı baxımından müqayisə oluna bilən edir.

Əsas kohortda median civə/selenium molyar nisbəti 0,001 idi. İştirakçıların hamısı tədqiqatda istinad edilən və civənin seleniuma nisbətən dominant hala gəldiyi qəbul olunan 1,0 nisbətinin altında idi. Başqa sözlə, araşdırılan əhalidə selenium miqdarı molyar olaraq civədən xeyli yüksək idi.

Buna baxmayaraq kohortun öz daxilindəki nisbət fərqləri GGT baxımından məlumat daşıdı. Loqarifmik civə/selenium nisbətindəki artımın yüksək GGT ilə qarşılıqlı təsir odds nisbəti 1,58 idi; yüzdə 95 etibar intervalı 1,04-2,41 və P dəyəri 0,033 idi.

Eyni qarşılıqlı təsir:

• CAP ilə təyin olunan qaraciyər yağlanması üçün əhəmiyyətli deyildi.
• LSM ilə təyin olunan fibrozis üçün əhəmiyyətli deyildi.
• Hepamet Fibrozis Skoru üçün əhəmiyyətli deyildi.

Bu fərq son dərəcə vacibdir. Tədqiqat civə-selenium antaqonizminin birbaşa qaraciyər yağlanmasına səbəb olduğunu göstərməmişdir. Əhəmiyyətli tapıntı oksidləşdirici stress və qlutatyon metabolizmi ilə əlaqəli biomarker kimi şərh olunan GGT üzərindədir.

Molyar nisbətin çevik əyrisi loqarifmik GGT üçün çoxsaylı müqayisə düzəlişindən sonra da qeyri-xətti idi; Benjamini-Hochberg düzəldilmiş q dəyəri 0,018 idi. CAP üçün yalnız sərhəddə meyl görülərkən, LSM və Hepamet skoru üçün xətti və ya əhəmiyyətsiz nəticələr əldə edildi.

Nisbətin yuxarı yarısında olan şəxslərdə yağlanma və fibrozis ehtimalının daha aşağı olması, buna qarşılıq GGT anormallığının yüksəlmə meyli göstərməsi eyni məruz qalma balansının fərqli bioloji oxlarda fərqli istiqamətlərə uyğun gələ biləcəyini düşündürür. Müəlliflər bu mənzərəni tam açılıb-bağlanan bioloji açar əvəzinə, dozadan asılı pilləli antaqonizm kimi şərh edirlər.

GGT seleniumun qaraciyərə təsirini daşıyan vasitəçi idimi?

GGT öd yollarında yüksək konsentrasiyada olan və alkoqol, xolestaz, qlutatyon dövrü və müxtəlif metabolik hallarla dəyişə bilən fermentdir. Tədqiqatçılar GGT-ni qaraciyəri fiziki olaraq sərtləşdirən birbaşa səbəb kimi deyil, sistemik oksidləşdirici stress və qlutatyon metabolizminin göstəricisi kimi götürdülər.

Üçüncü tam qan selenium kvartili ilə birinci kvartil müqayisə edildikdə əhəmiyyətli fibrozis üçün ümumi nisbi risk 0,89 idi; yüzdə 95 etibar intervalı 0,79-0,97 və P dəyəri 0,004 idi.

Dörd istiqamətli parçalanmanın ümumi əlaqəsi belədir:

\[ TE=CDE+INT_{\mathrm{ref}}+INT_{\mathrm{med}}+PIE \]

Burada:

• TE ümumi təsirdir.
• CDE GGT sabit saxlanıldıqda qalan nəzarətli birbaşa təsirdir.
• INT_ref referens qarşılıqlı təsir komponentidir.
• INT_med vasitəçilik edilən qarşılıqlı təsir komponentidir.
• PIE yalnız GGT üzərindən irəlilədiyi fərz olunan saf dolayı təsirdir.

Ümumi təsirin parçalanmış nəticələri belə idi:

Mənfi dolayı komponent səbəbindən faizlər arifmetik olaraq yüzdə 100-ü keçə bilər. Bu, parçalanmanın əlavə təsir yaratdığı demək deyil; komponentlərdən birinin ümumi təsirə əks istiqamətdə olması ilə əlaqəlidir.

