Pankreatik duktal adenokarsinomanın (pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC) erkən mərhələdə serumdan aşkarlanmasını araşdıran bu işdə karbonhidrat antigeni 19-9 (CA19-9) səviyyəsini ölçmək üçün Signal-Enhanced Lateral Flow Immunoassay (SELFI) adlı siqnalı gücləndirilmiş lateral axın immunoassayı hazırlanmışdır. Sistem silika nanoparçacığının üzərində çoxsaylı qızıl nanoparçacıqlarının yerləşdirildiyi SiO₂@Au@Au nanoproblarında nanometr miqyaslı boşluqların yaratdığı plazmonik “hotspot” sahələrindən istifadə edir. SELFI CA19-9 analizini təxminən 15 dəqiqədə tamamlamış və işdə 0.012 U mL⁻¹ aşkarlama həddinə çatmışdır. Klinik serum qiymətləndirməsində erkən mərhələ PDAC ilə sağlam nəzarətləri ayırmaqda orta ROC-AUC dəyəri SELFI üçün 0.862, ELISA üçün 0.854, klassik LFIA üçün isə 0.550 olmuşdur. Bununla belə, tədqiqat tək mərkəzdə aparılmış, bütün iştirakçılar Cənubi Koreyalı olmuş və iş real həyat populyasiya skrininqinə əsaslanan müstəqil klinik doğrulama deyildir.

SELFI-nin əsas yeniliyi CA19-9 üçün yeni biomarker tapmaq deyil, mövcud CA19-9 siqnalını daha güclü və daha aşağı konsentrasiyalarda oxuna bilən edən nanoprob memarlığı qurmaqdır. Qızıl nanoparçacıqları arasındakı məsafə azaldıqca elektromaqnit sahə intensivliyi artır; müəyyən nanometr aralıqlarında yaranan plazmonik hotspot bölgələri görünən işıq sönümlənməsini və nitroselüloz membran üzərində kolorimetrik kontrastı gücləndirir.

Analitik model sınaqlarında SELFI test xəttindəki siqnal təxminən 15 dəqiqədə doyma səviyyəsinə çatmışdır. Eyni işdə ELISA proseduru üçün 285 dəqiqə tələb olunmuşdur. SELFI-də CA19-9 konsentrasiyası 1 U mL⁻¹ olduqda ölçülən kolorimetrik siqnal intensivliyi 24.67, 200 U mL⁻¹ olduqda isə 73.17 olmuşdur; tək qızıl nanoparçacığına əsaslanan klassik LFIA-da eyni aralıqda siqnal 6.59-dan 11.76-ya qalxmışdır. İşdə SELFI-nin yalnız CA19-9 üçün deyil, model kalibrləmə təcrübələrində PSA və ICAM-1 üçün də klassik LFIA-dan daha güclü analitik siqnal meyli göstərdiyi bildirilmişdir; lakin bu əlavə sınaqlar həmin biomarkerlərlə başqa xəstəliklərin klinik diaqnozunun təsdiqləndiyi anlamına gəlmir.

Klinik baxımdan ən diqqətçəkən nəticə erkən mərhələ PDAC qrupunda alınmışdır. Sağlam nəzarətlərlə erkən mərhələ xəstələr müqayisə edildikdə SELFI-nin orta AUC dəyəri 0.862, ELISA-nın 0.854 olmuş və təkrarlı statistik analizdə fərq üçün P < 0.0001 bildirilmişdir. İrəliləmiş mərhələ PDAC ilə sağlam nəzarətlər müqayisə edildikdə isə SELFI və ELISA demək olar ki, eyni performans göstərmişdir: AUC dəyərləri müvafiq olaraq 0.925 və 0.926 olmuş, aradakı fərq əhəmiyyətli olmamışdır (P = 0.3363). Buna görə nəticələr SELFI-nin xüsusilə erkən mərhələ nümunələrində ümidverici ayırdetmə gücü verdiyini dəstəkləyir, lakin metodun klinik skrininq standartına çevrildiyini və ya müstəqil populyasiyalarda doğrulandığını göstərmir.