Nəticə etibarilə GGT seleniumun qaraciyər sərtliyinə təsirini daşıyan doğrulanmış vasitəçi kimi görünmədi. Daha uyğun şərh GGT-nin seleniumla əlaqəli təsirin hansı oksidləşdirici mühitdə daha aydın olduğunu göstərən təsir dəyişdiricisi və biomarker olmasıdır.

Hepamet Fibrozis Skoru necə performans göstərdi?

Hepamet Fibrozis Skoru tədqiqatda yenidən öyrədilmədi və əmsalları NHANES məlumatına görə dəyişdirilmədi. İspaniya və İtaliyadakı biopsiya əsaslı inkişaf tədqiqatında yayımlanan əmsallar birbaşa tətbiq edilərək LSM ≥ 8 kPa nəticəsinə qarşı sınaqdan keçirildi.

Əsas kohortdakı 2.810 nəfərlik ayırdetmə nümunəsində:

• AUROC 0,731 idi.
• Yüzdə 95 etibar intervalı 0,699-0,762 idi.
• Bootstrap optimizm düzəlişindən sonra AUROC 0,730 olaraq qaldı.
• Skor FIB-4-dən 0,057 AUROC vahidi daha yaxşı performans göstərdi.
• APRI-dən 0,072 AUROC vahidi daha yaxşı performans göstərdi.
• NAFLD Fibrozis Skorundan 0,029 AUROC vahidi daha aşağı performans göstərdi.

AUROC skorun fibrozisi olan və olmayan insanları sıralamaq qabiliyyətini göstərir. Lakin skorun insanları düzgün sıralaması onun verdiyi mütləq risk faizlərinin doğru olduğu demək deyil. Bu ikinci xüsusiyyət kalibrasiya ilə qiymətləndirilir.

Hepamet skorunun əsas kohortdakı kalibrasiyası zəif idi:

• Kalibrasiya kəsişməsi 2,738 idi; yüzdə 95 etibar intervalı 2,038-3,437.
• Kalibrasiya meyli 0,532 idi; yüzdə 95 etibar intervalı 0,452-0,612.
• Hosmer-Lemeshow testi P < 0,001 idi.

İdeal xarici kalibrasiyada kəsişmənin sıfıra, meylin birə yaxın olması gözlənir. Buradakı sapma biopsiya ilə hazırlanmış Avropa skorunun ABŞ əhalisindəki elastoqrafiya nəticəsinə birbaşa tətbiqinin mütləq riskləri düzgün vermədiyini göstərdi.

Axın sxemində yayımlanan 0,47 yüksək risk həddini keçən yalnız beş nəfərin olması da skorun bu əhaliyə eyni hədlə daşınmasının problemli ola biləcəyini göstərir.

2021-2023 doğrulama kohortunda AUROC 0,656-ya düşdü; yüzdə 95 etibar intervalı 0,606-0,703 idi. Etibar intervalı əsas kohortun təxmini ilə üst-üstə düşmürdü. Buna görə tədqiqat Hepamet skorunun bu populyasiyada birinci pillə skrininq vasitəsi kimi istifadəsini dəstəkləmir.

Müstəqil doğrulama hansı nəticələri dəstəklədi?

Doğrulama kohortu 3.310 yetkindən, fibrozis skoru alt nümunəsi isə 1.835 nəfərdən ibarət idi. Əsas tapıntıların zamanla davam edib-etmədiyini görmək üçün analizlər eyni mürəkkəb nümunə çəkiləri nəzərə alınmaqla təkrarlandı.

Şəkil 8-in əsas mesajı odur ki, bir tapıntının yalnız statistik olaraq əhəmiyyətli olması kifayət etmir. U formasının ümumi şəkli hər iki dövrdə görülsə də, qidalanma nisbətləri, dəqiq dönüş nöqtəsi və proqnoz skorunun performansı zamana həssas idi.