Türkiyə baxımından nə ifadə edir?

İşdəki 150 iştirakçının hamısı Cənubi Koreyalı idi və nümunələr tək bir üçüncü səviyyə xəstəxanada toplanmışdı. Buna görə SELFI üçün bildirilən AUC dəyərləri, CA19-9 paylanmaları və gələcəkdə istifadə oluna biləcək diaqnostik eşiklər Türkiyədəki xəstə və sağlam populyasiyalara birbaşa köçürülə bilməz. Türkiyədə tətbiq imkanının qiymətləndirilməsi üçün yerli və müstəqil xəstə kohortlarında, müxtəlif klinik mərkəzləri əhatə edən doğrulama işləri, testin analitik standartlaşdırılması və əvvəlcədən müəyyən edilmiş diaqnostik eşiklərin sınağı lazımdır. Bu iş Türkiyədə rutin klinik istifadəni sübut etmir; lakin sürətli və yüksək siqnallı lateral axın əsaslı CA19-9 ölçümünün araşdırıla biləcəyi texniki platforma təqdim edir.

Tədqiqatın əsas problemi nədir?

Tədqiqatın çıxış nöqtəsi pankreatik duktal adenokarsinomanın erkən mərhələdə aşkarlanmasının çətin olmasıdır. İş yeni PDAC biomarkeri kəşf etmək yerinə, serumda istifadə olunan CA19-9 biomarkerini daha sürətli və daha həssas ölçə bilən analiz sistemi inkişaf etdirməyə yönəlmişdir.

Lateral axın immunoassayları qısa analiz müddəti və sadə iş prinsipi səbəbilə üstünlük daşıyır. Ancaq klassik sistemlərdə istifadə olunan təxminən 20 nm-lik tək qızıl nanoparçacıqların rəng siqnalı aşağı hədəf konsentrasiyalarında yetərsiz qala bilir. Tədqiqatçılar bu problemi tək AuNP siqnalını sadəcə böyütməklə deyil, çoxsaylı qızıl nanoparçacıqlarını silika nüvəsi üzərində idarə olunan nanoboşluqlarla birləşdirməklə həll etməyə çalışmışdır.

SELFI necə işləyir?

SELFI-də istifadə olunan əsas nanoprob SiO₂@Au@Au strukturudur. Silika nanoparçacığı daşıyıcı nüvə rolunu oynayır; səthindəki qızıl nanoparçacıqları bir-birinə nanometr ölçüsündə yaxınlaşır. Bu dar boşluqlarda lokalizə səth plazmon rezonansı səbəbilə güclü elektromaqnit sahələr, yəni plazmonik hotspot-lar yaranır.

Mexanizm izahına görə yerli elektrik sahəsinin güclənməsi nanoparçacıqların absorbsion kəsiyini artırır. Daha çox düşən işığın udulması ağ nitroselüloz membran üzərində nanoprobu daha tünd və yüksək kontrastlı edir. Beləliklə eyni hədəf konsentrasiyasında klassik tək AuNP əsaslı LFIA ilə müqayisədə daha yüksək kolorimetrik siqnal əldə edilir.

Test zamanı CA19-9 nanoprob üzərindəki aşkarlama antikoru ilə test xəttindəki tutucu antikor arasında immunoloji olaraq tutulur. Test xəttində toplanan SiO₂@Au@Au nanoprobları tünd rəngli siqnal yaradır. Bu siqnal fotoşəkilə alındıqdan sonra ImageJ ilə kəmiyyətcə qiymətləndirilmiş və kalibrləmə əyriləri ilə CA19-9 konsentrasiyasına çevrilmişdir.

Nanoboşluq niyə vacibdir?

Tədqiqatçılar nanoprob dizaynını əvvəlcə üçölçülü dalğa optikası simulyasiyaları ilə araşdırmışdır. Modeldə 168 nm diametrli SiO₂ nanoparçacığının səthinə 270 AuNP bərabər paylanmışdır. Qızıl nanoparçacıqları arasındakı G_Au boşluqları 10, 8, 6, 4, 2 və 1 nm kimi analiz edilmişdir. 400–800 nm dalğa uzunluğu aralığında TE-polyarizasiyalı elektromaqnit dalğalar istifadə edilmiş və nanostrukturun suda olduğu qəbul edilmişdir.