U forması üçün təklif olunan bioloji izahlar

Tədqiqatçılar U əyrisinin iki qolunun fərqli bioloji proseslərdən qaynaqlana biləcəyini müzakirə edirlər.

Aşağı selenium tərəfi: Selenium qlutatyon peroksidazlar kimi selenoproteinlərin quruluşuna daxil olur. Yetərsiz selenium vəziyyətində qlutatyon peroksidaza 4 kimi lipid peroksidlərini təmizləyən müdafiə sistemlərinin fəaliyyəti azala bilər. Fosfolipid hidroperoksidlərin toplanması yağla yüklənmiş qaraciyər hüceyrələrini dəmirdən asılı hüceyrə ölümü olan ferroptoza daha həssas edə bilər.

Yüksək selenium tərəfi: Artıq seleniumun qaraciyər mənşəli selenoprotein P ifrazını artıra biləcəyi, selenoprotein P-nin də insulin siqnalını zəiflədərək qaraciyərdə yağ sintezini dəstəkləyə biləcəyi irəli sürülür.

Bu izahlar tədqiqatın ölçülmüş mexanizm nəticələri deyil. Tədqiqatda qlutatyon peroksidaza 4, lipid peroksidləri, ferroptoz göstəriciləri və ya selenoprotein P ölçülməmişdir. Buna görə bu mexanizmlər müşahidə olunan epidemioloji əyri ilə uyğun bioloji şərhlərdir; bu məlumat dəstində sübut edilmiş vasitəçilik yolları deyil.

Tədqiqatın gündəlik həyat baxımından mənası

Tədqiqat seleniumun sadəcə “yaxşı antioksidant” və ya “zərərli metal” kimi tək istiqamətli təsnif edilə bilməyəcəyini göstərir. Qida maddələrində yetərli səviyyə ilə yüksək səviyyə eyni bioloji nəticəni verməyə bilər. Bundan əlavə bir elementin təsiri insanın başqa metallara məruz qalmasından və metabolik vəziyyətindən asılı olmaya bilər deyil; əksinə bu amillərlə birlikdə dəyişə bilər.

Lakin bu nəticələr insanların qan seleniumunu 140 µg/L-yə çatdırmağa çalışmalı olduğu mənasına gəlmir. Doğrulama kohortunda minimumun təxminən 80 µg/L-yə keçməsi bu dəyərin şəxsi hədəf kimi istifadə edilə bilməyəcəyini açıq şəkildə göstərir.

Tədqiqat həmçinin:

• Selenium əlavəsinin qaraciyər yağlanmasının qarşısını aldığını göstərmir.
• Yüksək seleniumun birbaşa qaraciyər xəstəliyinə səbəb olduğunu sübut etmir.
• Civənin qaraciyər baxımından qoruyucu olduğunu göstərmir.
• Qidalanmadakı selenium/sink və ya selenium/mis nisbəti üçün klinik hədəf təklif etmir.
• Hepamet Fibrozis Skorunun təkbaşına klinik qərar vermək üçün yetərli olduğunu göstərmir.

Praktik baxımdan ən məsuliyyətli şərh lazımsız selenium əlavəsinin “daha çox antioksidant daha yaxşıdır” düşüncəsi ilə istifadə edilməməsi və hər hansı biomarker nəticəsinin klinik kontekst daxilində qiymətləndirilməsidir. Bununla belə bu tədqiqat təkbaşına mövcud qidalanma və ya müalicə tövsiyələrini dəyişdirəcək səbəbsəl sübut vermir.