Simulyasiyada AuNP-lər arasındakı boşluq azaldıqca səthdəki elektrik sahəsi güclənmişdir. Xüsusən G_Au 6 nm-dən aşağı düşdükdə nanoparçacıqlar arasında aydın hotspot bölgələri yaranmışdır. Absorbsiya, saçılma və ekstinksiya kəsikləri də elektrik sahəsi gücləndikcə artmışdır.

Artımın yalnız qızıl nanoparçacıqlarının diametrinin böyüməsindən qaynaqlanıb-qaynaqlanmadığı ayrıca yoxlanmışdır. Ən böyük AuNP diametrində birləşdirilmiş nanostruktur içindəki AuNP-nin absorbsion kəsiyi silika səthindəki izolyasiya olunmuş tək AuNP-dən təxminən 2.65 dəfə yüksək olmuşdur. Sabit AuNP diametrində boşluq məsafəsinin azaldılması hotspot yaranmasında daha güclü dəyişiklik doğurmuşdur. Bu nəticələr siqnal güclənməsinin əsas amilinin yalnız hissəcik ölçüsü deyil, hissəciklər arasındakı nanoboşluğun yaratdığı plazmonik qarşılıqlı təsir olduğunu dəstəkləyir.

Nanoproblar necə istehsal və təsdiq edildi?

Eksperimental mərhələdə təxminən 145 nm diametrli SiO₂ nanoparçacıqları modifikasiya edilmiş Stöber üsulu ilə hazırlanmışdır. Silika səthi APTES ilə aminləşdirilmiş, 3–5 nm diametrli qızıl nanoseed-lər hazırlanaraq SiO₂-NH₂ səthinə bağlanmış və sonra seed-mediated growth üsulu ilə AuNP-lər böyüdülmüşdür.

Qızıl prekursoru və askorbin turşusu əlavə etmə dövrlərinin sayı dəyişdirilərək SiO₂@Au@Au₁, SiO₂@Au@Au₃, SiO₂@Au@Au₅, SiO₂@Au@Au₇, SiO₂@Au@Au₉ və SiO₂@Au@Au₁₁ strukturları alınmışdır. Cs-STEM görüntülərindən orta AuNP-AuNP boşluqları müvafiq olaraq 9.55, 7.63, 5.89, 3.53, 1.33 və 1.20 nm müəyyən edilmişdir.

Görünən işıq ekstinksiyası boşluq azaldıqca artmışdır. Ən inkişaf etmiş SiO₂@Au@Au₁₁ strukturunda maksimum ekstinksiya 0.426, həmin strukturdan silika nüvəsi çıxarıldıqdan sonra alınan tək AuNP-lərdə 0.120 və 3–5 nm qızıl nanoseed-lərdə 0.031 ölçülmüşdür. SiO₂@Au@Au₁₁ nanoprobunun maksimum görünən işıq ekstinksiyası 200 nm AuNP-lərə görə təxminən 58 dəfə, klassik LFIA-dakı 20 nm AuNP-lərə görə isə təxminən 1.439 dəfə yüksək olmuşdur.

CA19-9 analizi nə qədər sürətlidir?

SELFI test xəttinin rəng intensivliyi 1, 2, 5, 10, 15, 30 və 60 dəqiqəlik inkişaf müddətlərində izlənmişdir. Siqnal ilk dəqiqələrdə sürətlə artmış və təxminən 15 dəqiqədən sonra ImageJ ölçmələrində doyma səviyyəsinə yaxınlaşmışdır. Buna görə sonrakı ölçmələrdə 15 dəqiqəlik analiz müddəti istifadə edilmişdir. Müqayisə edilən ELISA prosedurunun ümumi analiz müddəti isə 285 dəqiqə verilmişdir.