Tədqiqatın güclü tərəfləri

• Qaraciyər yağlanması yalnız diaqnoz kodu və ya insanın öz bəyanı ilə deyil, FibroScan ölçmələri ilə qiymətləndirildi.
• NHANES-in mürəkkəb nümunələmə çəkilərindən istifadə edilərək ABŞ yetkin əhalisini təmsil edən təxminlər əldə edildi.
• Selenium həm tam qan biomarkeri, həm də qidalanma qeydi vasitəsilə qiymətləndirildi.
• Xəttiliyi əvvəldən fərz etmək əvəzinə GAM və məhdud kubik spline-lardan istifadə edildi.
• Qarışıqlar kvantillərə əsaslanan g-hesablama, WQS və BKMR olmaqla üç fərqli metodla araşdırıldı.
• U forması müstəqil 2021-2023 NHANES kohortunda sınaqdan keçirildi.
• Analitik plan kohort kilidlənməzdən əvvəl OSF-də əvvəlcədən qeydiyyata alındı.
• Yanlış kəşf nisbəti birincili və alt qrup test ailələrində ayrıca nəzarət edildi.
• Kənar dəyərlərin kəsilməsi, çoxsaylı imputasiya, FibroScan tamamlanması üçün tərs ehtimal çəkisi, E-dəyərləri və bootstrap minimum analizi daxil olmaqla əvvəlcədən planlaşdırılmış həssaslıq analizləri tətbiq edildi.

Tədqiqatın məhdudiyyətləri

Kəsitsəl dizayn: Selenium və qaraciyər ölçmələri eyni dövrdə əldə edildi. Buna görə əvvəlcə yüksək və ya aşağı seleniumun, yoxsa qaraciyər xəstəliyinin meydana gəldiyi müəyyən edilə bilməz. Mövcud qaraciyər xəstəliyi selenoprotein P və dövr edən selenium səviyyələrini dəyişə bilər. Tərs səbəbsəllik müşahidə olunan əyrinin bir hissəsini yarada bilər.

Tək günlük qidalanma qeydi: Qidalanma ilə alınan selenium, sink və mis tək 24 saatlıq xatırlamaya əsaslanırdı. Gündəlik dəyişkənlik mikroqida nisbətlərini qeyri-sabit edə və real uzunmüddətli əlaqələri zəiflədə bilər.

Ümumi selenium ölçümü: NHANES ümumi tam qan seleniumunu ölçdü; selenoprotein P, GPx3, GPx4 və ya fərqli kimyəvi selenium növləri ayrıca ölçülmədi. Buna görə əyrinin iki qolunun fərqli selenoprotein yollarından qaynaqlandığı birbaşa göstərilə bilmədi.

GGT-nin spesifik olmaması: GGT oksidləşdirici stresslə yanaşı alkoqol istifadəsi, öd yolları prosesləri və xolestazdan təsirlənə bilər. GGT qarşılıqlı təsiri qlutatyon vəziyyətinin saf ölçüsü kimi oxunmamalıdır.

Model yaxınlaşma problemi: Beş metallı BKMR modeli manqan hiperparametrində yaxınlaşmadı. Son BKMR tapıntıları manqan çıxarılaraq qurulan dörd metal modelinə əsaslanır.

Seçim və natamam məlumat: Etibarlı FibroScan müayinəsi uyğun şəxslərin yalnız bir hissəsində tamamlandı və müayinəni tamamlayanların daha arıq olmağa meylli olduğu bildirildi. Tam məlumat tələb edən əsas analiz natamam ölçümü olan iştirakçıları xaric etdi.

Kiçik alt qruplar: MetALD alt qrupu və bəzi yüksək risk sinifləri kiçik idi. Bu alt analizlərin qeyri-müəyyənliyi daha yüksəkdir.

Minimum nöqtəsinin qeyri-sabitliyi: Əyrinin U forması doğrulansa da, minimum 140 µg/L-dən təxminən 80 µg/L-yə keçdi. Bu, tək bioloji optimal dəyər irəli sürülməsinə mane olur.

Klinik doğrulamanın olmaması: Tədqiqat qaraciyər biopsiyasına, prospektiv izləməyə və ya nəzarətli selenium müdaxiləsinə əsaslanmır. Tapıntılar klinik müalicə təsiri və ya əlavə təhlükəsizliyi sübutu deyil.

Tədqiqat nə deyir, nə demir?

Tədqiqatın Metodu və Nəticələri

Araşdırma dizaynı

Tənzimləmə dəyişənləri

Birincili tənzimləmə qrupu əvvəlcədən hazırlanmış istiqamətləndirilmiş dövrəsiz qrafikə əsaslanırdı. Modelə yaş, cins, irq və etnik mənşə, təhsil, yoxsulluq-gəlir nisbəti, siqaret keçmişi, cari alkoqol istifadəsi və ümumi enerji qəbulu daxil edildi.

Bədən kütlə indeksi, qlikozilləşmiş hemoglobin, LDL xolesterol, qan təzyiqi və diabet seleniumdan sonra yerləşə biləcək vasitəçi-qarışdırıcı dəyişənlər kimi qiymətləndirildi. Bunlar birincili ümumi təsir modelinə əlavə edilmədi; nəzarətli birbaşa təsir həssaslıq modelində istifadə edildi. Bu seçim seleniumun metabolik yollar vasitəsilə irəliləyə biləcək ümumi əlaqəsini həddindən artıq tənzimləmə ilə aradan qaldırmamaq məqsədilə edildi.

Qeyri-xətti analizlər

• Qan və qidalanma seleniumu üçün ümumiləşdirilmiş additiv modellər istifadə edildi.
• İki mənbənin ümumi təsiri tensor hasil qarşılıqlı təsiri ilə araşdırıldı.
• Ayrı-ayrı selenium ölçmələri beş düyünlü məhdud kubik spline-larla modelləşdirildi.
• Düyünlər 5., 27,5., 50., 72,5. və 95. persentillərdə yerləşdirildi.
• Qeyri-xətti model iç-içə xətti modellə müqayisə edildi.
• CAP minimumu bootstrap yenidən nümunələmə ilə qeyri-müəyyənlik intervalına bağlandı.

Qarışıq analizlərinin texniki mənası

Kvantillərə əsaslanan g-hesablamadakı ψ bütün metal komponentlərinin eyni anda bir kvartil yüksəlməsi halında gözlənən ümumi dəyişimi təmsil edir. Davamlı nəticələr üçün izahedici göstərim belədir:

\[ \Delta E(Y)=\psi \quad \text{bütün metal nicelikleri bir düzey birlikte yükseltildiğinde} \]

ψ tək bir metalın əmsalı deyil. Bütün qarışığın ümumi istiqamətini xülasə edir.

WQS çəkiləri müəyyən istiqamətdəki indeks daxilində metalların nisbi payıdır. Çəkinin yüksək olması təkbaşına səbəbsəl təsir, toksiklik və ya qoruyuculuq sübutu deyil.

BKMR-nin sonradan daxil edilmə ehtimalı da təsir ölçüsü deyil. Bir dəyişənin digər məruz qalmalar və model qeyri-müəyyənliyi nəzərə alındıqda nəticə ilə əlaqəli funksiyada saxlanılma ehtimalını göstərir.

Əsas rəqəmsal tapıntılar

Çoxsaylı test, həssaslıq və əvvəlcədən qeydiyyat

Birincili və alt qrup test ailələrində yanlış kəşf nisbəti 0,05 səviyyəsində ayrıca nəzarət edildi. Tədqiqatda tək mənbəli selenium modelləri, kənar dəyərlərin kəsilməsi, natamam məlumat üçün çoxsaylı imputasiya, FibroScan müayinəsinin tamamlanma ehtimalına görə tərs ehtimal çəkiləri, ölçülməmiş qarışdırıcılıq üçün E-dəyərləri və minimum nöqtəsinin bootstrap analizi daxil olmaqla on əvvəlcədən planlaşdırılmış həssaslıq analizi tətbiq edildi. Analizlərdə sabit təsadüfi ədəd toxumu istifadə edildi.

Araşdırma hipotezləri və analiz planı kohort kilidlənməzdən əvvəl Open Science Framework-də əvvəlcədən qeydiyyata alındı. Mətndə əvvəlcədən qeydiyyatdan sapmaların layihə qeydində siyahıya alındığı bildirilir. Hesabat üçün STROBE, TRIPOD-AI, AGReMA və STROBE-MR prinsiplərindən istifadə edildi.