0–200 U mL⁻¹ CA19-9 aralığındakı model sınaqlarda SELFI test xətti 5 U mL⁻¹-dən yuxarı konsentrasiyalarda çılpaq gözlə seçilə bilmiş, klassik LFIA-da isə 100 U mL⁻¹-ə qədər görünən test xətti əldə edilməmiş və 100 U mL⁻¹-də belə siqnal zəif olmuşdur.

Aşkarlama həddi nə idi?

SELFI üçün bildirilən CA19-9 aşkarlama həddi (limit of detection, LOD) 0.012 U mL⁻¹, kommersiya ELISA üçün 0.3 U mL⁻¹ idi. Nəticə bölümündə klassik 20 nm AuNP əsaslı LFIA üçün LOD 121.477 U mL⁻¹ verilmiş və SELFI LOD dəyərinin bundan 10.123 dəfə aşağı olduğu bildirilmişdir.

Mənbədaxili uyğunsuzluq qeydi: Discussion bölümündə klassik LFIA üçün eyni LOD 12.477 U mL⁻¹ kimi yazılmışdır. Results bölümündə isə 121.477 U mL⁻¹ dəyəri vardır və 10.123 qat fərq 121.477 U mL⁻¹ ilə uyğundur. Buna görə iki rəqəm səssizcə tək dəyərə endirilməmişdir.

Klinik serum nümunələri nə göstərdi?

Klinik qiymətləndirmədə 150 serum nümunəsi istifadə olunmuşdur: 50 sağlam nəzarət, 40 erkən mərhələ/resektabl PDAC və 60 irəliləmiş mərhələ/lokal irəliləmiş və ya metastatik PDAC. CA19-9 səviyyələri SELFI, klassik LFIA və ELISA ilə qiymətləndirilmişdir.

ROC analizində hər qrupdakı nümunələrin 90%-i təsadüfi seçilmiş və bu proses 100 dəfə təkrarlanmışdır. Beləcə tək bir nümunə bölünməsinə bağlı nəticə əvəzinə 100 ROC əyrisi və 100 AUC dəyəri yaradılmışdır.

Erkən mərhələ PDAC ilə sağlam nəzarətlər müqayisəsində SELFI AUC 0.862 (%95 CI: 0.841–0.888), ELISA 0.854 (%95 CI: 0.834–0.881), klassik LFIA isə 0.550 (%95 CI: 0.528–0.556) idi. SELFI ilə ELISA AUC paylanmalarının müqayisəsində P < 0.0001 bildirilmişdir.

İrəliləmiş mərhələ PDAC ilə sağlam nəzarətlərdə SELFI AUC 0.925 (%95 CI: 0.914–0.949), ELISA 0.926 (%95 CI: 0.917–0.940), LFIA 0.692 (%95 CI: 0.676–0.713) olmuşdur. Bu halda SELFI ilə ELISA arasında fərq əhəmiyyətli deyildi (P = 0.3363). Bütün 150 nümunə birlikdə qiymətləndirildikdə SELFI üçün AUC 0.899, ELISA üçün 0.896, LFIA üçün 0.634 tapılmışdır.

İkinci mənbədaxili uyğunsuzluq: Discussion bölümündə bütün nümunələr üçün “0.896 vs. 0.899” sırası cümlənin SELFI-nin ELISA-dan yüksək olduğu yönündəki məzmunla tərs düşür. Tablo 1 və Şəkil 4 dəyərləri ELISA = 0.896 və SELFI = 0.899 kimi verdiyindən burada həmin dəyərlər qorunmuşdur.

Şəkillər nə izah edir?

Şəkil 1 PDAC hüceyrələrindən serum CA19-9 ölçümünə uzanan bioloji konteksti, SiO₂@Au@Au nanoproblarındakı nanoboşluqları, SELFI test şeridinin iş prinsipini və ELISA ilə analiz müddəti müqayisəsini göstərir. Şəkil 2 sayısal elektromaqnit simulyasiyası ilə eksperimental nanostruktur xarakterizasiyasını birləşdirir. Şəkil 3 SELFI-nin 15 dəqiqəyə yaxın siqnal doymasını, CA19-9 konsentrasiyasına qarşı SELFI və LFIA siqnal əyrilərini, həmçinin PSA və ICAM-1 kalibrləmələrini təqdim edir. Şəkil 4 isə 150 klinik serum nümunəsi ilə qurulan ROC analizini göstərir.

Çalışmanın dəstəklədiyi nəticələr

• SiO₂@Au@Au nanostrukturlarındakı kiçik AuNP-AuNP boşluqları plazmonik hotspot yaranması və güclü optik ekstinksiya ilə əlaqəlidir.
• SiO₂@Au@Au₁₁ nanoprobları klassik tək AuNP-lərdən daha güclü kolorimetrik siqnal vermişdir.
• SELFI təcrübə şərtlərində CA19-9 ölçümünü təxminən 15 dəqiqədə həyata keçirmişdir.
• SELFI üçün CA19-9 LOD dəyəri 0.012 U mL⁻¹ kimi bildirilmişdir.
• Cənubi Koreya serum kohortunda SELFI erkən mərhələ PDAC ilə sağlam nəzarətləri ayırmada AUC 0.862 göstərmişdir.
• Klassik 20 nm AuNP-LFIA klinik ayırdetmə performansında SELFI və ELISA-dan aşağı olmuşdur.
• PSA və ICAM-1 model kalibrləmələrində də SELFI klassik LFIA-ya görə daha yüksək analitik siqnal meyli göstərmişdir.

Çalışmanın dəstəkləmədiyi və ya hələ sübut etmədiyi nəticələr

• SELFI-nin ümumi əhali üçün pankreas xərçəngi skrininqinə hazır olduğu göstərilməmişdir.
• Müstəqil çoxmərkəzli və ya beynəlxalq klinik doğrulama aparılmamışdır.
• Türk populyasiyasında diaqnostik performans qiymətləndirilməmişdir.
• Klinik istifadəyə çevrilə biləcək son və müstəqil doğrulanmış cutoff müəyyən edilməmişdir.
• Testin erkən diaqnozla sağqalımı və ya müalicə nəticələrini yaxşılaşdırdığı göstərilməmişdir.
• CA19-9-un bioloji məhdudiyyətləri aradan qaldırılmamışdır.
• PSA və ICAM-1 model təcrübələri həmin biomarkerlərlə əlaqəli xəstəliklərdə klinik diaqnostik performansı sübut etmir.
• Nəticələr fərqli etnik, coğrafi və klinik populyasiyalara birbaşa genellənə bilməz.

Çalışmanın Yöntemi ve Bulguları

Tədqiqat dizaynı və klinik nümunə

İnsan serum nümunələrinin istifadəsi üçün Seoul National University Bundang Hospital Human Bioresource Center-dən etik icazə alınmışdır. Etik komitə nömrəsi X-2011-651-903 kimi bildirilmiş və bütün iştirakçılardan yazılı məlumatlandırılmış razılıq alınmışdır. Xəstə məlumatları analizdən əvvəl anonimləşdirilmişdir.

Sağlam nəzarətlər yaş və cinsiyyət baxımından xərçəng qrupları ilə propensity matching üsulu ilə uyğunlaşdırılmışdır. Bütün iştirakçılar Uzaq Şərqi Asiyalı və Cənubi Koreyalı idi. Nümunə həcmi əvvəlcədən güc analizi ilə deyil, mövcud klinik nümunələrin əlçatanlığı ilə müəyyən edilmişdir; təcrübələr randomizə edilməmiş və tədqiqatçılar korlanmamışdır.

Sayısal nanostruktur simulyasiyası

Optik simulyasiyalar COMSOL Multiphysics 5.4 ilə aparılmışdır. 400–800 nm dalğa uzunluğunda TE-polyarizasiyalı elektromaqnit dalğa tətbiq edilmişdir. Modeldə 168 nm SiO₂ kürəsinin üzərində 270 AuNP yerləşdirilmiş, G_Au boşluqları 10, 8, 6, 4, 2 və 1 nm seçilmişdir.