Mənbə və Metod Qeydi

Bu məzmun Jie Li, Xiubo Sun, Jing Zhang, Lijie Zhai və Ling Yu tərəfindən hazırlanmış “Whole-blood selenium, mercury–selenium antagonism, and a multi-metal mixture in steatotic liver disease: a U-shaped association in NHANES with FibroScan” başlıqlı tədqiqata əsaslanır.

Mənbə SSRN-də elektron nüsxəsi olan preprint tədqiqat məqaləsidir. Mətndə açıq şəkildə “This preprint research paper has not been peer reviewed” xəbərdarlığı mövcuddur. Buna görə tədqiqat rəyçi qiymətləndirməsindən keçməmişdir. Mətndə məqaləyə aid jurnal qəbulu məlumatı və ya məqalə DOI-si yoxdur. 10.17605/OSF.IO/2FWN5 nömrəsi araşdırmanın OSF əvvəlcədən qeydiyyat DOI-sidir.

Tədqiqat yeni klinik sınaq, laboratoriya təcrübəsi və ya heyvan təcrübəsi deyil. ABŞ NHANES məlumatlarının kəsitsəl və müşahidə xarakterli ikincili analizidir. Qaraciyər nəticələri FibroScan CAP və LSM ölçmələrinə əsaslanır; qaraciyər biopsiyası, prospektiv izləmə və ya selenium müdaxiləsi yoxdur.

Araşdırmanın kəsitsəl dizaynı səbəbindən selenium ilə qaraciyər yağlanması arasındakı əlaqənin istiqaməti müəyyən edilə bilməz. Tapıntılar səbəbsəllik, müalicə təsiri, əlavə faydası, əlavə təhlükəsizliyi və ya şəxsi qan seleniumu hədəfi sübutu deyil.

Müəlliflər tədqiqatın sonunda nəticələrin selenium əlavəsini dəstəkləmədiyini, Hepamet Fibrozis Skorunu bu populyasiyada birinci pillə skrininq vasitəsi kimi tövsiyə etmədiklərini və dəqiq istiqamətin yalnız prospektiv kohortlar, fərqli selenoproteinlərin ayrıca ölçülməsi, təkrarlanan qidalanma qeydləri və biopsiya ilə dəstəklənmiş qaraciyər nəticələri ilə müəyyən edilə biləcəyini açıq şəkildə bildirirlər.

Müəlliflərin bəyanına görə süni intellekt dəstəkli alətlər tədqiqat dizaynını və ya elmi şərhi müəyyən etmək üçün istifadə edilməmişdir. Araşdırmaçılar analitik planı tamamladıqdan sonra bəzi göndərişdən əvvəlki həssaslıq analizlərinin kod tətbiqində və cümlə səviyyəsində dil redaktəsində məhdud şəkildə istifadə edilmişdir. Müəlliflər bütün rəqəmsal nəticələri statistik çıxışlarla yoxladıqlarını və tədqiqatın məsuliyyətini daşıdıqlarını bildirmişlər.

Tədqiqatda maraqlar toqquşması bildirilməmişdir. NHANES əsas protokolunun müvafiq etik şura tərəfindən təsdiqləndiyi və iştirakçılardan yazılı razılıq alındığı qeyd edilmişdir. Mövcud tədqiqat anonimləşdirilmiş ictimai məlumatların ikincili analizi olduğuna görə əlavə etik şura təsdiqi tələb olunmamışdır.

Bu məqalə yalnız yüklənmiş elmi tədqiqatın ehtiva etdiyi metodlar, nəticələr, cədvəllər, şəkillər, məhdudiyyətlər və müəllif şərhləri əsasında hazırlanmışdır. Tədqiqatda olmayan klinik, kommersiya və ya səbəbsəl iddialar əlavə edilməmişdir. İzah məqsədilə verilən ümumi GAM, BKMR, molyar nisbət və dörd istiqamətli parçalanma göstərimləri müvafiq metodların məntiqini başadüşülən etmək üçün istifadə olunmuş və orijinal məqalədə sözbəsöz çap edilmiş tənliklər olmadığı açıq şəkildə qeyd edilmişdir.