SiO2@Au@Au nanoprob istehsalı

Təxminən 145 nm SiO₂ nanoparçacıqları modifikasiya edilmiş Stöber üsulu ilə hazırlanmış, səth APTES ilə aminləşdirilmiş, 3–5 nm Au nanoseed-lər NaBH₄ ilə hazırlanıb səthə bağlanmışdır. 0.2 mg SiO₂@Au, 9.8 mL %2 PVP məhluluna əlavə edilmiş və hər beş dəqiqədə 20 μL 10 mM HAuCl₄ ilə 40 μL 10 mM askorbin turşusu əlavə edilərək müxtəlif böyütmə dövrləri qurulmuşdur.

Antikor konjuqasiyası və test şeridi

SiO₂@Au@Au₁₁ nanoproblarının səthinə 11-MUA ilə karboksil qrupu əlavə edilmiş, qruplar EDC və sulfo-NHS ilə aktivləşdirilmiş və CA19-9 monoklonal aşkarlama antikoru A46400 nanoproba bağlanmışdır. Test və nəzarət xəttlərində müvafiq olaraq anti-CA19-9 tutucu antikor və goat anti-mouse IgG istifadə edilmişdir; membranlar qurudulub 4 mm enində kəsilmişdir.

SELFI model analizi və kalibrləmə

Model CA19-9 testində 3 μL nümunə, 5 μL SiO₂@Au@Au₁₁ nanoprob süspansiyonu və 25 μL %0.5 PBST birlikdə 33 μL həcm yaratmışdır. Şerit 15 dəqiqə inkişaf etdirilmiş, test xətti fotoşəkilə alınmış və rəng intensivliyi ImageJ ilə ölçülmüşdür. Kalibrləmə üçün 0-dan 37000 U mL⁻¹-ə qədər CA19-9 standartları istifadə edilmişdir.

SELFI üçün CA19-9 kalibrləmə əyrisi:

\[ \\mathrm{Signal\\ intensity} = 83.84+ \\frac{14.75-83.84} {1+\\left(\\frac{\\mathrm{Concentration}}{20.62}\\right)^{0.85}} \\]

Klassik LFIA üçün:

\[ \\mathrm{Signal\\ intensity} = 31.13+ \\frac{6.45-31.13} {1+\\left(\\frac{\\mathrm{Concentration}}{689.82}\\right)^{1.26}} \\]

Ümumi sigmoid model və ters çevirmə tənliyi ilə siqnal intensivliyi konsentrasiyaya çevrilmiş, LOD siqnalı isə \(I_{\\mathrm{LOD}} = I_{\\mathrm{Blank}} + 3\\sigma_{\\mathrm{Blank}}\) kimi hesablanmışdır.

Klinik serum analizi və statistika

Serum nümunələri SELFI və LFIA-dan əvvəl %0.5 PBST ilə 10 dəfə seyreldilmişdir. Hər nümunədən 3 μL istifadə olunmuşdur. ELISA ölçmələri istehsalçı protokoluna görə, ikili təkrarlarla aparılmış və konsentrasiyalar dördparametrli lojistik regresiya əyrisindən hesablanmışdır.

ROC və AUC hesablamaları R kodu və pROC kitabxanası ilə aparılmışdır. Hər qrupdan 10% təsadüfi kənarda saxlanmış, 90% nümunə ilə analiz aparılmış və sabit random seed ilə 100 dəfə təkrarlanmışdır. AUC paylanmalarının müqayisəsində iki yönlü Student t-testi istifadə edilmişdir.

Araşdırmanın əsas metodoloji sərhədləri

• Nümunə həcmi əvvəlcədən güc analizinə görə müəyyən edilməmişdir.
• Çalışma tək mərkəzlidir və bütün iştirakçılar Cənubi Koreyalıdır.
• Təcrübələr randomizə edilməmiş, tədqiqatçılar qruplara və nəticə qiymətləndirməsinə kor olmamışdır.
• Cinsiyyətə görə diaqnostik alt analiz üçün kifayət qədər güc yoxdur.
• SELFI üçün müstəqil xarici kohortda əvvəlcədən müəyyən edilmiş klinik cutoff doğrulaması aparılmamışdır.

Mənbə və metod qeydi

Yazarlar

Sohyeon Jang, Minsup Shin, Jiseok Han, Han-Joo Bae, Yuna Youn, Hye-Seong Cho, Kwanghee Yoo, Jun-Sik Chu, Jaehyun An, Geunhyeong An, Hyejin Chang, Jin-Hyeok Hwang, Jaehi Kim, Jihwan Song, Jong-chan Lee, Luke P. Lee və Bong-Hyun Jun.

Bərabər töhfə: Sohyeon Jang, Minsup Shin və Jiseok Han işə bərabər töhfə vermişdir. Məsul yazarlar: Jaehi Kim, Jihwan Song, Jong-chan Lee, Luke P. Lee və Bong-Hyun Jun.

Kurumlar, maliyyə və məlumat

Kurumlar Koreya və ABŞ-dakı Konkuk University, Hanbat National University, Seoul National University Bundang Hospital, BioSquare, Kangwon National University, Seoul National University, Harvard Medical School, Brigham and Women’s Hospital, University of California Berkeley və POSTECH ilə əlaqəlidir. Maliyyə Republic of Korea Ministry of Science and ICT və National Research Foundation of Korea proqramları ilə əlaqələndirilmişdir. İşlənmiş kəmiyyət məlumatları və ROC/statistik analiz məlumatları əlavə cədvəllərdə təqdim edilmiş, insan serumuna aid fərdi klinik məlumatlar etik və hüquqi məxfilik səbəbilə açıq paylaşılmamışdır. Kodun GitHub-da JKim-45/SELFI deposunda və Zenodo DOI 10.5281/zenodo.17958691 ilə arxivləndiyi bildirilmişdir.

Yazar töhfələri və maraq toqquşması

S.J., M.S., J.K. və B.-H.J. təcrübələri dizayn etmiş; S.J., M.S., J.H., H.-J.B., Y.Y., H.-S.C., K.Y., J.-S.C., J.A., G.A. və J.K. təcrübə və analizləri aparmış; J.K. statistik R kodlarını yazmış; S.J., M.S., J.H., Y.Y., J.K., J.-C.L. və B.-H.J. məqaləni hazırlamış; L.P.L. və B.-H.J. ümumi prosesi nəzarətdə saxlamışdır. Yazarlar maraq toqquşması olmadığını bildirmişdir.

Lisenziya, tutarsızlıq və şərh sərhədi

Məqalə CC BY-NC-ND 4.0 lisenziyası ilə yayımlandığı üçün orijinal Şəkil 1–4 Verianla məzmununda kopyalanmamış və uyğunlaşdırılmış şəkildə yenidən çəkilməmişdir. Mənbədə klassik LFIA LOD üçün 121.477 və 12.477 U mL⁻¹ kimi iki fərqli yazılış, həmçinin ümumi AUC cümləsində 0.896 və 0.899 sırasına dair anlatım uyğunsuzluğu vardır; Verianla bunları səssizcə düzəltməmişdir.

Bu iş nanobiosensor və diaqnostik assay inkişaf etdirmə tədqiqatıdır. Nəticələr SELFI-nin mövcud kohortda CA19-9-u sürətli və aşağı analitik LOD ilə ölçə bildiyini və erkən mərhələ PDAC/sağlam nəzarət müqayisəsində güclü AUC göstərdiyini dəstəkləyir. Lakin tək mərkəzli və tək coğrafi-etnik populyasiyalı, randomizasiyasız və korlanmamış dizayn, əvvəlcədən güc analizi ilə müəyyən edilməmiş nümunə həcmi və xarici doğrulama çatışmazlığı səbəbilə SELFI-nin rutin klinik skrininq və ya diaqnoz standartı olduğu nəticəsi çıxarıla bilməz.